公开(公告)号：CN110229846B

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN201910538395.3

申请日：2019-06-20

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所

Inventor： 马卉 ,  汪秀峰 ,  张秀杰 ,  许学 ,  李夏莹 ,  焦小雨 ,  陈子言 ,  赵伟

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻筛查的通用阳性标准质粒及其构建方法；所述通用阳性标准质粒包括载体骨架和筛选元件，所述的筛选元件包括CaMV35S启动子、Ubiquitin启动子、NOS终止子、CaMV35S终止子、Bar基因、HPT基因、Bt基因、SPS基因和PLD基因。本发明进一步公开了构建所述通用阳性标准质粒的方法及其在转基因水稻筛查、检测和监测中的应用。在转基因水稻筛查检测时，采用本发明提供的通用阳性标准质粒作为阳性对照品和质控样品可检测多种转基因水稻，具有适用性宽、覆盖面广泛等特点。

公开(公告)号：CN110724704B

公开(公告)日：2020-12-22

申请号：CN201910984651.1

申请日：2019-10-16

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所

Inventor： 马卉 ,  张秀杰 ,  汪秀峰 ,  焦小雨 ,  许学 ,  李夏莹 ,  吴爽 ,  陈子言 ,  王颢潜 ,  梁晋刚

IPC: C12N15/82 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻转化体鉴定的阳性质粒及其构建方法和应用。所述阳性质粒包括载体骨架和筛选元件，该筛选元件由11个水稻转化体侧翼序列以及2个水稻内标准基因组成，2个水稻内标准基因分别是SPS基因和PLD基因。本发明所构建的阳性质粒能够应用于转基因水稻筛查和检测，包括：将所述的阳性质粒作为转基因水稻检测用的阳性对照质粒或阳性标准品，对待检测的水稻样品进行转基因成分的普通PCR或实时荧光PCR筛查检测，能够准确检测多种转基因水稻，满足转基因水稻安全监管和检测工作的需求，避免了现有检测鉴定过程中针对多个检测靶标需要制备多个阳性对照的问题，具有覆盖面积广、易大量获得、制备简单等特点。

公开(公告)号：CN109897886A

公开(公告)日：2019-06-18

申请号：CN201910305392.5

申请日：2019-04-16

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所

Inventor： 汪秀峰 ,  倪金龙 ,  许学 ,  马卉 ,  王钰 ,  焦小雨 ,  叶洋洋 ,  鲍翔宇 ,  林玲 ,  左泽平

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法及PCR方法，本发明应用碱处理水稻糙米直接作为PCR反应模板，其目的在于创立一种快速、有效、简便地进行植物DNA扩增的新方法，该方法是将水稻稻米样品去皮，于37℃光照下培养24个小时至露白，得到胚芽米，待用；取S1制得的胚芽米投入试剂A中，于95-100℃下煮6-10min，再加入等量的试剂B，搅拌均匀，获得胚芽米DNA模板，利用SSR标准引物，以所述DNA模板进行PCR扩增。本发明在进行种性验证及辅助田间育种时，具有时效性强、提取步骤简单、化学试剂较少、气味小以及环保的技术效果。

公开(公告)号：CN110724704A

公开(公告)日：2020-01-24

申请号：CN201910984651.1

申请日：2019-10-16

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所

Inventor： 马卉 ,  张秀杰 ,  汪秀峰 ,  焦小雨 ,  许学 ,  李夏莹 ,  吴爽 ,  陈子言 ,  王颢潜 ,  梁晋刚

IPC: C12N15/82 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻转化体鉴定的阳性质粒及其构建方法和应用。所述阳性质粒包括载体骨架和筛选元件，该筛选元件由11个水稻转化体侧翼序列以及2个水稻内标准基因组成，2个水稻内标准基因分别是SPS基因和PLD基因。本发明所构建的阳性质粒能够应用于转基因水稻筛查和检测，包括：将所述的阳性质粒作为转基因水稻检测用的阳性对照质粒或阳性标准品，对待检测的水稻样品进行转基因成分的普通PCR或实时荧光PCR筛查检测，能够准确检测多种转基因水稻，满足转基因水稻安全监管和检测工作的需求，避免了现有检测鉴定过程中针对多个检测靶标需要制备多个阳性对照的问题，具有覆盖面积广、易大量获得、制备简单等特点。

公开(公告)号：CN110229846A

公开(公告)日：2019-09-13

申请号：CN201910538395.3

申请日：2019-06-20

Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所

Inventor： 马卉 ,  汪秀峰 ,  张秀杰 ,  许学 ,  李夏莹 ,  焦小雨 ,  陈子言 ,  赵伟

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了用于转基因水稻筛查的通用阳性标准质粒及其构建方法；所述通用阳性标准质粒包括载体骨架和筛选元件，所述的筛选元件包括CaMV35S启动子、Ubiquitin启动子、NOS终止子、CaMV35S终止子、Bar基因、HPT基因、Bt基因、SPS基因和PLD基因。本发明进一步公开了构建所述通用阳性标准质粒的方法及其在转基因水稻筛查、检测和监测中的应用。在转基因水稻筛查检测时，采用本发明提供的通用阳性标准质粒作为阳性对照品和质控样品可检测多种转基因水稻，具有适用性宽、覆盖面广泛等特点。