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公开(公告)号：CN112626050B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112522302A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011459058.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统、载体及其应用，所述共转录单元基因ABE‑CBE包括腺嘌呤脱氨酶的编码基因TadA和胞嘧啶脱氨酶编码基因CDA，所述共转录单元基因mutant TadA与LjCDAL1的编码序列构建于同一表达载体中。本发明融合了包含胞嘧啶碱基编辑器和腺嘌呤碱基编辑器的表达载体，造成基因组特异位点的核苷酸替换，实验证明，利用本发明设计的融合编辑工具构建植物表达载体，进而构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T至G:C相互替换的效率提升，可以在基因的特异位点实现C到T和A到G的同时替换，扩展了应用范围的同时减少了脱靶的产生。使得融合的A‑C base editing系统具有更广泛地应用前景。
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公开(公告)号：CN112522302B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202011459058.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种水稻双向单碱基编辑的共转录单元基因ABE‑CBE系统、载体及其应用，所述共转录单元基因ABE‑CBE包括腺嘌呤脱氨酶的编码基因TadA和胞嘧啶脱氨酶编码基因CDA，所述共转录单元基因mutant TadA与LjCDAL1的编码序列构建于同一表达载体中。本发明融合了包含胞嘧啶碱基编辑器和腺嘌呤碱基编辑器的表达载体，造成基因组特异位点的核苷酸替换，实验证明，利用本发明设计的融合编辑工具构建植物表达载体，进而构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T至G:C相互替换的效率提升，可以在基因的特异位点实现C到T和A到G的同时替换，扩展了应用范围的同时减少了脱靶的产生。使得融合的A‑C base editing系统具有更广泛地应用前景。
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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112575014B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112575014A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种新型的碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN116676306A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310352903.5
申请日：2023-04-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N5/10 , A01H5/02 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种作物花药特异表达的启动子SDGMS S1及其应用，所述作物花药特异表达启动子SDGMS S1能够驱动目的基因在花药中特异表达。更具体而言，本发明的启动子包含SEQ ID No:1所示的DNA序列或其同源物、衍生物。在应用中，本发明的启动子可以与具有提高作物花粉活力或降低作物花粉活性(雄性育性)的基因结合使用，将本发明的启动子与作物雄性育性基因相连接导入植物中，并驱雄性育性基因在作物的花药中表达，可以提高或降低作物的花粉活力。将本发明的启动子与花药雄性不育基因相连接，诱导该基因表达，可以降低花药中花粉活力，有利于杂种优势的利用。因此，从杂种优势的利用和粮食安全两个角度来讲，本发明的启动子都具有极高的商业价值。
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公开(公告)号：CN114989282B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202210640201.2
申请日：2022-07-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种水稻OsTubA2突变型蛋白及相应基因。所述OsTubA2突变型基因编码蛋白的氨基酸序列存在如下突变：其对应于野生型水稻OsTubA2的氨基酸序列的第202位的缬氨酸发生突变。通过将该OsTubA2突变型基因导入水稻基因组并使其表达，本申请的发明人发现受体植物具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性，经过反复试验确认，证实该水稻OsTubA2突变型蛋白能够为植物，尤其是水稻提供二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂的抗性。
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公开(公告)号：CN110257406B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN201910543766.7
申请日：2019-06-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域，公开了密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用。所述密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因具有SEQ ID No：1所示的核苷酸序列。本发明提供的密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的，即在维持编码氨基酸序列不变的前提下，利用发明人从与水稻基因相关密码子中所筛选出的密码子替换原有密码子，得到植物化改造的Plant Nme2Cas9基因，再经过化学合成而来。采用本发明的基因可以明显提高剪切效率。
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公开(公告)号：CN110878305B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201911249683.3
申请日：2019-12-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种单碱基编辑系统OsSpCas9‑eCDA及其应用和育种方法。本发明通过大量的实验，尝试采用不同的方式对SpCas9‑ABE进行改造，终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249‑OsSpCas9‑eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑，可以编辑更多的突变体，获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
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