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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112626050B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112575014B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN112575014A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种新型的碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN114540374A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210267086.9
申请日：2022-03-17
Applicant: 安徽农业大学 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了高抗除草剂植物基因突变体及相应载体与应用。本发明提供了两种抗除草剂的基因突变体，二者都能够为植物提供除草剂抗性，尤其是对于二硝基苯胺类除草剂具有良好抗性。将本发明的两个突变体OsTubA2和LOC_Os11g14220中的任意一个导入水稻基因组并使其表达，受体植物都可以具有对二甲戊灵等二硝基苯胺类除草剂极高的抗(耐)性，这为抗除草剂作物的培育提供了更多的基因资源，可以有效地提升作物的抗除草剂性能进而提升作物产量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113151200A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110506568.0
申请日：2021-05-10
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂ACCase突变型蛋白以及相应基因和应用。所述ACCase突变型蛋白的氨基酸序列对应于野生型植物ACCase的氨基酸序列的第2097位发生突变，由色氨酸突变为缬氨酸、脯氨酸、精氨酸、丝氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、色氨酸、赖氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、丙氨酸以及谷氨酸中的一种。本发明还提供一种介导产生内源抗除草剂植物的位点，通过改变植物乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因型，使突变体植株具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性。
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公开(公告)号：CN112824526A
公开(公告)日：2021-05-21
申请号：CN201911126195.3
申请日：2019-11-18
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种水稻ACCase突变型蛋白及相应基因。所述ACCase突变型基因编码蛋白的氨基酸序列存在如下突变：其对应于野生型水稻ACCase的氨基酸序列的第1792位发生突变。利用CRISPR介导的单碱基编辑途径，使野生型水稻ACCase基因第5374位点核苷酸发生突变，由A变成G，导致其相应编码的氨基酸序列的第1792位点由异亮氨酸变为缬氨酸，从而获得ACCase突变型蛋白。将该ACCase突变型基因导入水稻基因组并使其表达，受体植物可以具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性。
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公开(公告)号：CN115029374B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202210729325.8
申请日：2022-06-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥戬谷生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种用于骨干载体的pegRNA表达框及相应骨干载体和应用。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，pegRNA表达框和融合蛋白表达框位于同一双元载体中，pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成。本发明的enpPE2引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114478731A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210265741.7
申请日：2022-03-17
Applicant: 安徽农业大学 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物突变型蛋白及其应用，所述突变型蛋白的氨基酸序列由野生型水稻LOC_Os11g14220的氨基酸序列在第239位或者OsTubA2基因第136位发生突变而获得。本申请的发明人发现并应用了能够对植物，尤其是水稻带来二硝基苯胺类除草剂的抗(耐)性的突变型蛋白。通过增加本发明所获得突变型蛋白的表达或活性，或者将编码该蛋白的突变型基因导入水稻基因组并使其表达，受体植物可以具有对二硝基苯胺类除草剂的抗(耐)性。
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公开(公告)号：CN113201557A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110506582.0
申请日：2021-05-10
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种引导编辑系统介导作物产生内源除草剂抗性的方法，本发明获得了多种除草剂抗性的ACCase突变基因型，所述ACCase突变型基因在不同位点分别获得单一的氨基酸突变。首先利用CRISPR介导的引导编辑系统，获得ACCase突变型基因，具体表现为第1879位氨基酸由异亮氨酸分别突变为亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸等，第1927位由脯氨酸突变为络氨酸或苯丙氨酸，第2097位由色氨酸突变为甘氨酸、丝氨酸或亮氨酸，第2139位由异亮氨酸突变为天冬氨酸、缬氨酸、丝氨酸，第2176位由天冬氨酸突变为甘氨酸，第2194位由甘氨酸突变为丝氨酸和丙氨酸。这些ACCase突变型基因使受体植物在不同程度上具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性。
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