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公开(公告)号：CN104762302A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510164459.X
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种段植物基因序列。本发明从日本晴水稻中分离克隆和鉴定了一个镉(Cd)强烈诱导的水稻特异基因的启动子CdS2，并对获得的转基因水稻进行镉(Cd)处理，经过GUS化学染色发现，在处理后转基因植株在各个部位都有明显的染色。且通过RT-qPCR鉴定处理前后的Gus基因表达量分析发现，镉(Cd)处理后，转基因植株中的Gus基因表达量是处理前的887.9倍，达到组成型启动子ACTIN活性的4倍。该启动子能够用于通过其在水稻中的表达量来反应土壤中镉污染的强度，其操作简单、检出限低、微量灵敏且准确度高的特性，对从研究环境关系到改善生态环境，在可持续发展中发挥重要意义，并且可以积极地对形成污染的原理进行分析，进一步为它们避免与可控转化提供宝贵经验。
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公开(公告)号：CN103740717A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310727701.0
申请日：2013-12-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种植物胚特异性表达启动子及其应用。本发明的植物胚特异性表达启动子是通过发明人所设计的引物，以水稻基因组DNA为模板，利用PCR方法从水稻中分离得到。通过该启动子在水稻中的表达特异性实验表明本发明的启动子使β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因只在水稻种子胚中特异性表达。说明本发明的启动子可以启动外源基因在植物的胚中特异性的表达，适用于任何种子具有胚的植物，即单子叶植物或双子叶植物。
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公开(公告)号：CN119060966A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411334640.6
申请日：2024-09-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种水稻ACCase突变型蛋白及其应用。本发明提供了一种水稻ACCase突变型蛋白，所述水稻ACCase突变型蛋白为野生型水稻ACCase蛋白的氨基酸序列在第2038位处发生突变。含有本发明的水稻ACCase突变蛋白的转基因水稻在施用1倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株仍然正常生长发育和结实，而野生型水稻幼苗在施用1倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株死亡，并且含有在第2038位处的氨基酸序列由色氨酸突变半胱氨酸的突变型蛋白的转基因水稻在施用8倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株仍然正常生长发育和结实。
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公开(公告)号：CN115029374B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202210729325.8
申请日：2022-06-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥戬谷生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种用于骨干载体的pegRNA表达框及相应骨干载体和应用。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，pegRNA表达框和融合蛋白表达框位于同一双元载体中，pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成。本发明的enpPE2引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116855518A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310959199.X
申请日：2023-08-01
Applicant: 合肥戬谷生物科技有限公司 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用。本发明还提供了植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白、表达盒和重组载体。本申请的发明人通过实验证明，包含本发明的植物抗除草剂EPSPS突变型基因或植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白的植物，尤其是水稻，对草甘膦除草剂具有显著的抗性，能够在该除草剂中几乎不受影响地正常生长，而相同条件下野生型植株则生长受到显著抑制，本发明的该基因突变体具有巨大的市场经济前景。
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公开(公告)号：CN116732070A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310703968.X
申请日：2023-06-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/56 , C12N15/57 , C12N15/55 , C12N9/22 , C12N9/78 , C12N9/24 , C07K19/00 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种能够实现碱基颠换的CGBE碱基编辑器及其应用。本发明设计合成了鳕鱼来源的尿嘧啶糖基化酶基因cUNG，融合大鼠来源的胞嘧啶脱氨酶基因rAPO的突变体APOEE以及失活的Cas9蛋白基因nSpCas9，组合成为APOEE‑nCas9‑cUNG基因，该基因可以实现C‑G的碱基颠换。并且本发明还提供包括APOEE‑nCas9‑cUNG基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的APOEE‑nCas9‑cUNG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现高效率的C‑G碱基颠换。
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公开(公告)号：CN113201557A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110506582.0
申请日：2021-05-10
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种引导编辑系统介导作物产生内源除草剂抗性的方法，本发明获得了多种除草剂抗性的ACCase突变基因型，所述ACCase突变型基因在不同位点分别获得单一的氨基酸突变。首先利用CRISPR介导的引导编辑系统，获得ACCase突变型基因，具体表现为第1879位氨基酸由异亮氨酸分别突变为亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸等，第1927位由脯氨酸突变为络氨酸或苯丙氨酸，第2097位由色氨酸突变为甘氨酸、丝氨酸或亮氨酸，第2139位由异亮氨酸突变为天冬氨酸、缬氨酸、丝氨酸，第2176位由天冬氨酸突变为甘氨酸，第2194位由甘氨酸突变为丝氨酸和丙氨酸。这些ACCase突变型基因使受体植物在不同程度上具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性。
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公开(公告)号：CN112813064A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201911126536.7
申请日：2019-11-18
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种通过植物碱基编辑技术创制新抗除草剂水稻的方法。利用本发明提供的水稻乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因的特定靶点序列，使用单碱基编辑载体对水稻ACCase的编码基因特定靶点进行定点替换，获得了一种由野生型ACCase的编码基因核苷酸序列中的第6113位核苷酸G被核苷酸C取代的ACCase基因突变型，其相应编码的氨基酸序列的第2038位的色氨酸突变为丝氨酸，从而获得ACCase突变型蛋白。含有该种蛋白的水稻具有甲禾灵类除草剂抗性。本发明制备得到的甲禾灵类除草剂抗性水稻可耐受80mg/ml的甲禾灵除草剂喷施处理，具有很高的育种和栽培价值。
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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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