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公开(公告)号：CN102358891A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110286503.6
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了牛体细胞病毒诱导方法。本发明通过慢病毒多次感染牛成纤维细胞后能够简单、高效、快速地引起细胞发生诱变，诱变的细胞在形态和生长性能等方面呈现特征性变化，表现出一定的干细胞特征，诱变形成的细胞改变原有的纤维状形态而呈现细胞集落团，细胞集落生长迅速、形态稳定，常规的冻存和传代对细胞生长性能无明显影响。牛体细胞病毒诱导方法诞生的诱变细胞将会作为一种新型的细胞材料在牛的转基因克隆、新品种培育、育种改良及细胞基因表达调控等方面发挥重要的作用，同时，也为人类及其他物种的细胞提供借鉴和参考。
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公开(公告)号：CN102172331A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110029889.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 随刘才 , 张运海 , 李运生 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 陶勇 , 殷宗俊 , 章美玲 , 张远亮 , 焦明慧 , 季索菲 , 贾晴 , 张宇 , 桂涛 , 秦晓炜 , 周娜汝 , 刘晓蕊 , 王维 , 杨盼 , 张子军 , 丁建平
IPC: A61B17/435
Abstract: 本发明公开了一种应用于胚胎移植过程的胚胎运输方法及运输装置，使用保温容器为运载工具，容器内存有温水，在温水中放置轻质浮漂，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中用于胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
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公开(公告)号：CN103074296B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310020667.3
申请日：2013-01-21
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/ml？EGF+1.5U/ml？hCG+1mM/ml？Glu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uM？Forskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力，从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料，也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。
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公开(公告)号：CN102277402B
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201110204137.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12P21/02 , C07K14/435 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体，介导重组核蛋白在细胞核内表达，待重组核蛋白在细胞内表达稳定后，使用操作液处理细胞，收集细胞，超声波破碎，离心去沉淀后收集细胞上清液，上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中，4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变，结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。
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公开(公告)号：CN103115812A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310022665.8
申请日：2013-01-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: G01N1/31 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了胚胎免疫荧光染色操作皿及其制备方法。胚胎免疫荧光染色操作皿包括操作皿和以琼脂糖凝胶制成的底衬；底衬贴附在操作皿的内腔底面，底衬上表面设有凹坑。其中，凹坑为半圆形。制备方法是（1）将设有半圆形凸起的模具固定在培养皿的上盖内腔的顶面；（2）用琼脂糖粉末与水或DPBS/PBS溶液制成琼脂糖凝胶；（3）将琼脂糖凝胶倒入培养皿，使模具上的半圆形凸起与琼脂糖凝胶的液面接触；（4）待琼脂糖凝胶凝固后取下模具，即可使用；也可盖上盖子封好后4℃保存待用。本发明在组织培养皿中设置以琼脂糖凝胶制成底衬，使得胚胎免疫荧光染色操作直接在底衬上完成，避免了操作中胚胎与组织培养皿板壁发生直接接触而产生的粘连、变形、移位和窜孔等问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102268404A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110204169.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 本发明公开了一种猪卵丘干细胞的分离方法。其方法是抽取青年母猪卵丘卵母细胞复合物，卵母细胞体外成熟培养后，消化脱离卵丘细胞，收集消化的卵丘细胞进行培养，待有细胞集落出现并形成较大的细胞集落后，消化传代接种到饲养层上，在含有细胞因子的培养液中进行培养，分离培养的卵丘干细胞具有鸟巢状细胞生长形态，细胞圆形、核较大，细胞表达干细胞特有的标记Oct4、Nanog、SSEA1，体外分化能够形成来源于三个胚层的神经细胞、肌肉细胞和肝脏细胞，结果显示从猪卵丘细胞中分离培养了卵丘干细胞。
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公开(公告)号：CN103074296A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310020667.3
申请日：2013-01-21
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/mlEGF+1.5U/mlhCG+1mM/mlGlu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uMForskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力，从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料，也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。
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公开(公告)号：CN102172331B
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201110029889.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 随刘才 , 张运海 , 李运生 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 陶勇 , 殷宗俊 , 章美玲 , 张远亮 , 焦明慧 , 季索菲 , 贾晴 , 张宇 , 桂涛 , 秦晓炜 , 周娜汝 , 刘晓蕊 , 王维 , 杨盼 , 张子军 , 丁建平
IPC: A61B17/435
Abstract: 本发明公开了一种应用于胚胎移植过程的胚胎运输方法及运输装置，使用保温容器为运载工具，容器内存有温水，在温水中放置轻质浮漂，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中用于胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
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公开(公告)号：CN102719361A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201210203962.8
申请日：2012-06-20
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种组织培养器皿与组织培养方法。组织培养器皿包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，培养皿包括盖子，内腔中还包括至少一个碗状容器，碗状容器包括半球形的碗底与开口，开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；碗状容器底部与培养皿底壁连接。组织培养方法包括如下步骤：（1）用亲水性明胶包被碗状容器；（2）添加培养液；（3）切割和加入组织块；（4）倒置培养皿后放入培养箱。本发明通过在普通培养皿的内腔设置碗状容器，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，其使用方便、成本较低、效果较好，特别适宜体积较小和密度较大的组织块的培养。
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公开(公告)号：CN102703423A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210195070.8
申请日：2012-06-14
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种小鼠淋巴细胞诱变方法，包括以下步骤：（1）淋巴细胞的分离；（2）小鼠ES细胞的培养；（3）淋巴细胞与ES细胞的融合；（4）诱变细胞的分离培养。淋巴细胞作为动物机体内的一种重要组成细胞，具有来源广泛、取材方面等优点，本发明借助细胞融合技术诱导小鼠淋巴细胞转变形成干细胞，形成的干细胞具有小鼠ES细胞的形态、基因表达、体外分化能力等特征，有效避免了病毒在干细胞诱导中的潜在危害。因此，该方法将为小鼠体细胞转变成干细胞并得到广泛应用奠定基础，同时，也为动物或人类的干细胞研究和利用提供重要借鉴。
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