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公开(公告)号：CN109563492B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN201680076047.3
申请日：2016-08-02
Applicant: 北京大学
Abstract: 提供一种人源的或其它动物的突变病毒及其制备方法，优选流感病毒。该方法包括使用反向遗传技术在病毒基因组的一个或多个基因的自身终止密码子上游引入密码子UAG。还提供了该突变病毒的应用，如作为减毒活疫苗、复制可控的安全病毒模型等的用途。
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公开(公告)号：CN115261344A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202211042820.8
申请日：2022-08-29
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及基于非天然氨基酸的离子液体、其制备方法及应用，具体提供了一种用于制备含非天然氨基酸蛋白的物质组合，包括：(1)一种或多种氨基酰‑tRNA合成酶，其能够结合突变的tRNA；(2)一种或多种突变的tRNA，所述突变的tRNA反密码子环上突变为终止密码子的互补序列；(3)多种基于非天然氨基酸的离子液体。所述物质组合可用于重组表达含非天然氨基酸目的蛋白。基于非天然氨基酸的离子液体能够提高基因密码子拓展系统对提前终止密码子(PTC)的通读效率、和/或插入非天然氨基酸效率。
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公开(公告)号：CN113755456B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202111050642.9
申请日：2021-09-08
Applicant: 北京大学
IPC: C12N7/01 , C12Q1/70 , G01N21/64 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/55 , C12N15/54 , C12N15/44 , A61K31/215 , A61K31/351 , A61K31/5383 , A61K31/496 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种复制缺陷型耐药流感病毒及其核酸节段重组率检测方法。根据耐药流感病毒株基因组序列，通过分子克隆技术获得12株耐药流感病毒株，评价其对抗流感药物的耐药率。本发明构建了7种耐药株复制缺陷型流感病毒株（DRRIV）；还构建了用于检测流感病毒各节段重组率的可视化标记流感病毒。筛选出效果最好的NA28TAG/H274Y。联合使用小分子NA抑制剂（NAIs）进一步增强了NA28TAG/H274Y对野生型流感病毒的中和效果。小鼠模型中表明NA28TAG/H274Y与奥司他韦对耐药流感病毒产生了联合增效作用。
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公开(公告)号：CN112725282A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110012018.3
申请日：2016-01-27
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及携带正交tRNA/氨酰tRNA合成酶稳定细胞系的构建方法。基于基因密码子扩展技术，利用一对正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶将非天然氨基酸定点引入蛋白质，本发明还涉及双慢病毒载体的构建方法，携带多拷贝数正交tRNA载体的构建方法以及借助双慢病毒稳定转导、质粒稳定转染将正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶基因稳定整合到细胞基因组的方法。本发明进一步涉及稳定细胞系的应用，如表达含有非天然氨基酸目的蛋白的用途。
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公开(公告)号：CN107177593B
公开(公告)日：2020-10-23
申请号：CN201610134657.6
申请日：2016-03-10
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , A61P35/00 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及利用基因密码扩展的非天然氨基酸系统，高效率通读单基因遗传病中致病基因的无义突变位点，恢复突变体蛋白的正常结构和功能。通过改造古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)，得到全新的高通读效率的UAA和UGA编码的非天然氨基酸系统，扩展了tRNAPyl和吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶(PylRS)正交对的使用范围。构建了模拟内源性提前终止密码子的质粒——在由内含子和外显子组成的Smad基因上引入提前终止密码子，可以用于评价通读内源性提前终止密码子的效率。发明中涉及无义突变的系统主要包括单基因遗传病的致病基因和肿瘤细胞内的肿瘤抑制基因。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107022568B
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN201610068626.5
申请日：2016-02-01
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明提供了在哺乳动物细胞中高效多点插入非天然氨基酸的系统，所述系统包括表达含有非天然氨基酸的蛋白质的表达载体，所述非天然氨基酸由密码子UAG编码以及含有古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)和吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶(PylRS)基因的载体，所述系统中还包括包含经突变的eRF1的细胞系。此外，还提供了利用该系统制备定点突变的蛋白的方法。
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公开(公告)号：CN110835633A
公开(公告)日：2020-02-25
申请号：CN201810914299.X
申请日：2018-08-13
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/85 , C12N7/01 , A61K35/76 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物制药领域，具体涉及PTC稳定细胞系制备方法及应用。基于基因密码子扩展/PTC扩展技术，利用正交的非天然氨基酸(UAA)和tRNA/氨酰tRNA合成酶通读提前终止密码子(PTC，UAG/UAA/UGA)，并在蛋白质中定点引入非天然氨基酸。本发明进一步涉及稳定细胞系的应用，如包装复制缺陷型(PTC)病毒疫苗。
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公开(公告)号：CN118389493B
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202410576786.5
申请日：2024-05-10
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/11 , A61K31/712 , A61P43/00 , A61P35/00
Abstract: 一种定点修饰的工程化tRNA及其应用，所述修饰是以一个或多个修饰的核苷酸替换tRNA分子上，选自第4、9、13、14、17、18、27、28、32、34、35、36、37、38、39、49、50、54、55、58、72位的一个或多个天然未修饰的核苷酸。本发明定点修饰的tRNA与未经修饰的tRNA相比，具有更高的结构稳定性和/或更强的抗核酸酶降解能力，并且氨酰化效率不显著降低、免疫原性不显著升高。所述修饰的tRNA可用于消除无义突变导致的翻译提前终止，在治疗无义突变相关的遗传疾病、肿瘤等方面具有巨大的应用潜力。工程化tRNA的修饰对tRNA成药也有借鉴意义，可指导天然tRNA的修饰设计。
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公开(公告)号：CN107012121B
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN201610055542.8
申请日：2016-01-27
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及携带正交tRNA/氨酰tRNA合成酶稳定细胞系的构建方法。基于基因密码子扩展技术，利用一对正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶将非天然氨基酸定点引入蛋白质，本发明还涉及双慢病毒载体的构建方法，携带多拷贝数正交tRNA载体的构建方法以及借助双慢病毒稳定转导、质粒稳定转染将正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶基因稳定整合到细胞基因组的方法。本发明进一步涉及稳定细胞系的应用，如表达含有非天然氨基酸目的蛋白的用途。
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公开(公告)号：CN107022568A
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201610068626.5
申请日：2016-02-01
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明提供了在哺乳动物细胞中高效多点插入非天然氨基酸的系统，所述系统包括表达含有非天然氨基酸的蛋白质的表达载体，所述非天然氨基酸由密码子UAG编码以及含有古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)和吡咯赖氨酰-tRNA合成酶(PylRS)基因的载体，所述系统中还包括包含经突变的eRF1的细胞系。此外，还提供了利用该系统制备定点突变的蛋白的方法。
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