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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112626049A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481713.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRRH基因及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRRH突变体，发现利用该SpCas9‑NRRH突变体进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRRH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN110878305A
公开(公告)日：2020-03-13
申请号：CN201911249683.3
申请日：2019-12-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种高效的单碱基编辑系统OsSpCas9-eCDA及其应用和育种方法。本发明通过大量的实验，尝试采用不同的方式对SpCas9-ABE进行改造，终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249-OsSpCas9-eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249-OsSpCas9-eABE基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的CP1249-OsSpCas9-eABE基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑，可以编辑更多的突变体，获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
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公开(公告)号：CN110878305B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201911249683.3
申请日：2019-12-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种单碱基编辑系统OsSpCas9‑eCDA及其应用和育种方法。本发明通过大量的实验，尝试采用不同的方式对SpCas9‑ABE进行改造，终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249‑OsSpCas9‑eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑，可以编辑更多的突变体，获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
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公开(公告)号：CN112626050B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112553246A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011444975.5
申请日：2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR‑SaCas9系统的高效基因组编辑载体及其应用，属于植物基因工程领域。本发明还提供了将其导入水稻细胞的方法。本发明的高效基因组编辑载体包括第一表达盒和任选的第二表达盒，所述的第一表达盒为sgRNA表达盒，第二表达盒为SaCas9‑NLS融合蛋白表达盒。利用本发明的基因编辑载体，可以在预定的水稻基因组位点，简便而高效地进行基因突变。
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公开(公告)号：CN112538492A
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202011474234.1
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内，使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；所述sgRNA靶向所述靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NRTH，N为A、T、C或G；R为A或T；H为A，T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换，如PAM序列为NRTH的靶点序列，扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112430613A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011443163.9
申请日：2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种SpG基因及其应用。本发明在OsSpCas9的基础上突变6个氨基酸获得SpG基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用突变的SpG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切。本发明实现了水稻基因打靶，这是因为经突变后的SpG适用于水稻的基因组剪切。
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公开(公告)号：CN112538492B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202011474234.1
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内，使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；所述sgRNA靶向所述靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NRTH，N为A、T、C或G；R为A或T；H为A，T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换，如PAM序列为NRTH的靶点序列，扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112626049B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481713.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRRH基因及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRRH突变体，发现利用该SpCas9‑NRRH突变体进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRRH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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