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公开(公告)号：CN102358891A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110286503.6
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了牛体细胞病毒诱导方法。本发明通过慢病毒多次感染牛成纤维细胞后能够简单、高效、快速地引起细胞发生诱变，诱变的细胞在形态和生长性能等方面呈现特征性变化，表现出一定的干细胞特征，诱变形成的细胞改变原有的纤维状形态而呈现细胞集落团，细胞集落生长迅速、形态稳定，常规的冻存和传代对细胞生长性能无明显影响。牛体细胞病毒诱导方法诞生的诱变细胞将会作为一种新型的细胞材料在牛的转基因克隆、新品种培育、育种改良及细胞基因表达调控等方面发挥重要的作用，同时，也为人类及其他物种的细胞提供借鉴和参考。
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公开(公告)号：CN102229909A
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN201010138766.8
申请日：2010-03-31
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/073 , C12N15/62 , C12N15/867 , C12N7/01
Abstract: 本发明公开了一种牛诱导性多能干细胞诱导方法，利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein，EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于牛诱导性多能干细胞的诱导，对表达外源限定因子融合蛋白的牛胎儿成纤维细胞进行培养传代，逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆，细胞集落生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶检测为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，结果证实分离培养的细胞克隆具有胚胎干细胞样特征，得到牛诱导性多能干细胞。
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公开(公告)号：CN102172331A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110029889.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 随刘才 , 张运海 , 李运生 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 陶勇 , 殷宗俊 , 章美玲 , 张远亮 , 焦明慧 , 季索菲 , 贾晴 , 张宇 , 桂涛 , 秦晓炜 , 周娜汝 , 刘晓蕊 , 王维 , 杨盼 , 张子军 , 丁建平
IPC: A61B17/435
Abstract: 本发明公开了一种应用于胚胎移植过程的胚胎运输方法及运输装置，使用保温容器为运载工具，容器内存有温水，在温水中放置轻质浮漂，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中用于胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
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公开(公告)号：CN103215221A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310071009.7
申请日：2013-03-06
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了山羊卵丘细胞体外培养抗凋亡处理方法，包括以下步骤：（1）卵丘卵母细胞复合物体外成熟培养挑取的卵丘卵母细胞复合物经操作液清洗后，置于成熟液中，培养时，将维甲酸添加到成熟液中，50～80个卵丘卵母细胞复合物/孔，覆盖矿物油，于饱和湿度下，38.5°C培养；所述操作液组分为TCM199+5%FBS+100IU/ml青霉素+0.1mg/ml链霉素；所述成熟液组分为TCM199+10%FBS+10IU/mlPMSG+5IU/mlhCG +0.1mg/mlL-半胱氨酸+10ng/mlEGF；（2）卵丘细胞凋亡相关基因表达检测（3）卵丘细胞凋亡末端标记检测。本发明在山羊卵丘卵母细胞复合物体外成熟培养过程中，添加维甲酸（RA）能够有效地抑制卵母细胞外周卵丘细胞的凋亡，进而促进山羊卵母细胞细胞核与细胞质的成熟。
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公开(公告)号：CN103074296A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310020667.3
申请日：2013-01-21
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/mlEGF+1.5U/mlhCG+1mM/mlGlu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uMForskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力，从而为小鼠作为实验动物模型在新品种培育、转基因育种和品种改良等方面的重要的材料，也为人类辅助生殖技术的纵深发展提供基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102172331B
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201110029889.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 安徽农业大学
Inventor： 随刘才 , 张运海 , 李运生 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 陶勇 , 殷宗俊 , 章美玲 , 张远亮 , 焦明慧 , 季索菲 , 贾晴 , 张宇 , 桂涛 , 秦晓炜 , 周娜汝 , 刘晓蕊 , 王维 , 杨盼 , 张子军 , 丁建平
IPC: A61B17/435
Abstract: 本发明公开了一种应用于胚胎移植过程的胚胎运输方法及运输装置，使用保温容器为运载工具，容器内存有温水，在温水中放置轻质浮漂，利用温水承载浮漂，使得容器内所装载的胚胎处在一种温度均匀适当，并有轻微震荡的模仿母体的环境中，能够在运输途中能够保持胚胎的活力，有利于胚胎的发育，不失为胚胎移植过程中用于胚胎运输的一种取材容易、操作方便的运输方法和装置。
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公开(公告)号：CN102719361A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201210203962.8
申请日：2012-06-20
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种组织培养器皿与组织培养方法。组织培养器皿包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，培养皿包括盖子，内腔中还包括至少一个碗状容器，碗状容器包括半球形的碗底与开口，开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；碗状容器底部与培养皿底壁连接。组织培养方法包括如下步骤：（1）用亲水性明胶包被碗状容器；（2）添加培养液；（3）切割和加入组织块；（4）倒置培养皿后放入培养箱。本发明通过在普通培养皿的内腔设置碗状容器，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，其使用方便、成本较低、效果较好，特别适宜体积较小和密度较大的组织块的培养。
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公开(公告)号：CN102703423A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210195070.8
申请日：2012-06-14
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种小鼠淋巴细胞诱变方法，包括以下步骤：（1）淋巴细胞的分离；（2）小鼠ES细胞的培养；（3）淋巴细胞与ES细胞的融合；（4）诱变细胞的分离培养。淋巴细胞作为动物机体内的一种重要组成细胞，具有来源广泛、取材方面等优点，本发明借助细胞融合技术诱导小鼠淋巴细胞转变形成干细胞，形成的干细胞具有小鼠ES细胞的形态、基因表达、体外分化能力等特征，有效避免了病毒在干细胞诱导中的潜在危害。因此，该方法将为小鼠体细胞转变成干细胞并得到广泛应用奠定基础，同时，也为动物或人类的干细胞研究和利用提供重要借鉴。
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公开(公告)号：CN102696484A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210204315.9
申请日：2012-06-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种组织培养器皿与组织培养方法。组织培养器皿包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养器皿，内腔中还包括至少一个托盘和支架，托盘底设有通孔；所述托盘设在支架上。组织培养方法包括如下步骤：（1）对托盘表面疏水性处理；（2）托盘架设在支架上并向支架所在培养皿内加入组织培养液；（3）加入组织块放入培养箱中培养。本发明通过在普通培养皿的结构上增加用支架支撑的托盘，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，使得所培养的组织在该环境中既能接触空气，又能保持营养供给，并且取出组织时不易造成破碎，具有使用方便、成本低廉、培养效果好、更适合表面积较大或组织密度较小的组织块的培养。
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公开(公告)号：CN102690782A
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN201210194864.2
申请日：2012-06-14
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种成纤维细胞培养液，由以下组分组成：10％胎牛血清，4ng/ml碱性成纤维细胞生长因子，2.5μg/mlPlasmocin，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素，高糖DMEM培养液补足到100%。本发明设计的成纤维细胞培养液与常规的成纤维细胞培养液相比，能使成纤维细胞生长速度快，增殖能力强，培养的成纤维细胞具有典型的纤维状形态，及具有更强的抗凋亡能力而不易衰老。因此，本发明设计的成纤维细胞培养液培养的成纤维细胞应用于生产实践将会生产出更高质量和效率的细胞工程产品。
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