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公开(公告)号：CN113109562A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110384341.3
申请日：2021-04-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 武汉天问生物科技有限公司
IPC: G01N33/573 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开一种植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法，涉及植物分子检测技术领域，本发明包括以下步骤：(1)多克隆抗体的制备；(2)植物组织提取液的制备；(3)将步骤(2)中的植物组织提取液加入微孔板中包被12‑48h，然后倒出包被液并用PBST溶液清洗微孔板，加入PBS‑milk溶液进行封闭；(4)封闭后将微孔板洗净，加入一抗工作液孵育后洗净，加入二抗工作液进行孵育，加入底物溶液，终止反应，测定吸光度值，将吸光度值代入标准曲线获得EPSPS蛋白含量。本发明的优点为：对新型抗除草剂蛋白EPSPS进行定量检测，所用耗材简单易得，所用试剂无需复杂配制过程，成本低廉易于实施，具有普适性。
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公开(公告)号：CN107699632B
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN201711160257.3
申请日：2017-11-20
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了一种分析水稻遗传多样性、鉴定品种的InDel标记，公开了InDel标记在水稻中的位点，获得该InDel标记的引物，及相关应用。该InDel标记通用性好，不需要大型的设备仪器；本发明的InDel标记能精确区分待测品种的基因型以及品种间的遗传差异，遗传距离很近的位点的差异也能区分；在对某个位点的引物设计好后，可以针对这个位点对多个个体进行研究，成本可以得到很好的控制。
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公开(公告)号：CN110229846B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201910538395.3
申请日：2019-06-20
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/82 , C12N15/66 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻筛查的通用阳性标准质粒及其构建方法；所述通用阳性标准质粒包括载体骨架和筛选元件，所述的筛选元件包括CaMV35S启动子、Ubiquitin启动子、NOS终止子、CaMV35S终止子、Bar基因、HPT基因、Bt基因、SPS基因和PLD基因。本发明进一步公开了构建所述通用阳性标准质粒的方法及其在转基因水稻筛查、检测和监测中的应用。在转基因水稻筛查检测时，采用本发明提供的通用阳性标准质粒作为阳性对照品和质控样品可检测多种转基因水稻，具有适用性宽、覆盖面广泛等特点。
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公开(公告)号：CN107389861B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201710564832.X
申请日：2017-07-12
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻组织培养特性的快速鉴别方法。本申请的发明人在实验中意外发现水稻组织培养特性与水稻组织对特定浓度的氯酸钾溶液的抗性有直接的正相关性，并据此发现找到了一种能够快速对水稻组织培养特性进行鉴别的方法。本发明的方法使用氯酸钾溶液处理水稻幼苗，观察幼苗的受伤程度，通过特定时间段内的氯酸钾反应等级来定性，氯酸钾反应指数来定量，评价不同水稻材料对氯酸钾的抗性(敏感性)。从而实现高通量、快速简便地鉴别大量水稻材料的组织培养特性。相对于传统方法，本方法不需经过组织培养过程，具有简便高效、周期短、成本低的特点，显著提高不同水稻材料的组织培养特性的鉴别效率。
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公开(公告)号：CN104762303B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201510164460.2
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种植物镉诱导表达启动子CdS1及其应用，所述植物镉诱导表达启动子CdS1能够驱动目的基因在镉诱导条件下表达。更具体而言，本发明的启动子包含SEQ ID No:1所示的DNA序列或其同源物、衍生物。在应用中，本发明的启动子可以与具有改善植物的耐镉或抗镉性状的基因结合使用，将本发明的启动子与耐镉或抗镉基因相连接导入植物中，并驱动耐镉或抗镉基因在植物的根、茎、叶或其他部位表达，可以提高植物的耐镉或抗镉性能。比如，如果将本发明的启动子与抑制植物镉吸收的基因相连接，诱导该基因在高镉环境下集中表达，可以减少植物对镉的吸收，进而降低食品中的镉含量。因此，从环境安全和食品安全两个角度来讲，本发明的启动子都具有极高的商业价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107699632A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201711160257.3
申请日：2017-11-20
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了一种分析水稻遗传多样性、鉴定品种的InDel标记，公开了InDel标记在水稻中的位点，获得该InDel标记的引物，及相关应用。该InDel标记通用性好，不需要大型的设备仪器；本发明的InDel标记能精确区分待测品种的基因型以及品种间的遗传差异，遗传距离很近的位点的差异也能区分；在对某个位点的引物设计好后，可以针对这个位点对多个个体进行研究，成本可以得到很好的控制。
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公开(公告)号：CN103993039B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981216B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410225914.8
申请日：2014-05-23
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种骨干质粒载体，在该骨干质粒载体中：向导RNA表达框和Cas9核酸酶表达框位于同一双元载体中，向导RNA表达框由小麦TaU3p启动子、壮观霉素抗性基因、人工合成的sgRNA骨架序列和Poly-T终止子依次构成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子、植物偏好密码子改造后的Cas9编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了由所述骨干质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，用于作物基因打靶的应用。
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公开(公告)号：CN105087589A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510604700.6
申请日：2015-09-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种启动子元件OsEmb2及利用其培育转基因水稻的方法和应用。本发明的启动子元件OsEmb2特别适合驱动外源基因在水稻胚中特异性表达，而在水稻的其它组织中不表达。所述启动子的表达特异性和专一性很高。本发明还提供了具有所述启动子的构建物、表达盒和载体等。此外，本发明提供了利用该启动子元件获得相应宿主菌细胞的方法。含本发明启动子的转基因水稻可以特异性地改善水稻的农艺性状，有效避免外源基因导入对水稻其它组织的影响，还能在胚中特异性表达外源基因，从而获得各种相关产物。
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公开(公告)号：CN103773766B
公开(公告)日：2015-10-14
申请号：CN201410025199.3
申请日：2014-01-20
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种水稻根特异性表达启动子POsRo1及其应用，本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。具体而言，本发明将上述启动子应用在植物转基因工程中。本发明提供的启动子可以启动外源基因在植物侧根和根毛中特异性表达，适用于具有根的植物，特别是单子叶植物，尤其能够驱动外源基因在水稻侧根和根毛中特异性表达，对根系的形态建成和根构型的重建并进行作物的遗传改良具有重要的意义，也是改良物种的一条重要途径从而培育出理想的生物安全性高的转基因植物品种。
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