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公开(公告)号:CN117210437B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202311113440.3
申请日:2023-08-29
Abstract: 本发明公开了两种新型向导RNA依赖型核酸内切酶Gs12‑2和Gs12‑14,通过实验鉴定发现,Gs12‑2的PAM识别序列为HVH(H=A/T/C,V=A/C/G),Gs12‑14的PAM识别序列为TTYV(Y=C/T,V=A/C/G),其优点在于,与已知LbCas12a相比,这两个核酸内切酶的靶标识别范围更广,能够高效特异切割基因组,并且还具有反式切割作用,即非特异性、单链DNase活性。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑2和Gs12‑14系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN118979028A
公开(公告)日:2024-11-19
申请号:CN202411320266.4
申请日:2024-09-20
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种Gs12‑7核酸内切酶变体及其介导的基因编辑系统。具体地,通过理性突变策略构建2个Gs12‑7突变体并进行比较,发现将Gs12‑7核酸内切酶第157位氨基酸由Glu突变为Arg后,能显著提高该基因编辑酶的活性,并将此变体称为Gs12‑7MAX。本发明提供了基于CRISPR‑Gs12‑7MAX系统介导的高效基因编辑技术,在基因组定点修饰领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116410955B
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202310247616.8
申请日:2023-03-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12Q1/6818 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了两种CRISPR/Cas系统的新型核酸内切酶及其应用,具体地,本发明首次提供了两种结合宏基因组学与实验手段挖掘到的新型CRISPR/Cas12a系统家族新成员Gs12‑3、Gs12‑5,特别是新发现的Gs12‑3与已知Cas12a蛋白相比具有覆盖靶标位点范围更广的基因组编辑能力,还建立了基于CRISPR/Gs12‑3系统介导的核酸可视化检测技术。
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公开(公告)号:CN119040297A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411096626.7
申请日:2024-08-11
IPC: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种Ⅱ‑B型核酸内切酶介导的基因编辑系统及用途,具体地,本发明利用宏基因组学结合实验鉴定出一种属于Ⅱ‑B型Cas9家族的Gs9‑1核酸酶,其识别含有NGG的PAM序列,且引导RNA(sgRNA)需要特定的骨架序列。本发明还建立了基于Gs9‑1核酸酶介导的基因组靶向编辑技术,在对基因组序列进行精确修饰,诱导基因组中的插入、缺失或碱基替换的技术领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117844782B
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410251297.2
申请日:2024-03-06
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12Q1/6844 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的基因编辑核酸酶及其应用,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的CRISPR系统基因编辑核酸酶Gs12‑9(PAM=NYYN,Y=C/T),其优点在于比已知识别PAM为“TTTV”的LbCas12a靶标覆盖范围更广。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑9系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116676291B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202211017110.X
申请日:2022-08-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C07K19/00 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N1/21 , C12N5/10 , C12Q1/6876 , C12R1/19
Abstract: LtGs12‑1或AfGs12‑1蛋白介导的核酸裸眼可视本发明公开了CRISPR/Cas系统中核酸内切 化检测与基因组定向编辑技术,在基因组定点修酶Genie scissor及其介导的基因编辑系统。具 饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。体地,本发明提供了一种基于宏基因组学方法挖掘到的新型向导RNA依赖型核酸内切酶Genie scissor,特别是新发现来自氨基酸球菌科的(56)对比文件Julijia Dronina等.Towards applicationof CRISPR-Cas12a in the design of modernviral DNA detection tools 《.JNanobiotechenology》.2022,第20卷(第1期),第41篇.赵波等.CRISPR/Cas9系统在植物育种中的应用《.热带作物学报》.2018,(第01期),第202-212页.
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公开(公告)号:CN116179512A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310256014.9
申请日:2023-03-16
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的核酸内切酶及其应用,具体地,本发明提供了两种利用宏基因组学结合实验鉴定的核酸内切酶Gs12‑16(PAM=NYYV)和Gs12‑18(PAM=YTYV)(V=A/C/G) (Y=C/T),其优点在于与已知LbCas12a的PAM序列不同,使得它们具有更加广泛的靶标覆盖范围。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑16和Gs12‑18系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116144631A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202310086152.7
申请日:2023-01-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种高活性和耐热性高的核酸内切酶及其介导的基因编辑系统,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的温度适用范围广的核酸内切酶Gs12‑7,其优点在于蛋白温度耐受性高,识别含有BTYV的PAM序列,因而具有更大基因编辑空间且在基因组中高活性高特异切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑7系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术,在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119752847A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411932793.0
申请日:2024-12-26
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61K38/46 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种可编程TnpB核酸酶基因编辑中的应用,涉及基因编辑技术领域。该TnpB核酸酶为(A1)、(A2)和(A3)中的任一项:(A1)TnpB核酸酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;(A2)将所述TnpB核酸酶的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失和/或添加,得到的与所述TnpB核酸酶具有80%以上的同一性且与所述TnpB核酸酶具有相同生物学功能的蛋白;(A3)在(A1)或(A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白。本发明提供的TnpB核酸酶具有顺式和反式切割活性,在核酸检测和基因编辑领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119082085A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411345829.5
申请日:2024-09-25
IPC: C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种Gs12‑10核酸内切酶变体及其介导的基因编辑系统。具体地,将Gs12‑10核酸内切酶第156位氨基酸由Glu突变为Arg,该变体称为Gs12‑10MAX,并对crRNA长度进行了优化,对crRNA scaffold中支架环区序列进行了改造,由此显著提高CRISPR/Gs12‑10 MAX系统介导的基因组编辑效率,在基因组定点修饰领域具有广阔的应用前景。
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