吩嗪-1-羧酸系列衍生物及其制备方法

    公开(公告)号:CN101973946A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010509746.7

    申请日:2010-10-15

    Abstract: 一种生物技术领域的吩嗪-1-羧酸系列衍生物及其制备方法。衍生物:通过在吩嗪-1-羧酸1位羧基上引入包括亲水基团、疏水基团、线性结构基团和环状结构基团、芳香结构基团的化学基团。制备方法:将从假单胞菌中分离出的吩嗪-1-羧酸在氯化亚砜溶液中回流和蒸馏,得到活化中间体;把活化中间体溶于二氯甲烷,冰浴下加入氨基化合物和三乙胺;然后,室温反应过夜,使用薄层层析法跟踪反应;用旋蒸、萃取、干燥和纯化,得到目标化合物。用途:用做抗瓜果蔬菜和农作物病虫害农药制剂的活性成份;用做抗水稻纹枯病的农药制剂的活性成份。本发明利用平板法进行抗真菌活性测试,获得了具有更好活性的化合物。

    利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法

    公开(公告)号:CN1802927A

    公开(公告)日:2006-07-19

    申请号:CN200610023459.9

    申请日:2006-01-19

    Inventor: 许煜泉

    Abstract: 本发明涉及一种利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法,在优化的培养基和培养条件下,利用促生拮抗菌M18的衍生菌株M18G和M18R,分别生产出高含量吩嗪-1-羧酸和藤黄绿菌素的发酵液,再分别将M18G发酵液和M18R发酵液制备成干粉,并以M18G干粉中的吩嗪-1-羧酸和M18R干粉中的藤黄绿菌素的重量百分比为90%~10%和10%~90%进行物理复配,制备成高效防治植物病害的微生物源杀菌剂。与现有技术相比,本发明提供的杀菌剂是以微生物代谢产物为活性成分的可湿性粉剂而非活菌制剂,因而具有高稳定性,其药效不易受环境条件的影响,同时在低剂量使用的前提下,对植物的多种病害具有更高的防治效果。

    利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法

    公开(公告)号:CN100411521C

    公开(公告)日:2008-08-20

    申请号:CN200610023459.9

    申请日:2006-01-19

    Inventor: 许煜泉

    Abstract: 本发明涉及一种利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法,在优化的培养基和培养条件下,利用促生拮抗菌M18的衍生菌株M18G和M18R,分别生产出高含量吩嗪-1-羧酸和藤黄绿菌素的发酵液,再分别将M18G发酵液和M18R发酵液制备成干粉,并以M18G干粉中的吩嗪-1-羧酸和M18R干粉中的藤黄绿菌素的重量百分比为90%~10%和10%~90%进行物理复配,制备成高效防治植物病害的微生物源杀菌剂。与现有技术相比,本发明提供的杀菌剂是以微生物代谢产物为活性成分的可湿性粉剂而非活菌制剂,因而具有高稳定性,其药效不易受环境条件的影响,同时在低剂量使用的前提下,对植物的多种病害具有更高的防治效果。

    吩嗪-1-羧酸生产菌培养基及吩嗪-1-羧酸制备方法

    公开(公告)号:CN1369566A

    公开(公告)日:2002-09-18

    申请号:CN02110818.8

    申请日:2002-02-08

    Inventor: 许煜泉 冯镇泰

    Abstract: 吩嗪-1-羧酸生产菌培养基及吩嗪-1-羧酸制备方法属于生物农药领域。本发明培养基配方重量百分比:葡萄糖1.8-2.2%、蛋白胨1.5-2.5%、硝酸钾0.5-1.5%、硫酸镁0.05-0.35%、余量为水及其他成分,pH5.5-7.5。吩嗪-1-羧酸制备方法为:1.培养程序:将斜面菌种接种于150毫升三角瓶中,于26-30℃下震荡培养过夜,按3-8%的接种量转接于500毫升三角瓶中,继续置于26-30℃下震荡培养,以发酵生产吩嗪-1-羧酸;2.提取和粗制备:经40-80小时培养后,菌悬液经离心机4000rpm,20min离心,取上清液,经氯仿提取,取有机相,经旋转蒸发仪蒸去氯仿,提取物溶于苯中;3.纯化:硅胶柱层析,收集纯度为99%以上的纯品。

