公开(公告)号：CN113583900B

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202110820845.5

申请日：2021-07-20

Applicant: 山东大学

Inventor： 卞小莹 ,  刘嘉琪 ,  张友明

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C07K14/195 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一组伯克氏菌基因组合理简约化突变株与一组基因组合理简约化伯克氏菌底盘菌株及其构建方法和其在β‑变形菌纲来源的天然产物的高效异源表达中的应用。其中所述基因组合理简约化的突变株是DT8，DT9和DT10，是连续删除转座酶、前噬菌体、基因组岛等细胞生长非必需基因，并在此基础上继续删除在该菌中本底表达的生物合成基因簇后获得。同时本发明通过在DT8，DT9和DT10基因组上定点插入phiC31attB位点构建了一组基因组合理简约化的伯克氏菌底盘菌株DT8‑attB，DT9‑attB和DT10‑attB，并实现了将所述底盘菌株应用于β‑变形菌纲中天然产物如埃博霉素的产量优化及隐秘生物合成基因簇的高效异源表达。有力扩展了革兰阴性菌异源宿主底盘菌，促进了细菌中新型天然产物的挖掘。

公开(公告)号：CN118638836A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202410716418.6

申请日：2024-06-04

Applicant: 山东大学

Inventor： 颜富 ,  徐佳欣 ,  韩丽媛 ,  张友明

IPC: C12N15/76 ,  C07K14/36 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/55 ,  C12R1/465 ,  C12R1/61 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提出了一种提高外源DNA导入细菌的效率的系统及其应用，属于微生物技术领域。本发明，通过在受体菌(链霉菌)中合成磷壁酸提高外源DNA导入受体菌的效率；同时提供了一种在链霉菌中表达外源基因的系统，其包括能够完成目的之一的质粒或重组菌。本发明所提供的方法或系统，大幅提高了外源DNA导入链霉菌的效率；利用该方法大大降低了对非模式菌和药物工业生产菌等难遗传操作细菌的改造难度，有利于对细菌基因组的改造以及活性代谢产物和生物学元件的挖掘。

公开(公告)号：CN117286166A

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202311234553.9

申请日：2023-09-22

Applicant: 山东大学

Inventor： 王雪 ,  王宇璇 ,  郑文韬 ,  卞小莹 ,  涂强 ,  张友明

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种细菌基因组多重编辑方法及其应用。本发明实际提供一种基于改进的dReaMGE重组工程和线性CRISPR‑Cas系统的多重基因组编辑方法经试验证明，其显著提高了在诸如大肠杆菌和伯克氏菌细胞中介导的dsDNA重组工程效率。同时，上述Real‑MGE方法有效消除了对复杂的多gRNA表达载体的需求，减少了细菌基因组工程所需的时间，避免了脱靶效应和细胞毒性，本发明建立ReaL‑MGE技术是探测基因型与表型关系，增强化学生产和菌株优化的潜在且便捷的工具，是对当前基因组工程技术的理想补充，因此具有良好的实际应用之价值。

公开(公告)号：CN114478430B

公开(公告)日：2023-11-28

申请号：CN202210159632.7

申请日：2022-02-21

Applicant: 山东大学

Inventor： 卞小莹 ,  申琪瑶 ,  周海波 ,  张友明

IPC: C07D277/56 ,  C12P17/16 ,  C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N15/52 ,  A61P3/10 ,  A61P3/04 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一组芽孢噻唑类化合物，是命名为芽孢噻唑A‑N的14种化合物1‑14，其化学构式依次如式Ⅰ至式ⅩⅩ所示；该化合物是由枯草芽孢杆菌1A751‑Sfp/nrs突变菌株(Bacillus subtilis 1A751‑Sfp/nrs)经过液体发酵后，从其发酵产物中得到。本发明还公开了所述化合物在制备蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)抑制剂中的应用，实验证实本发明提供的芽孢噻唑A‑E(1‑5)对蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)有较强的选择性抑制活性，PTP1B已成为治疗Ⅱ型糖尿病和肥胖症的极具吸引力的靶点，本发明的化合物有望在糖尿病和肥胖症治疗方面提供新的应用途径。

公开(公告)号：CN115947774A

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202211121904.0

申请日：2022-09-15

Applicant: 山东大学

Inventor： 李瑞娟 ,  宋超逸 ,  王茂芹 ,  宫恺 ,  张友明 ,  符军 ,  李爱英

IPC: C07K5/027 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P17/18 ,  A61K38/06 ,  A61P35/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种Spiruchostatin衍生物，为聚酮‑非核糖体多肽杂合化合物，是式(I)所示化学结构的化合物1，命名为SpiruchostatinE。该化合物是由伯克氏菌突变菌株BurkholderiathailandensisE264Δtdp::R‑tdp‑M4spi经过培养和液体发酵，从其发酵液中分离获得的。本发明还公开了所述Spiruchostatin衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。实验证实：所述伯克氏菌突变菌株产化合物1的产量达到了270mg/L；且化合物1能够明显抑制肿瘤细胞的生长，其抑制活性显著高于FK228。提示本发明提供的化合物有望增益其在抗肿瘤治疗中的应用价值，为新型抗肿瘤药物的开发和应用提供了新的备选化合物，具有显著的经济价值和社会效益。

