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公开(公告)号：CN110106130B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910434957.X
申请日：2019-05-23
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种利用含转氨酶‑辅酶磷酸吡哆醛共固定化大肠杆菌(Escherichia coli，E.coli)工程菌细胞催化合成西他列汀手性中间体(3R)‑3‑氨基‑1‑[3‑(三氟甲基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,2,4‑三唑并[4,3‑a]吡嗪‑7‑基]‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁‑1‑酮的方法。包括含转氨酶大肠杆菌工程菌的培养、共固定化细胞的制备、固定化细胞不对称催化西他列汀手性中间体的合成。本发明方法采用转氨酶‑PLP共固定化细胞为催化剂，稳定性好，使用寿命长，有机溶剂耐受性好，可多次重复利用，并且反应过程中无需昂贵的外源辅酶添加，大幅度降低生产成本。本方法工艺简单，成本低廉，产品产率与纯度高，在西他列汀手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
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公开(公告)号：CN109593749B
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN201811585342.9
申请日：2018-12-24
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种来源于放射形土壤杆菌的卤醇脱卤酶突变体，以及其在制备(S)‑环氧氯丙烷中的应用。所述突变的位点为下列之一：(1)第81位；(2)第86位；(3)第94位。本发明通过卤醇脱卤酶进行改造获得多株突变株，针对1,3‑二氯‑2‑丙醇转化制备(S)‑ECH具有极高的立体选择性。在磷酸盐缓冲体系中，能够催化制备光学纯度(e.e.值)大于99％的(S)‑ECH。该技术具有酶立体选择性优异，反应体系简单，操作过程易于控制，生产成本低，产品光学纯度高等突出优势，具有良好的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN109321490B
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN201811153607.8
申请日：2018-09-30
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一株产气肠杆菌(Enterobacter aerogenesa)ZJB‑17003及其应用，其催化N‑苯乙酰‑DL‑氨基酸制备L‑氨基酸的对映体选择性值达到99％，催化2‑N‑苯乙酰基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]丁酸制备2‑氨基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]丁酸对映体选择性值达到99％。
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公开(公告)号：CN111518789A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010229741.2
申请日：2020-03-27
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组脂肪酶突变体、基因、载体、工程菌及其制备(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯的应用，所述脂肪酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第145位、154位、194位、195位进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高，反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(S,S)‑2,8‑二氮杂双环[4,3,0]壬烷，本发明提供的技术所得产品立体选择性高，反应条件更加温和，对环境友好，且对设备要求降低，大大减少了生产成本。
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公开(公告)号：CN111440785A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN202010126502.4
申请日：2020-02-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法，所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮，制成菌悬液；向菌悬液中添加改性硅藻土，搅拌混匀，加入聚乙烯亚胺，然后再加入戊二醛进行交联，15～35℃搅拌交联0.5～5h后抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤后，粉碎成粒，得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂；本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低，操作简单，机械强度高，制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D-葡萄糖生产D-果糖，在60℃条件下，分批次反应重复使用40批次后，仍具有86％以上的残余酶活力；连续反应603h，时空产率为3.8kg/L/d，平均转化率大于42％，具有良好的工业化应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109321496B
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN201811153829.X
申请日：2018-09-30
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N1/20 , C12P13/04 , C12P41/00 , C12P13/06 , C12P13/08 , C12P13/12 , C12P13/14 , C12P13/20 , C12P13/22 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一株弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)ZJB‑17010及其应用，对催化N‑苯乙酰‑DL‑氨基酸生产L‑氨基酸对映体选择性值达到99％，对催化2‑N‑苯乙酰基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]‑DL‑丁酸制备2‑氨基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]‑L‑丁酸对映体选择性值达到99％。
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公开(公告)号：CN110951706A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201910871261.3
申请日：2019-09-16
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型重组R-ω-转氨酶及其高活力突变体在催化西他列汀前体酮不对称合成西他列汀中的应用。所述重组R-ω-转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第60、113、178、233、146、214或186中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明提供了具有高活性、高立体选择性的新型R-ω-TA突变体，对于实现西他列汀生物催化制备技术的自主化、国产化具有里程碑意义，可以改变目前不对称合成西他列汀过程中出现的酶源单一的技术垄断局面。
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公开(公告)号：CN109395689A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811488627.0
申请日：2018-12-06
Applicant: 浙江工业大学
IPC: B01J19/18 , C07C29/141 , C07C31/18 , C07C31/26 , B01J23/46
Abstract: 本发明涉及一种用于糖醇生产的加氢反应釜，所述反应釜包括釜体、釜盖和电机，所述釜体和釜盖活动连接，所述釜体内壁设有催化剂固定装置，可装载催化剂片层，所述釜体外壁设有加热板，所述釜盖设有进气口、出气口、温度电极、压力表，所述釜体外壁安装有控制器，所述电机、温度电极、加热板均与控制器电性连接。本发明的有益之处在于：该设备结构简单，操作简便，有效提高催化剂利用率，催化剂固载于催化剂内壁，无需分离回收过程，利于产品分离，降低生产成本。
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公开(公告)号：CN109182200A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811153655.7
申请日：2018-09-30
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N1/20 , C12P13/00 , C12P13/06 , C12P13/14 , C12P13/22 , C12P13/08 , C12P13/20 , C12P13/12 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)ZJB-17006及其应用，对催化N-苯乙酰-DL-氨基酸生产L-氨基酸对映体选择性值达到99％，对催化2-N-苯乙酰基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-DL-丁酸制备2-氨基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-L-丁酸对映体选择性值达到99％。
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公开(公告)号：CN107653238A
公开(公告)日：2018-02-02
申请号：CN201710965085.0
申请日：2017-10-17
Applicant: 浙江工业大学
CPC classification number: C12N11/14 , C12P7/62 , C12P13/004
Abstract: 本发明提供了一种利用固定化大肠杆菌(E.coli)工程菌细胞催化合成他汀类药物手性中间体(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯与(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的方法。包括含羰基还原酶大肠杆菌工程菌的培养、固定化细胞的制备、固定化细胞催化新型药物手性中间体(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯与(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁的合成。本发明方法采用固定化生物大肠杆菌工程菌细胞为催化剂，稳定性好，使用寿命长，有机溶剂耐受性好，可多次重复利用，并且无需昂贵的外源辅酶添加，可在有机相反应体系中催化他汀药物中间体的合成，产品产率与纯度高，并可大幅度降低生产成本，简化工艺步骤，减少“三废”排放，在他汀类药物手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
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