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公开(公告)号：CN107422128A
公开(公告)日：2017-12-01
申请号：CN201710229608.5
申请日：2017-04-10
Applicant: 安徽农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/561
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/561
Abstract: 本发明属于蛋白检测领域，具体涉及一种卵母细胞中蛋白的检测方法，包括如下步骤：S1，蛋白样的提取；S2，SDS-PAGE凝胶电泳流程；S3，转膜；S4，封闭；S5，孵育一抗；S6，孵育二抗；S7，显影。所述蛋白样的提取过程中添加玻璃珠用于充分提取蛋白的方法以及显影过程中自封袋的巧妙运用。相比以往的技术方法，本方法在卵母细胞样的处理方式和显影环节的优化方面实施了创造性的发明和改进，因此显著提高了蛋白检测的效率。本方法通过少量试验材料就能检测低丰度蛋白的方案，检测内参蛋白只需要1个卵母细胞就能测出条带，对于表达丰度较低的蛋白质需要40个左右就能出较清晰的条带，相比现有技术需要不低于200个卵母细胞，效率显著提高。
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公开(公告)号：CN103923832B
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201410119555.8
申请日：2014-03-27
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞拆分装置和细胞拆分方法。细胞拆分装置包括带内芯的离心管和细胞培养板；离心管内腔设有内芯，内芯设有带凸起的沿口部和封闭的尖形底部；培养板为与离心管内径相适配的圆形平板，圆形平板的正面边缘处设有撑脚，培养板正面朝下倒扣在内芯上方且撑脚抵在内芯的沿口部。细胞拆分方法包括细胞培养、细胞拆分、细胞核收集、细胞质收集。本发明通过设计适于拆分贴壁生长的细胞的细胞离心拆分装置，在常规离心速度11000～12000r/min的情况下，离心拆分细胞的效率达到90～95%。该细胞离心拆分装置的结构简单，离心拆分细胞方法方便高效且容易实现。
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公开(公告)号：CN104073466A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410000495.8
申请日：2014-01-02
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12Q1/68 , C12Q1/04 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法，将小鼠脂肪干细胞在体外连续传代，然后包括形态学的变化、增殖速度的激增、异常染色体的出现和比例的增加、DNA含量的降低以及表面分子的变化五个步骤。其中形态学和增殖速度的观察与检测可用于初步的判断小鼠脂肪干细胞是否发生了转化；染色体的核型分析从局部水平上来分析小鼠脂肪干细胞染色体是否异常，而DNA含量的分析则从整体水平上来检测核物质的量变，此二法最能说明小鼠脂肪干细胞的转化与否；小鼠脂肪转化后，同时也引起小鼠脂肪干细胞典型分子的表达异常，包括CD44，CD105和Sca-1的变化，反而言之，后期研究中，也可以通过监测这些表面分子的变化来判断小鼠脂肪干细胞的转化，此法则更为简单、直接与有效。
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公开(公告)号：CN103898048A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410120868.5
申请日：2014-03-27
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵的体外成熟培养方法，包括以下步骤：（1）裸卵的体外成熟培养；（2）成熟裸卵的孤雌激活；（3）成熟裸卵的体外受精。本发明能够创造一个人工模拟卵母细胞自然发生成熟的环境，使裸卵在体外能够高效成熟发育，并且裸卵体外培养成熟后具备同正常发育的卵母细胞一样能够体外受精和胚胎发育。实践证实，该体系裸卵体外成熟发育效率高，体系成熟稳定，裸卵体外自然受精后胚胎发育质量高，因此，本发明能够极大地促进裸卵在人类生殖健康和现代家畜遗传育种中的应用和推广。简化了通过裸卵获得囊胚的操作，为裸卵作为卵源投入到实际生产提供了便利。
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公开(公告)号：CN102719361B
公开(公告)日：2013-12-18
申请号：CN201210203962.8
申请日：2012-06-20
