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公开(公告)号：CN105755029A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610218976.5
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/67 , C12N2800/101 , C12P21/00
Abstract: 本发明公开了一种基于dacA提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至51.77％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN105647815A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201510942917.8
申请日：2015-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高米曲霉曲酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。具体地，通过改变培养基关键组分的浓度与接种条件控制米曲霉的菌落形态为球形(菌体处于最佳产酸形态)，进而提高曲酸产量。当菌体形态为菌球时，米曲霉(A.oryzae)的产酸能力比菌丝时明显提高，曲酸产量可达15.11g/L。同时，菌球直径范围为0.25～0.35mm时，单位细胞曲酸积累量最高为0.778g/g。本发明优化了种子培养基中葡萄糖、酵母提取物浓度和孢子浓度，控制菌球大小，从而提高了米曲霉单位细胞曲酸产量，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105062908A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510498085.5
申请日：2015-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产木糖醇的热带假丝酵母基因工程菌及其应用，属于食品甜味剂生物制造技术领域。本发明通过删除木糖醇脱氢酶基因，从根本上阻止木糖醇脱氢酶基因的表达，阻断木糖醇的代谢途径，从而达到木糖醇的累积，显著提升了木糖醇的转化率。本发明所提供的热带假丝酵母工程菌，在以含有木糖、葡萄糖或甘油或阿拉伯糖等混合碳源的发酵培养基中能够将木糖高效转化为木糖醇，转化率达到95％以上。
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公开(公告)号：CN104774818A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510179652.0
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FTS-8及其基因和应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉Aspergillus niger的果糖基转移酶FTS-8，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因fts-8。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)较宽的pH稳定范围：在pH4.0-8.0条件下稳定；2)具有高催化效率：Km、kcat分别为145.3g/L和3.8×103min-13)具有高低聚果糖转化率，其浓度为60％(w/w)。
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公开(公告)号：CN104371994A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410550898.X
申请日：2014-10-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种新型结合诱变与高通量筛选高产重组酶菌株的方法，属于基因工程、酶学及发酵技术领域。采用ARTP诱变技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600宿主进行诱变，利用筛选平板初筛、96孔板高通量复筛、摇瓶发酵筛选验证的方式获得一株高产重组酶的突变株。以碱性淀粉酶为筛选模式酶，高通量筛选出产酶酶活力较高的突变株B.subtilis WB600-mutl2，发酵得酶活力为186.4U/mL，为出发株酶活的130.3％。过氧化氢酶在B.subtilis WB600-mut12中异源表达后，酶活力提高至出发宿主酶活的135.0％。该发明具有重要的实用与经济价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119985996A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510020106.6
申请日：2025-01-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种人乳铁蛋白间接竞争酶联免疫检测试剂盒及其应用。本发明的试剂盒包括：酶标板、抗人乳铁蛋白抗体、酶标二抗、封闭液、显色剂和终止液。本发明通过将Western‑Blot中的硝酸纤维素膜换成具有非特异性吸附蛋白的酶标板，随着样本，抗人乳铁蛋白抗体和酶标二抗的加入，形成乳铁蛋白‑一抗‑二抗复合物。加入显色剂进行显色反应，样本吸光度值与其所含乳铁蛋白的含量成正相关。通过吸光度值大小计算样品中人乳铁蛋白的含量。本发明提供的发酵液中人乳铁蛋白检测方法具有真实、经济、高效等优点。
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公开(公告)号：CN117802056B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202311770042.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用，属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1，通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变，以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞，分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体，筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株，产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L，并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。
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公开(公告)号：CN118995458A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411189749.5
申请日：2024-08-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成蛇麻烯的热带假丝酵母工程菌株及应用，属于代谢工程领域。本发明将蛇麻烯合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，将从IPP和DMAPP到蛇麻烯合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，将从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。应用本发明的方法构建的重组菌株的蛇麻烯产量显著提高，经过4天摇瓶发酵后蛇麻烯产量可达607.8mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成蛇麻烯，并且生产性能稳定，具有一定的应用前景。
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公开(公告)号：CN118240859A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410298243.1
申请日：2024-03-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产角鲨烯的热带假丝酵母工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域。本发明以热带假丝酵母DC03为出发菌株，将来源于酿酒酵母的角鲨烯合成酶基因通过CRISPR‑Cas9技术整合至热带假丝酵母菌株DC03的基因组上。通过代谢工程改造，整合表达了异源角鲨烯合酶基因ScERG9，并在过表达基因ScERG9后，将其与法尼基焦磷酸合酶基因ERG20进行融合表达，并敲除DPP1基因、弱化BTS1基因、下调ERG1基因表达等组合策略后，经发酵体积优化，重组热带假丝酵母的角鲨烯产量达到了202.5mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号：CN117802061A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202211207521.5
申请日：2022-09-30
Applicant: 新加坡国立大学 , 苏州工业园区新国大研究院 , 江南大学
Abstract: 本申请涉及酶工程技术领域，尤其涉及一种胺脱氢酶突变体及其应用。本申请通过对原始酶TM_pheDH进行饱和突变，筛选获得具有高酶活力的胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，通过对该胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M纯化分析，酶比活力和催化效率常数kcat值分别提高至原始酶TM_pheDH的1.12倍和1.16倍，而且热稳定性好，同时利用该胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M催化酮基底物如苄基丙酮、对溴苯乙酮、间氯苯乙酮等进行不对称还原胺化反应，不仅转化率高，而且产物立体选择性好，因此在α‑手性胺生产领域中具有很好的应用前景。
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