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公开(公告)号:CN119913138A
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202510181276.2
申请日:2024-12-19
Applicant: 浙江工业大学 , 江西阿尔法高科药业有限公司
Abstract: 本发明属于生物制药和生物转化领域,具体涉及一种塔格糖‑4‑差向异构酶突变体、编码基因及应用。本发明的塔格糖‑4‑差向异构酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列特定位置的氨基酸残基进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型塔格糖‑4‑差向异构酶在转化制备D‑塔格糖反应时催化活性提高。本发明所得塔格糖‑4‑差向异构酶突变体具有反应条件温和、绿色环保、产物单一、分离纯化简单的优点,大大减少了生产成本。
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公开(公告)号:CN119899823A
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202510311702.X
申请日:2025-01-08
Applicant: 浙江工业大学 , 华东合成生物学产业技术研究院
Abstract: 本发明属于生物制药和生物转化领域,具体涉及一种脂肪酶突变体、编码基因及应用。本发明的脂肪酶CALB突变体是将如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第40位、134位、154位、189位、278位、281位采取单点突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型在催化外消旋3‑环己烯‑1‑甲酸甲酯生产(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸反应时的立体选择性大大提高。相比较于传统化学法制备(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸,本发明提供的脂肪酶CALB突变体立体选择性高,反应条件温和,对环境友好,且对设备要求降低,大大减少了生产成本,在工业化应用中显示出广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN119842854A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202411876145.8
申请日:2024-12-19
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12P33/00 , C12N15/81 , C12N15/53 , C12N15/61 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12N1/19 , C12R1/865 , C12R1/32
Abstract: 一种地屈孕酮关键中间体从头生物合成路线的设计、构建方法及应用,属于地屈孕酮关键中间体合成技术领域。本发明构建了一株可从头合成7‑DHC的重组S.cerevisiae菌株ScBL6,利用其进行500mL摇瓶发酵时,7‑DHC总产量达到214mg/L,相较于对照ScBL2菌株,7‑DHC总产量提升15.24倍。在5L发酵罐中,7‑DHC产量达到1.06g/L,将罐中的菌体进行破碎提取后浓缩至20g/L,最终利用新金分枝杆菌的侧链降解能力,微生物转化72h后,目标产物6‑去氢双降醇的摩尔转化率达到78.54%,产物累积浓度为15.71g/L,144h检测到6‑去氢双降醇的摩尔转化率为83.49%,最终产物浓度达到16.72g/L。
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公开(公告)号:CN119842684A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510106295.9
申请日:2025-01-23
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种固定化蔗糖异构酶及其氨基化碳纳米管共价固定方法,所述方法包括:筛选出核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶;含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的基因工程菌进行发酵培养,获得湿菌体,细胞破碎、离心,得到蔗糖异构酶粗酶液;将氨基化碳纳米管在戊二醛中处理,获得预处理的氨基化碳纳米管;取蔗糖异构酶粗酶液,加入预处理的氨基化碳纳米管,振荡固定,获得固定化蔗糖异构酶。本发明的固定化蔗糖异构酶可用于催化制备异麦芽酮糖,具有较好的活力,pH耐受性和热稳定性好,转化率高,连续反应9个批次,各批次的转化率均大于99%。
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公开(公告)号:CN119842680A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510109037.6
申请日:2025-01-23
