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公开(公告)号：CN110343654A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910755446.8
申请日：2019-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的基因工程菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以pET-28a为载体构建重组质粒pET-28a-SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，得到高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为504.19U/mL，比酶活为145.19U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。
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公开(公告)号：CN109321463A
公开(公告)日：2019-02-12
申请号：CN201811267377.8
申请日：2018-10-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/02
Abstract: 本发明公开了一种耐热型脱硫菌筛选培养液及其筛选方法，属于微生物、环境工程技术领域。许多耐热型脱硫菌是生活在温泉等环境中的自养型细菌，由于其生长速度慢，经常难以筛选得到。本发明通过优化脱硫菌筛选培养液并加入辅助筛选脱硫菌的非脱硫菌黄热厌氧芽孢杆菌Anoxybacillus flavithermus，使得本发明得到的培养液能够筛选出普通脱硫菌培养液无法筛选出的低含量的脱硫菌，有效的避免了样品中脱硫菌被漏筛的问题，大大地提高了耐热型脱硫菌的筛选效率，尤其是对温泉水温度不超过75℃的温泉中耐热型脱硫菌的筛选非常高效，为耐热型脱硫菌的筛选提供了一种简单易行且高效的筛选方法。
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公开(公告)号：CN105837543B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201610202443.8
申请日：2016-04-01
Applicant: 江南大学
IPC: C07D309/40
Abstract: 本发明公开一种从发酵液中提取精制曲酸的方法，属于提取技术领域，解决提取技术中的提取方法脱色率低、耗时、得率低等问题。具体步骤为：将曲酸发酵液过滤除菌、阳离子交换树脂去除杂质阳离子、浓缩结晶、活性炭脱色和浓缩重结晶步骤，得到曲酸产品；所述活性炭脱色步骤采用粉末活性炭，在活性炭加量为发酵液的0.4～0.6％，脱色温度为75～85℃，保温0.5～1h，发酵液pH为3～4条件下进行的，最终获得了白色针状曲酸晶体，纯度达到98％以上。本发明具有曲酸发酵液脱色率高，曲酸损失率低等优点。
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公开(公告)号：CN106011114A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610601731.0
申请日：2016-07-28
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2457 , C12Y302/01041
Abstract: 一种提高普鲁兰酶稳定性的发酵液处理方法，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明采用一种10×发酵液处理溶液处理来源于重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980‑BdP的普鲁兰酶发酵液，经过处理的发酵液中普鲁兰酶酶活稳定性明显高于未经处理的发酵液。本发明所述方法在以重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980‑BdP为菌种发酵制备普鲁兰酶工艺的后提取阶段可以减少酶活损失。
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公开(公告)号：CN105837543A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610202443.8
申请日：2016-04-01
Applicant: 江南大学
IPC: C07D309/40
CPC classification number: C07D309/40
Abstract: 本发明公开一种从发酵液中提取精制曲酸的方法，属于提取技术领域，解决提取技术中的提取方法脱色率低、耗时、得率低等问题。具体步骤为：将曲酸发酵液过滤除菌、阳离子交换树脂去除杂质阳离子、浓缩结晶、活性炭脱色和浓缩重结晶步骤，得到曲酸产品；所述活性炭脱色步骤采用粉末活性炭，在活性炭加量为发酵液的0.4～0.6％，脱色温度为75～85℃，保温0.5～1h，发酵液pH为3～4条件下进行的，最终获得了白色针状曲酸晶体，纯度达到98％以上。本发明具有曲酸发酵液脱色率高，曲酸损失率低等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105802943A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610306855.6
申请日：2016-05-11
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2457 , C12P19/16 , C12Y302/01041
Abstract: 一种性能改善的普鲁兰酶嵌合体及高产该嵌合体的巴斯德毕赤酵母突变株，属于微生物、酶工程技术及淀粉加工领域。本发明对来源于Bacillus deramificans和Bacillus naganoensis的普鲁兰酶编码基因进行密码子优化，利用DNA Shuffling进行分子改组，得到一种嵌合体基因，嵌合体酶在酸性条件下能保持较高酶活，同时比酶活高于来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶。编码嵌合体的基因WXP03在巴斯德毕赤酵母细胞内表达出普鲁兰酶酶活，重组酶最适作用温度55℃，最适pH4.5酶活半衰期约18小时，在55℃，pH4.0酶活半衰期约为12小时。进一步诱变筛选获得一株摇瓶发酵酶活水平明显提高的巴斯德毕赤酵母突变株。突变株在5 L发酵罐上的发酵酶活达1800 U/mL。
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公开(公告)号：CN105779484A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610218659.3
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/485 , C12N15/66 , C12N2800/101 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至32.02％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN105755029A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610218976.5
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/67 , C12N2800/101 , C12P21/00
Abstract: 本发明公开了一种基于dacA提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至51.77％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN105647815A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201510942917.8
申请日：2015-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高米曲霉曲酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。具体地，通过改变培养基关键组分的浓度与接种条件控制米曲霉的菌落形态为球形(菌体处于最佳产酸形态)，进而提高曲酸产量。当菌体形态为菌球时，米曲霉(A.oryzae)的产酸能力比菌丝时明显提高，曲酸产量可达15.11g/L。同时，菌球直径范围为0.25～0.35mm时，单位细胞曲酸积累量最高为0.778g/g。本发明优化了种子培养基中葡萄糖、酵母提取物浓度和孢子浓度，控制菌球大小，从而提高了米曲霉单位细胞曲酸产量，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105062908A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510498085.5
申请日：2015-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产木糖醇的热带假丝酵母基因工程菌及其应用，属于食品甜味剂生物制造技术领域。本发明通过删除木糖醇脱氢酶基因，从根本上阻止木糖醇脱氢酶基因的表达，阻断木糖醇的代谢途径，从而达到木糖醇的累积，显著提升了木糖醇的转化率。本发明所提供的热带假丝酵母工程菌，在以含有木糖、葡萄糖或甘油或阿拉伯糖等混合碳源的发酵培养基中能够将木糖高效转化为木糖醇，转化率达到95％以上。
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