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公开(公告)号：CN111057145A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201911157547.1
申请日：2019-11-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用。所述的纳米抗体命名为Nb12，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明将截短表达的Nsp2重组蛋白免疫骆驼后分离骆驼外周血淋巴细胞利用RT-PCR扩增经过免疫的双峰驼VHH基因，将其连入pCANTAB 5E噬菌体载体，构建双峰驼重链抗体可变区文库，利用噬菌体展示技术经过3轮淘选，共筛选到44株Nsp2特异性纳米抗体，试验证明这些纳米抗体能够与Nsp2蛋白特异性反应，其中Nb12有较强的结合力。抗病毒试验结果表明在接毒量为0.01个MOI时，纳米抗体Nb12在PAM细胞和Marc-145细胞上均显示出对病毒复制的抑制作用。因此，本发明的提出为后续PRRSV Nsp2的研究以及PRRSV的防控和诊断提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN103695465A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310682463.6
申请日：2013-12-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明提出了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株cDNA感染性克隆及其应用，公开了一种重组载体，其是通过反向遗传操作技术构建的我国猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株CH1R的感染性克隆，包含猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株CH-1R的全长基因cDNA序列。本发明还公开了一种人工克隆弱毒疫苗株，该疫苗株是猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株CH-1R的克隆毒株，在其结构蛋白基因序列中引入标记性的限制性内切酶位点。通过对感染性克隆的基因工程改造，可以研究出更好的疫苗，有利于猪繁殖与呼吸综合征的预防和控制。
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公开(公告)号：CN100368525C
公开(公告)日：2008-02-13
申请号：CN200510008763.1
申请日：2005-02-25
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪链球菌(Streptococcus suis)的一种新菌株，微生物保藏号是CGMCC No.1316，保藏日期是2005年2月21日；本发明菌株可作为科研工作者标准的试验用菌株；通过该菌株可以了解该菌的DNA分型、该菌对药物的耐药机制、该菌多重耐药机制及该菌在猪体内的病理复制模型。
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公开(公告)号：CN106520807B
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201611169628.X
申请日：2016-12-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因及其重组蛋白的制备方法。本发明的经改造后的胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白制备及活性检测的方法，具体涉及胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达、重组蛋白的制备和发酵培养条件，以及活性检测方法等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白在毕赤酵母中高效稳定分泌表达，表达的重组融合蛋白具有高水平的抗病毒活性和调节免疫细胞活性，为提供具有治疗猪病毒性疾病及免疫调节功能的绿色无残留生物制品奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104962524A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510333160.2
申请日：2015-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一株分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C1、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用。所述杂交瘤细胞株2C1保藏编号为CGMCC No.10878。间接免疫荧光结果表明：2C1杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异性识别CAV-2病毒而与MDCK细胞不反应。本发明制备的2C1和另一杂交瘤细胞株7D7分泌的两个单克隆抗体的叠加实验结果表明：这两个单克隆抗体为针对CAV-2病毒不同抗原表位的单抗。本发明所制备的单克隆抗体能很好的和CAV-2反应，可用于临床分离毒株的鉴定。本发明所制备的2C1单克隆抗体和7D7单克隆抗体是识别CAV-2的两个不同抗原决定簇的单抗，因此说明本发明的单克隆抗体能用于检测CAV-2病原胶体金的制备和夹心ELISA方法的建立。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100523177C
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200710001253.0
申请日：2007-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome virus)弱毒疫苗株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.1883。本发明弱毒疫苗株遗传变异稳定，安全性好，对妊娠母猪、仔猪等各年龄猪只均安全，无致病力。用本发明弱毒疫苗株免疫仔猪后，所免疫仔猪均能抵抗猪繁殖与呼吸综合症病毒强毒的攻击。
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公开(公告)号：CN101220348A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200710001253.0
申请日：2007-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome virus)弱毒疫苗株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.1883。本发明弱毒疫苗株遗传变异稳定，安全性好，对妊娠母猪、仔猪等各年龄猪只均安全，无致病力。用本发明弱毒疫苗株免疫仔猪后，所免疫仔猪均能抵抗猪繁殖与呼吸综合症病毒强毒的攻击。
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公开(公告)号：CN109517797A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811201822.0
申请日：2018-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种表达猪繁殖障碍与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)受体CD163的猪永生化的肺泡巨噬细胞细胞系，所述的细胞系命名为PAM-Tang-20，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.13591。实验证明，本发明建立的细胞系能够高表达CD163受体，是PRRSV的易感细胞，可以广泛应用于PRRSV的增殖、PRRSV临床毒株的分离、疫苗生产以及PRRSV相关基础研究等。本发明的提出为猪繁殖障碍与呼吸综合症病毒的体外培养提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN104762244B
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201510058245.4
申请日：2015-02-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌SBP_bac_5基因缺失株及其构建方法与应用。所述缺失株为不含抗性标记的SS△SBP_bac_5，保藏编号为：CGMCC No.10076。本发明是采用RecA同源重组系统，利用温敏自杀质粒pSET4s作为载体对猪链球菌7型菌株SBP_bac_5编码的基因进行敲除而得到的菌株，破坏了SBP_bac_5蛋白的表达。本发明得到的S.suis 7型SS△SBP_bac_5株比亲本株的毒力弱，对动物安全。用重组菌制成疫苗，免疫CD1小鼠，实验结果表明：该猪链球菌重组菌疫苗能有效诱导机体产生特异性的体液免疫应答，使免疫小鼠获得抗S.suis攻击的保护，并可有效阻止细菌在体内的增值。本发明得到的工程菌为猪链球菌疫苗的研制提供了重要依据。
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公开(公告)号：CN104762244A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510058245.4
申请日：2015-02-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌SBP_bac_5基因缺失株及其构建方法与应用。所述缺失株为不含抗性标记的SS△SBP_bac_5，保藏编号为：CGMCC No.10076。本发明是采用RecA同源重组系统，利用温敏自杀质粒pSET4s作为载体对猪链球菌7型菌株SBP_bac_5编码的基因进行敲除而得到的菌株，破坏了SBP_bac_5蛋白的表达。本发明得到的S.suis 7型SS△SBP_bac_5株比亲本株的毒力弱，对动物安全。用重组菌制成疫苗，免疫CD1小鼠，实验结果表明：该猪链球菌重组菌疫苗能有效诱导机体产生特异性的体液免疫应答，使免疫小鼠获得抗S.suis攻击的保护，并可有效阻止细菌在体内的增值。本发明得到的工程菌为猪链球菌疫苗的研制提供了重要依据。
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