公开(公告)号：CN101955910A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010138753.0

申请日：2010-03-31

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 张运海 ,  曹鸿国 ,  章孝荣 ,  李运生 ,  殷慧群 ,  孙雪萍 ,  薛奕杰 ,  张卫琴 ,  黄伟玲 ,  陈涛 ,  宋锐 ,  陶勇 ,  刘亚 ,  方富贵 ,  刘旭光 ,  任春环 ,  张子军 ,  殷宗俊 ,  丁建平

IPC: C12N5/073 ,  C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明公开了一种猪诱导性多能干细胞诱导方法，利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein，EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于猪诱导性多能干细胞的诱导，对表达外源限定因子融合蛋白的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代，逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆，细胞集落生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶检测为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，分离培养的细胞克隆得到猪诱导性多能干细胞。

公开(公告)号：CN102174466A

公开(公告)日：2011-09-07

申请号：CN201110008808.0

申请日：2011-01-14

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 曹鸿国 ,  章孝荣 ,  刘亚 ,  张运海 ,  陶勇 ,  方富贵 ,  殷慧群 ,  孙雪萍 ,  薛奕杰 ,  张卫琴 ,  黄伟玲 ,  陈涛 ,  李运生 ,  任春环 ,  张子军 ,  丁建平 ,  刘洪瑜 ,  刘旭光 ,  王力生

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/10 ,  C12N7/01 ,  C12N15/867

Abstract: 本发明公开了一种猪体细胞诱变方法，利用携带增强型绿色荧光蛋白标记的慢病毒多次感染作用胎猪成纤维细胞，在干细胞培养液的生长环境条件下胎猪成纤维细胞逐步改变原有的纤维状生长形态，形成鸟巢状细胞集落，分离培养传代的细胞集落边缘界限清晰，生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶表达为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，结果证实慢病毒作用下发生诱变的猪体细胞具有干细胞特征。