双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株及其构建方法

    公开(公告)号:CN101139567A

    公开(公告)日:2008-03-12

    申请号:CN200710025604.1

    申请日:2007-08-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种将野生型产单核细胞李斯特菌毒力基因缺失的构建方法。本发明将扩增出待删除基因两翼的同源片段actA、plcB后,利用SOEing PCR方法将其拼接,插入穿梭载体pKSV7中,经电转化导入产单核细胞李斯特菌,得到actA、pclB双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株(Listeriamonocytogenes yzu LM1-2),保藏号CCTCC NO:M206107。解决了产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称LM)人兽共患病的病原,死亡率高及对食品的污染与危害等。本发明删除了actA和plcB基因,从而实现对野生型菌株yzuLM4的减毒。

    一种鸡特异性的CpG ODN及其应用

    公开(公告)号:CN100336823C

    公开(公告)日:2007-09-12

    申请号:CN200610038448.8

    申请日:2006-02-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种CpG DNA,特别是涉及用作鸡特异性的CpG ODN,以及这种CpG ODN在制备作为H5亚型禽流感DNA疫苗佐剂中的用途。该CpG ODN序列具体为5’-TTGGAACGTTCCTTTCCAACGTTGGTTTGGAACGTTCCTT-3’,嵌合了本发明CpG ODN为佐剂的H5亚型禽流感DNA疫苗,通过口服、滴鼻途径对鸡直接进行免疫,可显著增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫后的攻毒保护率,提高免疫家禽的肠粘膜IgA抗体水平;且本发明中构建的DNA疫苗具有安全、免疫后不干扰禽流感疫情的监测、可克服母源抗体的干扰及使用方便等优点。

    禽流感病毒多重PCR检测方法

    公开(公告)号:CN1243108C

    公开(公告)日:2006-02-22

    申请号:CN200410014289.9

    申请日:2004-03-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定病毒,特别是鉴定禽流感H5、H9亚型病毒的检测方法。用Trizol kit提取样本基因RNA,再进行反转录合成cDNA,然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因,最后电泳鉴定。由于单个疑似病例样本中的特征基因数量极少,本发明通过将样本的RNA反转录合成cDNA,再一次性同时对可能存在的NP、H5A、H9A基因扩增,形成大量的基因复制片段,比较方便,一次就能鉴定是否为禽流感,以及属于H5或H9亚型作出判断。本发明较经典方法的病毒分离、鉴定和血清学分型试验方法快速、准确。

    检测tet(X)阳性可变不动杆菌的特异性引物及其应用

    公开(公告)号:CN118703656B

    公开(公告)日:2024-12-24

    申请号:CN202410945796.1

    申请日:2024-07-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测tet(X)阳性可变不动杆菌的特异性引物及其应用,本发明的tet(X)阳性可变不动杆菌检测引物由variabilis‑3635F/variabilis‑3635R和mono‑F/mono‑R两对引物组成,使用上述引物进行PCR扩增,经1.2%琼脂糖凝胶电泳分别呈现出620bp与240bp两条清晰条带,且测序比对无误。对tet(X)阳性可变不动杆菌基因组和菌悬液的检出率均为100%,最低DNA检测限为0.08ng/μL,并且整个菌液检测过程仅用时3h。本发明提供的tet(X)阳性可变不动杆菌检测方法操作简单、灵敏度高、准确度高且耗时短。

    检测tet(X)阳性可变不动杆菌的特异性引物及其应用

    公开(公告)号:CN118703656A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202410945796.1

    申请日:2024-07-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测tet(X)阳性可变不动杆菌的特异性引物及其应用,本发明的tet(X)阳性可变不动杆菌检测引物由variabilis‑3635F/variabilis‑3635R和mono‑F/mono‑R两对引物组成,使用上述引物进行PCR扩增,经1.2%琼脂糖凝胶电泳分别呈现出620bp与240bp两条清晰条带,且测序比对无误。对tet(X)阳性可变不动杆菌基因组和菌悬液的检出率均为100%,最低DNA检测限为0.08ng/μL,并且整个菌液检测过程仅用时3h。本发明提供的tet(X)阳性可变不动杆菌检测方法操作简单、灵敏度高、准确度高且耗时短。

    检测tet(X)阳性印度不动杆菌的特异性引物及其方法和应用

    公开(公告)号:CN118685545A

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202410945800.4

    申请日:2024-07-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测tet(X)阳性印度不动杆菌的特异性引物及其方法和应用,该引物由两对引物indicus‑6F/indicus‑6R和universe‑AXF3/universe‑AXR3组成。其PCR扩增产物的电泳条带清晰,测序结果比对无误,引物indicus‑6F/indicus‑6R的扩增产物大小为313bp,引物universe‑AXF3/universe‑AXR3的扩增产物大小为729bp,最适扩增退火温度为50℃,最低DNA检测限为0.012ng/μL,基于基因组DNA和菌液的检测准确度均为100%,使用菌液进行检测的总耗时6h。本发明的tet(X)阳性印度不动杆菌检测方法具有操作便捷、灵敏度高、准确度高和耗时短等特点,应用前景广阔。

    不动杆菌LDH6-2及其在降解四环素类抗生素中的应用

    公开(公告)号:CN117701440A

    公开(公告)日:2024-03-15

    申请号:CN202311730316.1

    申请日:2023-12-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株不动杆菌LDH6‑2及其在降解四环素类抗生素中的应用。所述的LDH6‑2菌株于2023年11月23日保藏在广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC NO:64034。本发明的不动杆菌LDH6‑2在基因组水平不同于其他报道的菌株,是一种新型不动杆菌菌种,其具有四环素类抗生素降解能力,能够在24 h内显著降解四环素、米诺环素和替加环素,并且对最新上市的伊拉瓦环素降解率达到(75.8±2.9)%,在水体及土壤环境中残余的四环素类抗生素降解方面具有良好的应用前景。

    一种免疫磁珠及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN115112881A

    公开(公告)日:2022-09-27

    申请号:CN202210438260.1

    申请日:2022-04-01

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠及其制备方法与应用,该免疫磁珠是将ActA单克隆抗体3G11和羧基磁珠共价偶联制得。可利用该免疫磁珠制得试剂盒。通过利用免疫磁珠或试剂盒可以快速、高效的检出单核细胞增生李特菌,具有特异性好、检测速度快、操作简便和结果可靠等优点,适用于多种来源样品的检测,为实现单核细胞增生李斯特菌的快速检测提供了前提条件,可以广泛应用于生活及临床检测中。

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