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公开(公告)号:CN117844782B
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410251297.2
申请日:2024-03-06
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12Q1/6844 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的基因编辑核酸酶及其应用,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的CRISPR系统基因编辑核酸酶Gs12‑9(PAM=NYYN,Y=C/T),其优点在于比已知识别PAM为“TTTV”的LbCas12a靶标覆盖范围更广。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑9系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117844782A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410251297.2
申请日:2024-03-06
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12Q1/6844 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的基因编辑核酸酶及其应用,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的CRISPR系统基因编辑核酸酶Gs12‑9(PAM=NYYN,Y=C/T),其优点在于比已知识别PAM为“TTTV”的LbCas12a靶标覆盖范围更广。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑9系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116855588A
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202310817657.6
申请日:2023-07-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6888 , C12N15/113 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a和Cas13a介导的双重核酸荧光可视化检测方法及其应用,在同一反应体系中进行Cas12a和Cas13a酶切,采用荧光染料JOE修饰的ssDNA‑FQ报告基因和ROX修饰的ssRNA‑FQ报告基因,可在一次反应中通过观察“绿‑红‑黄”荧光信号转变实现同时检测两个核酸靶标,该方法检测灵敏性高、特异性强,利用该方法已开发了能够快速检测CD163基因敲除猪和乳铁蛋白LF基因敲入猪的特异检测试剂盒,因此该方法在分子检测领域具有较大的推广应用价值。
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公开(公告)号:CN116286737A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310006257.7
申请日:2023-01-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12Q1/6813
Abstract: 本发明公开了一种无PAM序列要求的CRISPR/Cas基因编辑系统。具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的无PAM限制核酸内切酶Gs12‑10,其优点在于可以在基因组中几乎任何位置切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑10系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术,在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117210437A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311113440.3
申请日:2023-08-29
Abstract: 本发明公开了两种新型向导RNA依赖型核酸内切酶Gs12‑2和Gs12‑14,通过实验鉴定发现,Gs12‑2的PAM识别序列为HVH(H=A/T/C,V=A/C/G),Gs12‑14的PAM识别序列为TTYV(Y=C/T,V=A/C/G),其优点在于,与已知LbCas12a相比,这两个核酸内切酶的靶标识别范围更广,能够高效特异切割基因组,并且还具有反式切割作用,即非特异性、单链DNase活性。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑2和Gs12‑14系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN116286737B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310006257.7
申请日:2023-01-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12Q1/6813
Abstract: 本发明公开了一种无PAM序列要求的CRISPR/Cas基因编辑系统。具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的无PAM限制核酸内切酶Gs12‑10,其优点在于可以在基因组中几乎任何位置切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑10系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术,在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117210437B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202311113440.3
申请日:2023-08-29
Abstract: 本发明公开了两种新型向导RNA依赖型核酸内切酶Gs12‑2和Gs12‑14,通过实验鉴定发现,Gs12‑2的PAM识别序列为HVH(H=A/T/C,V=A/C/G),Gs12‑14的PAM识别序列为TTYV(Y=C/T,V=A/C/G),其优点在于,与已知LbCas12a相比,这两个核酸内切酶的靶标识别范围更广,能够高效特异切割基因组,并且还具有反式切割作用,即非特异性、单链DNase活性。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑2和Gs12‑14系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域应用前景广阔。
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