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公开(公告)号:CN110257406B
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN201910543766.7
申请日:2019-06-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域,公开了密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用。所述密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明提供的密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的,即在维持编码氨基酸序列不变的前提下,利用发明人从与水稻基因相关密码子中所筛选出的密码子替换原有密码子,得到植物化改造的Plant Nme2Cas9基因,再经过化学合成而来。采用本发明的基因可以明显提高剪切效率。
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公开(公告)号:CN112725348A
公开(公告)日:2021-04-30
申请号:CN201911029085.5
申请日:2019-10-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高水稻碱基编辑效率的基因、方法及其应用。本发明合成了一种含抗潮霉素蛋白的编码基因HPT、SpCas9蛋白的编码基因SpCas9n和腺嘌呤脱氨酶编码基因ABE的共转录单元ABEHPT,还提供包含该ABEHPT的一种表达载体,以及表达载体在水稻基因单碱基编辑方面的应用。将表达载体导入植物体内后,能同时转录和翻译ABE碱基编辑器和潮霉素基因,通过潮霉素筛选,提高植物细胞中ABE碱基编辑器表达量,从而提高植物细胞中ABE碱基编辑效率。实验证明,利用本发明设计的ABEHPT基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T突变成G:C定点替换的效率大幅提升,在高效获得单碱基替换植株方面具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN110257406A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910543766.7
申请日:2019-06-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域,公开了密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用。所述密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明提供的密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的,即在维持编码氨基酸序列不变的前提下,利用发明人从与水稻基因相关密码子中所筛选出的密码子替换原有密码子,得到植物化改造的Plant Nme2Cas9基因,再经过化学合成而来。采用本发明的基因可以明显提高剪切效率。
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公开(公告)号:CN112725348B
公开(公告)日:2022-04-01
申请号:CN201911029085.5
申请日:2019-10-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高水稻碱基编辑效率的基因、方法及其应用。本发明合成了一种含抗潮霉素蛋白的编码基因HPT、SpCas9蛋白的编码基因SpCas9n和腺嘌呤脱氨酶编码基因ABE的共转录单元ABEHPT,还提供包含该ABEHPT的一种表达载体,以及表达载体在水稻基因单碱基编辑方面的应用。将表达载体导入植物体内后,能同时转录和翻译ABE碱基编辑器和潮霉素基因,通过潮霉素筛选,提高植物细胞中ABE碱基编辑器表达量,从而提高植物细胞中ABE碱基编辑效率。实验证明,利用本发明设计的ABEHPT基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T突变成G:C定点替换的效率大幅提升,在高效获得单碱基替换植株方面具有重要的应用价值。
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