细胞刮刀
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102321522A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110286475.8

    申请日:2011-09-23

    CPC classification number: C12M33/04 C12M47/04

    Abstract: 本发明公开了一种细胞刮刀,包括中空的管状体,管状体由细径管、锥形管和粗径管组成;管状体的前部为细径管,后部为粗径管,且细径管的管径小于粗径管,细径管与粗径管通过锥形管连接;细径管轴线与锥形管轴线构成钝角;锥形管与粗径管同轴;细径管、锥形管和粗径管的内腔连通为一体;管状体的两端设有开口,一端开口位于细径管的前端,另一端开口位于粗径管的末端。本发明采用曲面结构细胞刮刀,刮擦时对细胞集落分割容易且损伤小,装上吸头又可用作转移细胞的吸管,是一件适于在细胞传代过程中使用的方便高效的操作工具。

    动物细胞内核蛋白提取方法

    公开(公告)号:CN102277402A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110204137.5

    申请日:2011-07-20

    Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体,介导重组核蛋白在细胞核内表达,待重组核蛋白在细胞内表达稳定后,使用操作液处理细胞,收集细胞,超声波破碎,离心去沉淀后收集细胞上清液,上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中,4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变,结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。

    动物细胞内核蛋白提取方法

    公开(公告)号:CN102277402B

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201110204137.5

    申请日:2011-07-20

    Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体,介导重组核蛋白在细胞核内表达,待重组核蛋白在细胞内表达稳定后,使用操作液处理细胞,收集细胞,超声波破碎,离心去沉淀后收集细胞上清液,上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中,4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变,结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。

    乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法

    公开(公告)号:CN102676581A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210100640.0

    申请日:2012-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法,属于生物工程技术领域。体外合成包括目的基因hBPI的CDS序列,该CDS序列上游添加了XhoI酶切位点、Kozak序列、牛β-酪蛋白信号肽,下游添加了XhoI酶切位点;并将此体外合成序列定向克隆至经XhoI酶切的pBC1-loxp-neo-loxp-pBD载体;经菌液PCR和测序验证,获得了构建正确的人杀菌/通透性增强蛋白乳腺特异表达载体pBC1-loxp-Neo-loxp-hBPI。本发明经细胞C-127水平的功能验证表明该载体基因构建合理、有效,这将为成功制作动乳腺生物反应器生产hBPI蛋白奠定了坚实的基础。

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