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种蔗糖异构酶突变体及其在制备异麦芽酮糖中的应用。本发明通过对来源于Serratia symbiotica的蔗糖异构酶的氨基酸序列进行第149位、第222位、第297位的单点或上述任意多点组合突变,使得得到的蔗糖异构酶突变体用于催化蔗糖制备异麦芽酮糖的催化效率得到提高,具体体现为异麦芽酮糖选择性提升及酶活的提升。在异构化蔗糖生成异麦芽酮糖时,上述突变体对产物异麦芽酮糖的选择性明显提高。同时,上述蔗糖异构酶突变体催化活力也有所提高,因此,上述蔗糖异构酶突变体催化制备异麦芽酮糖效率高,反应时间短。
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公开(公告)号:CN119824023A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202510315726.2
申请日:2025-03-18
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种无诱导剂添加高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及应用。本发明主要通过精细下调支链氨基酸代谢途径的关键基因ilvE、leuA,使工程菌在满足自身生长需求的同时解除支链氨基酸合成对D‑泛酸合成的抑制作用;敲除lacI基因使得工程菌在生产过程中不需要添加诱导剂IPTG,得到一株无诱导剂IPTG添加用于高产D‑泛酸的工程菌株,并对发酵培养基的组分、发酵工艺进行了优化,最终使得D‑泛酸摇瓶效价达到7.23 g/L;运用5‑L发酵罐发酵48~60小时,D‑泛酸产量能够达到90~105 g/L,发酵周期较出发菌株缩短35%~48%,发酵过程中无需添加诱导剂IPTG及其他氨基酸,减少了发酵步骤。
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公开(公告)号:CN119823960A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202411889277.4
申请日:2024-12-20
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种转氨酶突变体及其在不对称合成L‑草铵膦中的应用,所述转氨酶突变体将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第13、17、19或22位氨基酸经单点饱和突变或迭代饱和突变获得的。本发明提供了一种来源于沙门氏菌新的高活力转氨酶突变体,相对于突变前,不同突变体全细胞相对酶活力达到250.1%~397.9%。
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公开(公告)号:CN114369601B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202210143597.X
申请日:2022-02-17
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种潜在的药物靶标蛋白PPTase及其编码基因在制备防治植物赤霉病的药物中的应用。实验发现,在藤仓赤霉菌中敲除ppt1基因后,赤霉素中GA3、GA4、GA7的产量均有大幅下降;同时,该敲除菌在PDA、MM、SM等培养基上的生长能力大幅下降。因此,针对该位点设计蛋白为靶标的抑制剂药物可以防治植物的真菌中赤霉素产生生产菌引发的病害,为防治抗植物赤霉病的真菌药物筛选提供了新的途径。
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公开(公告)号:CN119265094A
公开(公告)日:2025-01-07
申请号:CN202411419214.2
申请日:2024-10-12
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种产鼠李糖脂的基因工程菌、构建方法及应用,所述基因工程菌包括底盘菌和导入底盘菌中满足自我复制的重组质粒;所述底盘菌为恶臭假单胞菌rhlAB‑rmlBDAC‑△flag;所述重组质粒包含铜绿假单胞菌的rhlAB基因以及恶臭假单胞菌基因组中的accA基因、accBC基因、accD基因、fabD基因中的一种或两种以上的任意组合。本发明通过在恶臭假单胞菌rhlAB‑rmlBDAC‑△flag的基础上通过异源过表达来自铜绿假单胞菌的鼠李糖基转移酶亚基A基因rhlA和鼠李糖基转移酶亚基B基因rhlB;同时过表达鼠李糖脂合成途径中的前体物质3‑羟基链烷酰基‑3‑羟基链烷酸酯(HAA)合成的相关酶即乙酰辅酶A羧基转移酶基因accA、accBC、accD以及酰基载体蛋白转酰化酶基因fabD,使得鼠李糖脂产量进一步提高。
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公开(公告)号:CN119193447A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411401080.1
申请日:2024-10-09
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及微生物代谢工程技术领域,尤其涉及一种无营养缺陷生产O‑乙酰‑L‑高丝氨酸的基因工程菌及其构建方法和应用。一种无营养缺陷O‑乙酰‑L‑高丝氨酸的基因工程菌,在底盘菌株Escherichia coli W3110中敲除苏氨酸外排蛋白编码基因rhtC,敲除苏氨酸脱氢酶编码基因tdcB,敲除苏氨酸3‑脱氢酶编码基因tdh,回补由苏氨酸浓度动态调控的高丝氨酸激酶编码基因thrB,即得所述无营养缺陷O‑乙酰‑L‑高丝氨酸的基因工程菌。该重组大肠杆菌为无营养缺陷型菌株,不需要额外添加氨基酸,极大地降低了成本和提升了产量,具有重要的工业应用价值。
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