一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法

    公开(公告)号:CN106544312B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201610980083.4

    申请日:2016-11-08

    Abstract: 本发明公开了一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法,属于生物技术领域。本发明根据GeneBank中人胃乙醇脱氢酶δδ‑ADH的基因序列合成目的基因,将其与表达载体pET‑32a(+)连接并转化E.coli BL21(DE3)。E.coli BL21(DE3)经异丙基硫化‑β‑D‑半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,目的蛋白以包涵体形式存在。收集并破碎菌体后离心,取沉淀获得包涵体,用低浓度尿素溶液或其缓冲液溶解包涵体获得有活性的δδ‑ADH粗酶液。经HisTrapTM excel亲和层析柱纯化获得目的蛋白,活性在2.085U/mg以上。本发明提供的工程菌所产生的δδ‑ADH可氧化高浓度的乙醇,其在大肠杆菌中以包涵体形式存在;有活性的δδ‑ADH粗酶液只需经包涵体溶解液溶解即可获得,不需要复性操作,可节约成本、简化操作步骤,提高效率。

    富硒营养强化剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN110150660A

    公开(公告)日:2019-08-23

    申请号:CN201711415288.9

    申请日:2017-12-25

    Abstract: 本发明涉及一种富硒营养强化剂的制备方法,步骤如下:一、提取天然有机硒母料,包括将天然原料清洗、再经粉碎、超微研磨、酶解、酶灭活、离心分离、纳滤、浓缩干燥等一系列工序制得天然有机硒提取物。二、复配:将天然有机硒提取物与抗氧化剂、维生素、氨基糖苷抗生素、蛋白质粉、矿物质按质量比(1.2-1.5):(0.8-1.2):(0.2-0.5):(0.2-0.5):(0.6-1.2)混合均匀混合均匀,用100-120目筛子过筛,得到得到复配后的富硒营养强化剂。本发明制备的富铬食品抗氧化剂安全无毒、稳定性高,具有抗氧化、预防胆固醇、心脑血管等多种疾病的功效。

    复合抗氧化功能食品添加剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN110150633A

    公开(公告)日:2019-08-23

    申请号:CN201711415141.X

    申请日:2017-12-25

    Abstract: 本发明涉及一种复合抗氧化功能食品添加剂及其制备方法,由下列重量份的原料加工而成:牡蛎提取物20~30份,葡萄籽提取物10-20份,番茄提取物5-10份,枸杞提取物5-10份,辅酶1-5份,矿物质1-5份,维生素1-5份;牡蛎提取物的制备的制备方法步骤如下:步骤如下:S1:预处理:取一定质量的洗净后的牡蛎肉,加入牡蛎肉质量2-4倍的预处理液,于30-35℃浸润处理0.5-1h;所述浸润处理液由下列重量百分比的组分组成:水溶性葡聚糖1-3%,氧化型谷胱甘肽2-3%,蜂胶1-2%,余量为去离子水;S2:均质;S3:复合蛋白酶酶解;S4:灭酶及脱腥处理:喷雾干燥获得牡蛎酶解粉干粉;S5:筛分。该方法操作简便,成本低,营养价值高,稳定性好,保质期大大延长。

    一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶生产菌株及其应用

    公开(公告)号:CN105802897B

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201610363798.5

    申请日:2016-05-26

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 韩唱

    Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶生产菌株及其应用,属于生物工程和酶工程技术领域。本发明的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶生产菌为一株Clostridium sp,是从森林附近土壤中经菌株富集、平板菌落特征初筛,采用摇瓶复筛,测定酶活力,经酶活测定,比较D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶活性大小而得到。该菌生产的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶可以D‑果糖为底物催化生产D‑阿洛酮糖,温度范围广、没有副产物生成、反应方法简便、低能耗、物料成本低等优点,加入Co2+后60℃半衰期长达9h,有较强的耐热优势,而且在高温60℃条件下以果葡糖浆为底物进行反应转化率最高可达33.8%。该菌可用于化妆品、食品、药品等领域。

    富铬营养强化剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN108201136A

    公开(公告)日:2018-06-26

    申请号:CN201711415130.1

    申请日:2017-12-25

    Abstract: 本发明涉及一种富铬营养强化剂的制备方法,步骤如下(一)、提取天然有机铬母料,包括将天然原料清洗、再经粉碎、超微研磨、酶解、酶灭活、离心分离、纳滤、浓缩干燥等一系列工序制得天然有机铬提取物。(二)、复配:将天然有机硒提取物与抗氧化剂、维生素、蛋白质粉、矿物质按质量比(1.2‑1.5):(0.8‑1.2):(0.2‑0.5):(0.2‑0.5):(0.6‑1.2)比例混合均匀,用100‑120目筛子过筛,得到得到复配后的富铬抗氧化剂。本发明制备的富铬营养强化剂安全无毒、稳定性高,具有抗氧化、预防胆固醇、心脑血管等多种疾病的功效。

    一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法

    公开(公告)号:CN105671070A

    公开(公告)日:2016-06-15

    申请号:CN201610122595.7

    申请日:2016-03-03

    Inventor: 吴敬 段绪果 张康

    CPC classification number: C12N15/75 C07K14/32 C12N2800/80 C12N2999/007

    Abstract: 本发明公开了一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法,属于基因工程技术领域。本发明构建敲除质粒PHY300dsrf,该质粒包含特异性靶向目的基因的sgRNA、cas9基因、同源修复臂、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的复制原点及抗性筛选标记。本发明所设计的特异性靶向srfA-C基因的sgRNA,可以指引cas9蛋白在srfA-C基因的特异性位点切割双链,然后再同源修复臂的指导下对基因组进行精确地同源性重组,在断裂处引入XhoI酶切位点。在对srfA-C基因敲除成功的枯草芽孢杆菌进行上罐发酵培养,泡沫显著减少,证明该CRISPR/Cas9基因编辑系统可以有效的对枯草芽孢杆菌基因组进行基因编辑。

    一种富含黄酮的百合啤酒及其制备方法

    公开(公告)号:CN107881047B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201711367853.9

    申请日:2017-12-18

    Abstract: 本发明公开了一种富含黄酮的百合啤酒及其制备方法,属于啤酒生产技术领域。本发明的百合精酿啤酒以大麦麦芽、啤酒花、百合主要原料,经发酵而得。本发明的发酵工艺制备获得的富含黄酮的精酿啤酒口味纯正、微苦、香味浓郁、泡沫洁白、细腻,杀口力强,尤其是使用上面发酵酵母进行发酵而生产,气味芬芳,酯香味浓郁。本发明方法制备得到的13°P百合精酿啤酒中总黄酮含量达117mg/L,具有一定的食疗保健功效。

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