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公开(公告)号：CN102071231A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN201010567804.1
申请日：2010-11-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江九洲药业股份有限公司
IPC: C12P17/14
Abstract: 本发明公开了一种微生物转化制备S-(+)-3-羟基四氢呋喃的方法：在pH 5.0～8.0的磷酸盐缓冲液中，以3-酮基四氢呋喃为底物、以酿酒酵母CGMCC No.2266发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，于25～45℃下转化反应8～40小时，反应结束后，转化液经分离纯化得到所述S-(+)-3-羟基四氢呋喃；本发明有益效果主要体现在：(1)生产菌株安全无毒，易于大规模培养，成本低廉；(2)操作简便，反应过程中不需要添加价格昂贵的辅酶，收率高；(3)易于实现大规模工业化生产；(4)反应条件温和，环境友好。
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公开(公告)号：CN101230319B
公开(公告)日：2010-06-02
申请号：CN200810059686.6
申请日：2008-02-04
Applicant: 浙江工业大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明提供了一株微生物新菌株酿酒酵母CGMCCNo.2266及其在微生物转化制备(S)-(-)-β-羟基苯丙酸乙酯中的应用。酿酒酵母CGMCC No.2266，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCCNo.2266，保藏日期2007年11月26日。本发明提供了一株可供生物转化β-羟基苯丙酸乙酯为(S)-(-)-β-羟基苯丙酸乙酯的新菌株，利用本发明方法生产的(S)-(-)-β-羟基苯丙酸乙酯对映体过剩值大于99.0％，底物摩尔转化率可以达到92.2％，产品纯度达到99.8％，硅胶柱层析产物提取收率为95.6％，固定化细胞颗粒可以重复利用10次。
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公开(公告)号：CN101230319A
公开(公告)日：2008-07-30
申请号：CN200810059686.6
申请日：2008-02-04
Applicant: 浙江工业大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明提供了一株微生物新菌株酿酒酵母CGMCC No.2266及其在微生物转化制备(S)－(－)－β－羟基苯丙酸乙酯中的应用。酿酒酵母CGMCC No.2266，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区大屯路中科院微生物研究所，保藏编号CGMCCNo.2266，保藏日期2007年11月26日。本发明提供了一株可供生物转化β－羟基苯丙酸乙酯为(S)－(－)－β－羟基苯丙酸乙酯的新菌株，利用本发明方法生产的(S)－(－)－β－羟基苯丙酸乙酯对映体过剩值大于99.0％，底物摩尔转化率可以达到92.2％，产品纯度达到99.8％，硅胶柱层析产物提取收率为95.6％，固定化细胞颗粒可以重复利用10次。
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公开(公告)号：CN114250216B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202111586604.5
申请日：2021-12-23
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种纳豆激酶的分离纯化方法，将纳豆激酶粗品用缓冲液溶解后过滤，滤液作为上样液进行DEAE‑Sephadex A‑50阴离子交换柱层析；上样结束后，先以0.1M、pH7.4的磷酸缓冲液进行洗脱，洗脱速度10 s/滴，采用色谱工作站监测流出液，出峰前按每10min/管收集，出峰处每个峰收集，洗脱至流出液不出峰；合并含有纳豆激酶蛋白和酶活的流出液，超滤，滤液冻干，即为纳豆激酶纯酶。本发明方法简化了纯化步骤，降低了纯化过程中酶的损失，大幅缩减纯化所需时间和成本，电泳纯纳豆激酶，比活达到了63140.83 U/mg，纯化倍数为2.22，酶活回收率为57.96%。
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公开(公告)号：CN117417867A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311417495.3
申请日：2023-10-30
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/04 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZJUT16及其应用，通过底物富集培养策略从土壤中筛选获得一种具有硝基类化合物(特别是间硝基苯乙酮)还原反应能力的阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)菌属菌株ZJUT16。其所含的硝基还原酶EcNTR可用于还原硝基类化合物制备芳香胺，特别用于转化间硝基苯乙酮制备苯肾上腺素药物、抗肿瘤药物及镇静催眠药合成中的重要中间体间氨基苯乙酮。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116121216A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211427627.6
申请日：2022-11-15
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的融合酶、编码基因、工程菌及应用，本发明实现了羰基还原酶(SRED)和葡萄糖脱氢酶(GDH)的融合表达，节约了发酵成本，降低了发酵废液的产生量，对环境友好。融合表达不影响羰基还原酶的光学选择性，大幅降低了反应中所使用的辅酶因子，节约了反应成本。该羰基还原酶有广泛的底物谱和良好的立体选择性，用本发明方法制备所得的含羰基还原酶SRED和葡萄糖脱氢酶GDH的重组酶具有对环境友好、操作简单、反应条件温和等优点，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115851641A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210812762.6
申请日：2022-07-11
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供一种羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的融合酶，所述羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的融合酶包括依次连接的葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列和羰基还原酶的氨基酸序列。本发明构建含羰基还原酶CpCR和含葡糖糖脱氢酶GDH的融合酶应用于催化还原OPBE；葡萄糖脱氢酶的表达提高了NADPH的再生效率，为生物催化反应提供了充足的NADPH，该辅酶NADPH再生系统的应用避免了生物催化反应中额外添加昂贵的辅酶。且该羰基还原酶CpCR具有广泛的底物谱和优良的光学选择性。
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公开(公告)号：CN115820622A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211632851.9
申请日：2022-12-19
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种双酶自组装复合物及合成(R)‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸乙酯的应用，所述双酶自组装复合物是将重组蛋白SpyCatcher‑CpCR的纯酶水溶液和重组蛋白SpyTag‑GDH的纯酶水溶液混合后，在0‑25℃环境下孵育1‑24h，间隔半小时轻轻晃动，冷冻干燥，获得双酶自组装复合物。本发明双酶自组装复合物的转化率是游离酶的1.6倍，本发明方法具有对环境友好、操作简便、易于工业放大等优势作用，实现SpyCatcher‑CpCR和SpyTag‑GDH自组装，产生高效的辅酶再生系统，提高了NADPH的再生效率，为生物催化反应提供了充足的NADPH，从而加强酶的级联作用和催化效率。
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公开(公告)号：CN110938620B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201911135011.X
申请日：2019-11-19
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种磁性固定化酵母细胞及其在(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯合成中的应用，所述磁性固定化酵母细胞是将Fe3O4磁性颗粒与氨基酸水溶液超声分散后，使用外加磁场回收沉淀，沉淀洗涤后冻干，获得氨基酸修饰磁性纳米粒子；然后将氨基酸修饰磁性纳米粒子与酵母细胞冻干粉、磷酸缓冲盐溶液振荡混匀，获得磁性固定化酵母细胞。本发明无需振荡和搅拌促进传质，显著缩短反应时间，极大提高了COBE转化效率，磁性固定化细胞可以重复利用多次。在交变磁场中重复使用13次后转化率仍有99.8％，相比在摇床中，重复利用次数得到了提高。
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公开(公告)号：CN109593804B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201811584631.7
申请日：2018-12-24
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种酶催化快速合成硝基苯并咪唑类衍生物的方法，所述方法为：以物质的量之比为1:1～5的6‑硝基苯并咪唑与丙烯酸脂类化合物为原料，以脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂，以DMSO溶剂为反应溶剂，将脂肪酶Lipozyme RM IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中，所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8～2.4mm，反应通道长为0.5～1.0m；使原料和反应溶剂连续通入反应通道中进行Michael加成反应，控制Michael加成反应温度为40～55℃，Michael加成反应时间为25～40min，在线收集反应液，反应液经常规后处理得到硝基苯并咪唑类衍生物。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
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