一种用于检测水稻野败型三系的引物组合及其应用

    公开(公告)号:CN119876460A

    公开(公告)日:2025-04-25

    申请号:CN202510107462.1

    申请日:2025-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测水稻野败型三系(不育系、恢复系、保持系)和杂交种纯度的引物组合及其应用,所述引物组包括用于鉴定野败不育基因WA352、主效恢复基因Rf4基因和内参基因Actin的特异性引物混合物,调整六条引物组合比例之后,单孔扩增即可区分野败型三系的不育系、恢复系、保持系和杂交种四种水稻材料。本发明的特异性引物组合扩增效率高,检测结果稳定,可通过琼脂糖直接判读基因型,检测方法操作简便,成本极低,绿色环保,填补了三系杂交种纯度检测中缺乏功能基因标记的空白。

    植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法

    公开(公告)号:CN113109562B

    公开(公告)日:2022-03-11

    申请号:CN202110384341.3

    申请日:2021-04-09

    Abstract: 本发明公开一种植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法,涉及植物分子检测技术领域,本发明包括以下步骤:(1)多克隆抗体的制备;(2)植物组织提取液的制备;(3)将步骤(2)中的植物组织提取液加入微孔板中包被12‑48h,然后倒出包被液并用PBST溶液清洗微孔板,加入PBS‑milk溶液进行封闭;(4)封闭后将微孔板洗净,加入一抗工作液孵育后洗净,加入二抗工作液进行孵育,加入底物溶液,终止反应,测定吸光度值,将吸光度值代入标准曲线获得EPSPS蛋白含量。本发明的优点为:对新型抗除草剂蛋白EPSPS进行定量检测,所用耗材简单易得,所用试剂无需复杂配制过程,成本低廉易于实施,具有普适性。

    三系杂交水稻多用途恢复系的分子标记辅助选育方法

    公开(公告)号:CN100445396C

    公开(公告)日:2008-12-24

    申请号:CN200510095747.0

    申请日:2005-11-21

    Abstract: 一种三系杂交水稻多用途恢复系分子标记辅助选育方法,包括选取含广亲和基因材料分别与野败型、红莲型和包台型恢复系进行聚合杂交,对其分离世代中的优异单株进行分子标记辅助选择,选择出含有至少4种不同目的基因的优异单株进行花药培养,直至获得含有4种以上不同目的基因均纯合稳定的优异材料,再经测交、复测选择得到稳定的多用途恢复系。所述的分子标记就是提取分离世代中优异单株的DNA为模板,用一定核苷酸序列的双引物进行PCR反应和SSR多态性分析,以确定含有多个目的基因。本方法为作物新品种的选育提供了快速、准确且可预见的实用方法。

    常异花授粉作物品种分子鉴定和指纹图谱构建的杂株剔除方法

    公开(公告)号:CN113234847A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110511756.2

    申请日:2021-05-11

    Abstract: 本发明公开了常异花授粉作物品种分子鉴定和指纹图谱构建的杂株剔除方法。所述方法包括,(1)随机选取常异花授粉作物品种样品,单株提取DNA;(2)设计多对SSR引物;(3)利用SSR引物逐一对样品各单株进行扩增分析;(4)逐一记录每对SSR引物对样品各单株的扩增结果并进行聚类分析绘成树状图,通过对树状图进行分析剔除与多数个体遗传差异较大的混杂株,用剩余的单株代表该品种用于品种的分子鉴定或指纹图谱构建。本发明通过SSR分子标记对样品各单株进行扩增并结合软件分析剔除混杂株,有效的避免常异花授粉作物品种分子鉴定中由于杂株干扰而造成的错判、误判现象,为准确的构建品种指纹图谱工作提供了依据。

    一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法及PCR方法

    公开(公告)号:CN109897886A

    公开(公告)日:2019-06-18

    申请号:CN201910305392.5

    申请日:2019-04-16

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法及PCR方法,本发明应用碱处理水稻糙米直接作为PCR反应模板,其目的在于创立一种快速、有效、简便地进行植物DNA扩增的新方法,该方法是将水稻稻米样品去皮,于37℃光照下培养24个小时至露白,得到胚芽米,待用;取S1制得的胚芽米投入试剂A中,于95-100℃下煮6-10min,再加入等量的试剂B,搅拌均匀,获得胚芽米DNA模板,利用SSR标准引物,以所述DNA模板进行PCR扩增。本发明在进行种性验证及辅助田间育种时,具有时效性强、提取步骤简单、化学试剂较少、气味小以及环保的技术效果。

    一种农作物品种身份证管理方法

    公开(公告)号:CN103049725A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201210475185.2

    申请日:2012-11-21

    Abstract: 本发明提供了一种农作物品种身份证管理方法,其特征在于,采集农作物品种身份信息并将其存储于服务器中,存储于服务器中的作物品种身份信息再通过数据转化器转换成一一对应的可读取的数字码、条形码或二维码;被采集的农作物品种在流通环节中以其对应的数字码、条形码或二维码进行标识,然后通过信息读取终端对农作物品种的数字码、条形码或二维码进行读取,农作物品种的身份信息再通过数据转化器以文字信息方式显示其的身份信息;所述文字信息方式是指存储在所述服务器中的未经过转换的采集信息。本发明通过构建农作物品种身份信息,然后以二维码等形式进行标识,再通过信息读取终端识别二维码,读取农作物品种的身份信息,为农作物品种的科学化和标准化管理提供便利。

    用于转基因水稻转化体鉴定的阳性质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110724704A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201910984651.1

    申请日:2019-10-16

    Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻转化体鉴定的阳性质粒及其构建方法和应用。所述阳性质粒包括载体骨架和筛选元件,该筛选元件由11个水稻转化体侧翼序列以及2个水稻内标准基因组成,2个水稻内标准基因分别是SPS基因和PLD基因。本发明所构建的阳性质粒能够应用于转基因水稻筛查和检测,包括:将所述的阳性质粒作为转基因水稻检测用的阳性对照质粒或阳性标准品,对待检测的水稻样品进行转基因成分的普通PCR或实时荧光PCR筛查检测,能够准确检测多种转基因水稻,满足转基因水稻安全监管和检测工作的需求,避免了现有检测鉴定过程中针对多个检测靶标需要制备多个阳性对照的问题,具有覆盖面积广、易大量获得、制备简单等特点。

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