    利用工程菌株M18G携带质粒pME6032Phz生产吩嗪-1-羧酸的方法

    公开(公告)号:CN101705265A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910198664.2

    申请日:2009-11-12

    Inventor: 许煜泉 周泉

    Abstract: 本发明涉及一种利用工程菌株M18G携带质粒pME6032Phz生产吩嗪-1-羧酸的方法,从促生拮抗菌M18基因组中扩增出吩嗪-1-羧酸生物合成的编码基因片段phzA1-G1,并将该基因片段插入表达质粒pME6032中,置于强启动子Ptac的控制下,构建成重组质粒pME6032Phz;然后将该重组质粒导入促生拮抗菌M18的衍生菌株M18G中,构建成基因工程菌株M18G/pME6032Phz。该工程菌株在扩增吩嗪-1-羧酸生物合成编码基因的拷贝数的同时,实现编码基因的高效稳定表达。最后将基因工程菌株M18G/pME6032Phz在黄豆粉培养液中培养,高效稳定地生产吩嗪-1-羧酸,大幅提高吩嗪-1-羧酸的产量。利用本发明的高产基因工程菌株制备吩嗪-1-羧酸,其生产成本能达到应用于防治水稻纹枯病的农本要求,可用于杀菌剂申嗪霉素的制备,大规模地防治植物病害。

    直接的mRNA富集定量方法
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101392295A

    公开(公告)日:2009-03-25

    申请号:CN200810202302.1

    申请日:2008-11-06

    Abstract: 本发明公开一种生物工程技术领域的直接的mRNA富集定量方法,不需要进行RNA抽提,在待检测的菌体或组织破碎后,利用特异性的核酸探针液相杂交保护特异性的mRNA部分片段后,用S1和RNAse酶切除去单链DNA,未保护的RNA,过量的探针和错配的杂交体,完全配对的mRNA片段经生物素-链亲和素交互作用被磁珠富集后,用双链结合染料直接线性放大定量。本发明不需要进行RNA抽提,快速简便,易于自动化,特异性强,在常规的实验条件下即可完成对RNA的定量检测。

    藤黄绿菌素的发酵培养方法

    公开(公告)号:CN1932019A

    公开(公告)日:2007-03-21

    申请号:CN200610116311.X

    申请日:2006-09-21

    Abstract: 本发明涉及一种藤黄绿菌素的发酵培养方法,采用能分泌藤黄绿菌素的假单胞菌菌种,在甘油培养基上连续传代5~6次,获得的发酵用假单胞菌菌株再接种到甘油培养液中生长及放大生产,在28-32℃、pH6.8-7.5,搅拌发酵或振荡培养36-72小时,得到的发酵液中藤黄绿菌素产量达到700-950mg/L。利用本发明获得的藤黄绿菌素发酵液可配制不同浓度的杀菌剂,用于防治蔬菜疫病、棉花枯萎病、甜菜枯萎病、香蕉蔓枯病以及各种腐霉和疫霉引起的植物病害。

    利用工程菌株M18G携带质粒pME6032Phz生产吩嗪-1-羧酸的方法

    公开(公告)号:CN101705265B

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN200910198664.2

    申请日:2009-11-12

    Inventor: 许煜泉 周泉

    Abstract: 本发明涉及一种利用工程菌株M18G携带质粒pME6032Phz生产吩嗪-1-羧酸的方法,从促生拮抗菌M18基因组中扩增出吩嗪-1-羧酸生物合成的编码基因片段phzA1-G1,并将该基因片段插入表达质粒pME6032中,置于强启动子Ptac的控制下,构建成重组质粒pME6032Phz;然后将该重组质粒导入促生拮抗菌M18的衍生菌株M18G中,构建成基因工程菌株M18G/pME6032Phz。该工程菌株在扩增吩嗪-1-羧酸生物合成编码基因的拷贝数的同时,实现编码基因的高效稳定表达。最后将基因工程菌株M18G/pME6032Phz在黄豆粉培养液中培养,高效稳定地生产吩嗪-1-羧酸,大幅提高吩嗪-1-羧酸的产量。利用本发明的高产基因工程菌株制备吩嗪-1-羧酸,其生产成本能达到应用于防治水稻纹枯病的农本要求,可用于杀菌剂申嗪霉素的制备,大规模地防治植物病害。

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