公开(公告)号：CN117417867A

公开(公告)日：2024-01-19

申请号：CN202311417495.3

申请日：2023-10-30

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  王娜娜 ,  刘美 ,  邓立霞 ,  王延妮 ,  戴艳梅 ,  陶紫娟 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/01 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZJUT16及其应用，通过底物富集培养策略从土壤中筛选获得一种具有硝基类化合物(特别是间硝基苯乙酮)还原反应能力的阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)菌属菌株ZJUT16。其所含的硝基还原酶EcNTR可用于还原硝基类化合物制备芳香胺，特别用于转化间硝基苯乙酮制备苯肾上腺素药物、抗肿瘤药物及镇静催眠药合成中的重要中间体间氨基苯乙酮。

公开(公告)号：CN117343948A

公开(公告)日：2024-01-05

申请号：CN202311417492.X

申请日：2023-10-30

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  王娜娜 ,  刘美 ,  邓立霞 ,  王延妮 ,  戴艳梅 ,  陶紫娟 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N9/04 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种硝基还原酶EcNTR的重组表达质粒及其应用，通过PCR扩增等基因工程手段从Enterobacter cloacae菌株获得硝基还原酶EcNTR基因，将之构建为pET28a(+)‑EcNTR重组质粒，进一步构建E.coli BL21(DE3)‑pET28a(+)‑EcNTR重组工程菌，并用于还原硝基类化合物制备芳香胺，特别用于转化间硝基苯乙酮制备苯肾上腺素药物、抗肿瘤药物及镇静催眠药合成中的重要中间体间氨基苯乙酮。该硝基还原酶EcNTR具有广泛的底物谱，可催化多种硝基化合物的还原反应。

公开(公告)号：CN117904097A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202410071694.1

申请日：2024-01-18

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  邓立霞 ,  王娜娜 ,  刘美 ,  王延妮 ,  柳博 ,  陶紫娟 ,  戴艳梅 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽 ,  唐岚 ,  杜理华

IPC: C12N11/18 ,  C12N11/098 ,  C12N9/10 ,  C12N9/04 ,  C07K19/00 ,  C12P41/00 ,  C12P13/00

Abstract: 本发明公开了一种自组装蛋白支架共固定化酶及其应用，所述自组装蛋白支架共固定化酶采用EutM‑SpyCatcher/SpyTag体系固定R‑ω‑转氨酶和乙醇脱氢酶得到；在体外构建固定化多酶催化体系，实现ATTA、ADH双酶共固定化形成级联反应，产生高效的辅酶再生系统，提高了NADPH的再生效率，为生物催化反应提供了充足的NADPH，从而加强酶的级联作用和催化效率；同时蛋白支架也为胺化反应提供了良好的环境，提高了酶的热稳定性。

公开(公告)号：CN118546918A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410621319.X

申请日：2024-05-20

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  刘美 ,  邓立霞 ,  王娜娜 ,  王延妮 ,  戴艳梅 ,  陶紫娟 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽

IPC: C12N11/02 ,  C12N11/18 ,  C12N9/04 ,  C12N15/70 ,  C12P7/6409

Abstract: 本发明公开一种以EutM为蛋白支架的双酶自组装体及其构建方法与应用，以来源于CnaB2结构域的SpyCatcher/SpyTag体系，其在多种条件下均能自发形成稳定的异肽键，将羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶共固定在蛋白支架EutM上，形成双酶自组装复合物EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)，并发现了EutM与SpyCatcher中融合的Linker2对双酶自组装复合物EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)组装，酶活和催化效率产生有利影响。本发明在优化后得到最佳组装体EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)后并应用于(R)‑6‑羟基‑8‑氯辛酸乙酯的生产。

公开(公告)号：CN117757826A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311851386.2

申请日：2023-12-29

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  王延妮 ,  邓立霞 ,  王娜娜 ,  刘美 ,  陶紫娟 ,  戴艳梅 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽 ,  唐岚 ,  杜理华

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12P7/62 ,  C12N1/20 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一种短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用，所述应用为以所述重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体或所述湿菌体经超声破碎、分离纯化提取的短链脱氢酶纯酶为催化剂在不对称还原羰基类化合物制备醇类化合物中的应用，尤其是在不对称还原4‑氯乙酰乙酸乙酯制备(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯中的应用。该催化剂具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。

公开(公告)号：CN119913119A

公开(公告)日：2025-05-02

申请号：CN202510056368.8

申请日：2025-01-14

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  陶紫娟 ,  戴艳梅 ,  黄长顺 ,  罗亮丽 ,  张清宇 ,  乐俊浩 ,  岳晶娥

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种类固醇脱氢酶突变体及其在制备甾体类药物中的应用，本发明通过筛选类固醇脱氢酶突变体提高酶活，由原来的54.3U/mg湿菌体提升至67.7U/mg湿菌体。本发明将类固醇脱氢酶突变体与过氧化氢酶通过连接肽连接构成融合蛋白后表达用于催化AD制备ADD，不仅提高了底物转化率，底物转化率高达98.6％，而且解决了反应过程中过氧化氢对湿菌体细胞的毒害问题，降低生产成本，具有良好的工业应用前景。

公开(公告)号：CN117757690A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311851393.2

申请日：2023-12-29

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 欧志敏 ,  王延妮 ,  邓立霞 ,  王娜娜 ,  刘美 ,  陶紫娟 ,  戴艳梅 ,  张清宇 ,  黄长顺 ,  罗亮丽 ,  唐岚 ,  杜理华

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/62 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/01 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)WZ‑5及其应用，本发明通过底物富集培养策略从土壤中筛选获得一种具有高效催化COBE还原反应的Burkholderia cepacia菌属菌株，所述洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)WZ‑5保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO:28566，其含有的醇脱氢酶BcSDR4具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。