公开(公告)号：CN114774133A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210377001.2

申请日：2022-04-09

Applicant: 山东大学

Inventor： 王宇璇 ,  韩昌 ,  庞琳琳 ,  倪海平 ,  涂强 ,  卞小莹 ,  张友明

IPC: C09K17/40 ,  C12N1/20 ,  C05G3/80 ,  C12R1/39 ,  C09K101/00 ,  C09K109/00

Abstract: 本发明提供了一种改善土壤盐碱化的微生物菌剂，由以下重量份的组分组成：65～70份的荧光假单胞菌zym‑ch0或其培养物，10‑20份过磷酸钙、5～10份的聚谷氨酸，1‑5份海藻糖，1～3份的氨基酸粉，0.1～0.3份的聚丙烯酰胺，其中，荧光假单胞菌zym‑ch0或其培养物中有效活菌数为2×108～1×109/ml。本发明可以有效改造盐碱化土壤，增加耕作面积。

公开(公告)号：CN114591933A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202210343406.4

申请日：2019-05-24

Applicant: 山东大学

Inventor： 张友明 ,  王晓彤 ,  宋超逸 ,  霍刘杰 ,  李爱英

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，涉及一种酶的突变体及其应用。一种PET降解酶突变体，所述的突变体是PET降解酶7029PETase上第132位氨基酸由色氨酸突变为组氨酸形成的，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；PET降解酶7029PETase的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。本发明的PET降解酶及其突变体，能够在常温下降解PET酶，与现有的PET降解酶相比，对商业化PET塑料及其单体BHET的降解速率有了一定的提高，具有良好的工业前景。

公开(公告)号：CN113817785A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202110932368.1

申请日：2021-08-13

Applicant: 山东大学

Inventor： 钟冠男 ,  卞小莹 ,  张友明 ,  庞琳琳

IPC: C12P13/04 ,  C12N9/06

Abstract: 本发明属于化合物合成技术领域，具体涉及由生物酶催化的化合物合成方法及催化该化学合成的酶。一种合成(S)‑6‑硝基正亮氨酸的方法，其合成方程式为：本发明提供的合成(S)‑6‑硝基正亮氨酸的方法使用生物酶作为催化剂，以天然氨基酸为原料，一步生成目标化合物，缩减反应步骤；该反应使用水作为反应溶剂，避免有机溶剂的使用，后处理过程相对比较简单，酶催化剂可以通过生物降解，对环境污染小；避免使用有毒有害、高度活泼的化学试剂，在中性pH值和室温下即可发生反应，避免了有机化学反应中苛刻的反应条件，因此更加安全。

公开(公告)号：CN108085327B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN201711459372.0

申请日：2017-12-28

Applicant: 山东大学

Inventor： 李爱英 ,  吕金 ,  徐京华 ,  张友明 ,  李瑞娟 ,  李彩云

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/52 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种异源表达极端环境来源的碱性蛋白酶AP1的工程菌，该菌株命名为E.coli BL21(DE3)/pHSL‑AP1，是利用E.coli BL21(DE3)为出发菌株，通过电转化在其细胞内导入由pET28a(+)质粒携带的ap1‑HSL10基因获得。本发明还公开了该工程菌在表达碱性蛋白酶AP1中的应用。实验证实：本发明提供的工程菌株在表达蛋白酶AP1时，SYN培养基中添加1％的葡萄糖对于高效表达蛋白酶基因尤为重要，其应用有望为规模化生产碱性蛋白酶提供试验和理论基础，在工业应用开发上具有重要价值。

公开(公告)号：CN108048472B

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN201711363593.8

申请日：2017-12-18

Applicant: 山东大学

Inventor： 张友明 ,  李瑞娟 ,  高运生 ,  涂强 ,  王宗杰

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/74 ,  C12P17/18 ,  C12N9/02 ,  C12N9/04 ,  C12N9/88 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60

Abstract: 本发明公开了一种Disorazole Z的生物合成基因簇dis427，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了利用所述dis427基因簇构建的高效异源表达Disorazole Z的工程菌株DK1622:Km‑Ptet‑dis427，是利用黄色粘球菌Myxococcus xanthus DK1622为出发菌株，通过转座的方法在其基因组上整合了Disorazole Z的生物合成基因簇dis427获得。本发明还公开了工程菌株DK1622:Km‑Ptet‑dis427在制备Disorazole Z中的应用。本发明所提供的Disorazole Z生物合成途径及其在异源宿主中的高效表达方法为开发新的抗肿瘤或抗感染药物、降低发酵生产成本具有重要的研究和应用价值。