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种组织培养器皿与组织培养方法。组织培养器皿包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，培养皿包括盖子，内腔中还包括至少一个碗状容器，碗状容器包括半球形的碗底与开口，开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；碗状容器底部与培养皿底壁连接。组织培养方法包括如下步骤：（1）用亲水性明胶包被碗状容器；（2）添加培养液；（3）切割和加入组织块；（4）倒置培养皿后放入培养箱。本发明通过在普通培养皿的内腔设置碗状容器，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，其使用方便、成本较低、效果较好，特别适宜体积较小和密度较大的组织块的培养。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103074294A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310022684.0
申请日：2013-01-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种可提高猪胚胎体外发育效率的猪胚胎培养液，其以PZM-3培养液为基础培养液，并在PZM-3培养液中添加有肌醇。其中，猪胚胎培养液中肌醇的浓度为0.005g/L～0.020g/L；猪胚胎培养液中肌醇的优选浓度为0.010g/L。本发明通过在PZM-3培养液中添加合适浓度的肌醇，能够使孤雌胚或者核移植胚胎激活的过程中，帮助内源性钙离子反复振荡，模拟了自然受精胚胎时的激活状态。PZM-3培养液中添加了肌醇后的胚胎发育状况优于没有添加前的胚胎，这对于猪胚胎的体外生产和培养，建立良好的动物模型等有重要的意义。
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公开(公告)号：CN103060381A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310022662.4
申请日：2013-01-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种生产转基因克隆猪的激活方法，采用电激活与化学激活的联合激活，在采用电激活前，先用放线菌酮激活处理3min～25min。作为优选，放线菌酮激活的处理时间为10～20min；进一步优选，放线菌酮激活的处理时间为10min；放线菌酮激活处理的浓度为5～10μg/mL。本发明通过改变通常联合激活方式的顺序，采用先化学激活后电激活的方案，并缩短激活方案中化学辅助激活的时间，可以得到与原来先电激活后化学激活并较长时间的组合激活方案相似的胚胎发育能力，以及较低的囊胚凋亡率和囊胚阶段的DNA甲基化水平，将该方案生产的胚胎移植后成功生产转基因克隆猪。
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公开(公告)号：CN102100585B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110064000.4
申请日：2011-03-17
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A61D19/04
Abstract: 本发明公开了一种适于羊的子宫角冲胚针，用于羊子宫角胚胎的回收，包括针管、连接管和尾管，针管为中空管，前部为斜面针尖，针管中部开有一条形孔；尾管前部是细管，后部是喇叭形开口；连接管为长条形的柔性中空管，连接管的一端与针管后部连接；连接管的另一端与尾管的前部连接；还包括过滤器，过滤器与尾管连接。本发明的冲胚针针管的外径较小，对供体羊子宫角内膜的损伤小，针管上条形孔的出液量大，胚胎回收顺畅。
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公开(公告)号：CN102433299B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110366128.6
申请日：2011-11-17
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了一种小鼠脂肪干细胞的分离、培养及纯化方法。其步骤包括细胞分离、培养和纯化三个阶段，特别是在分离过程不中断营养的供给，改进了三次换液时间和洗涤方法，以及使用差速消化法提高细胞纯度。本发明能够从小鼠的脂肪组织中分离出高活性、高纯度的脂肪干细胞，为后期对脂肪干细胞进一步的研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102824475A
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201110164339.1
申请日：2011-06-17
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 曹鸿国 , 章孝荣 , 张鲁 , 金海 , 鲍恒 , 杨盼 , 蒲勇 , 张运海 , 刘亚 , 陶勇 , 方富贵 , 李运生 , 任春环 , 张子军 , 丁建平 , 刘洪瑜 , 刘旭光 , 王力生
Abstract: 本发明公开了一种小鼠抑脂控重方法，采用具有降脂功效的中草药制备的注射液，以注射给药方式对小鼠的腹腔进行注射。本发明通过对小鼠腹腔注射的给药方式将具有降脂减肥功效的茶叶或荷叶汁液注射到小鼠体内，达到了明显的减肥降脂效果。该方法具有安全高效的特点，这对于瘦肉型家畜和家禽、野生经济动物、伴侣宠物的抑重减肥甚至人类降脂减肥都具有一定的启示意义和借鉴作用。
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