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公开(公告)号：CN112626050B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112575014B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN112575014A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种新型的碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112522302B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202011459058.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统、载体及其应用，所述共转录单元基因ABE‑CBE包括腺嘌呤脱氨酶的编码基因TadA和胞嘧啶脱氨酶编码基因CDA，所述共转录单元基因mutant TadA与LjCDAL1的编码序列构建于同一表达载体中。本发明融合了包含胞嘧啶碱基编辑器和腺嘌呤碱基编辑器的表达载体，造成基因组特异位点的核苷酸替换，实验证明，利用本发明设计的融合编辑工具构建植物表达载体，进而构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T至G:C相互替换的效率提升，可以在基因的特异位点实现C到T和A到G的同时替换，扩展了应用范围的同时减少了脱靶的产生。使得融合的A‑C base editing系统具有更广泛地应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112522302A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011459058.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统、载体及其应用，所述共转录单元基因ABE‑CBE包括腺嘌呤脱氨酶的编码基因TadA和胞嘧啶脱氨酶编码基因CDA，所述共转录单元基因mutant TadA与LjCDAL1的编码序列构建于同一表达载体中。本发明融合了包含胞嘧啶碱基编辑器和腺嘌呤碱基编辑器的表达载体，造成基因组特异位点的核苷酸替换，实验证明，利用本发明设计的融合编辑工具构建植物表达载体，进而构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T至G:C相互替换的效率提升，可以在基因的特异位点实现C到T和A到G的同时替换，扩展了应用范围的同时减少了脱靶的产生。使得融合的A‑C base editing系统具有更广泛地应用前景。
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公开(公告)号：CN119351600A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411494402.1
申请日：2024-10-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及水稻筛选分子标记技术领域，具体涉及一种快速筛选抗除草剂水稻种质的方法、CAPS分子标记及其应用。方法包括以下步骤：提取待测水稻种质植株的基因组DNA；以基因组DNA为模板，利用引物进行PCR、酶切后，检测是否含有89bp、171bp和260bp的条带，当仅含有260bp的条带时，对应待测水稻种质为非抗除草剂水稻，当含有89bp和171bp的两条条带时，对应待测水稻种质为抗除草剂水稻；本发明通过检测CAPS分子标记检测基因型，对水稻除草剂抗性进行鉴定和预测，避免了环境因子对表型鉴定的不利影响，且本发明PCR扩增稳定，检测准确度大大提高。
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公开(公告)号：CN116855518B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202310959199.X
申请日：2023-08-01
Applicant: 合肥戬谷生物科技有限公司 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用。本发明还提供了植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白、表达盒和重组载体。本申请的发明人通过实验证明，包含本发明的植物抗除草剂EPSPS突变型基因或植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白的植物，尤其是水稻，对草甘膦除草剂具有显著的抗性，能够在该除草剂中几乎不受影响地正常生长，而相同条件下野生型植株则生长受到显著抑制，本发明的该基因突变体具有巨大的市场经济前景。
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公开(公告)号：CN116814677A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310793261.2
申请日：2023-06-30
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种提高引导编辑效率的融合蛋白表达框及相应骨架载体和应用。本发明的骨干载体包括PE融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶和MLH基因破坏域序列组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，融合蛋白和pegRNA表达框表达框位于同一双元载体中，Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成；pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成。本发明的ePE2‑OsMLHdn引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114989282B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202210640201.2
申请日：2022-07-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种水稻OsTubA2突变型蛋白及相应基因。所述OsTubA2突变型基因编码蛋白的氨基酸序列存在如下突变：其对应于野生型水稻OsTubA2的氨基酸序列的第202位的缬氨酸发生突变。通过将该OsTubA2突变型基因导入水稻基因组并使其表达，本申请的发明人发现受体植物具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性，经过反复试验确认，证实该水稻OsTubA2突变型蛋白能够为植物，尤其是水稻提供二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂的抗性。
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