基于滚环扩增比色检测靶核酸或蛋白的方法

    公开(公告)号:CN102586450B

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201210057638.X

    申请日:2012-03-06

    Abstract: 本发明涉及一种基于滚环扩增比色检测靶核酸或蛋白的方法,该方法主要利用核酸之间的杂交反应以及抗原抗体结合将所要检测的靶核酸或蛋白间接固定于磁珠上,加入滚环成分,通过杂交上的滚环引物进行恒温滚环扩增,最终通过纳米金的颜色反应检测恒温扩增的大分子产物,以达到相对检测靶核酸及蛋白的目的。该方法通过滚环扩增与纳米金颜色反应的结合,既实现了对微量样品信号的大量扩增,又实现了结果的快速直观检测,避免了PCR仪等昂贵仪器的使用,降低了对实验硬件条件的要求。可望应用于床边快速诊断以及食品安全以及环境中微生物的现场快速检测。

    一种用于微量蛋白检测的微芯片的制备方法

    公开(公告)号:CN103278643A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310182719.7

    申请日:2013-05-16

    Abstract: 本发明涉及一种用于微量蛋白检测的微芯片的制备方法,包括:以硅片为基底材料,以SU-8光刻胶作为掩模层,分别曝光、显影制作模具A和模具B;将PDMS和固化剂混合后,分别浇注在模具A和模具B上,加热固化;分别剥离A-PDMS、B-PDMS;A-PDMS打孔后,与经过处理的玻璃片贴合;将A-PDMS揭掉后,将固定有抗体的玻璃片与B-PDMS对准贴合,并取另一经打孔的玻璃片贴合在B-PDMS的另一面,即得微芯片。本发明的微芯片将全血中血浆的分离、检测连接为一体,可以一次针对多个靶目标的检测,具有特异、快速和高灵敏的特点,可望应用于临床中微量全血中多种蛋白的诊断和检测。

    一种纳米金生物复合探针、检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN101545007B

    公开(公告)日:2013-06-26

    申请号:CN200910050299.0

    申请日:2009-04-30

    Abstract: 本发明是一种纳米金生物复合探针、检测方法及其应用,其特征在于首先用待测蛋白质的单克隆抗体标记磁珠,再在纳米金上标记待测蛋白的多克隆抗体的同时还标记一种带有生物素标记的DNA探针,纳米金上的DNA探针再通过生物素-链霉亲和素反应,使镧系元素接到胶体金上构建成纳米金生物复合探针,将标记好待测蛋白质单克隆抗体的磁珠及纳米金生物复合探针与待测蛋白质样品混合,37℃孵育一段时间,洗去没有反应的纳米金探针,加入增强液,测定荧光强度,从而达到对待测蛋白质进行定量测定的目的。使用本发明的方法,可显著提高生物分子的检测灵敏度,且可同时检测多种生物分子。可广泛应用于临床诊断、抗原、抗体、核酸的检测、卫生检疫、环境检测等领域。

    一种基于相替换触发的毛细微阀及其应用

    公开(公告)号:CN101968131B

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201010289621.8

    申请日:2010-09-21

    Inventor: 李刚 陈强 赵建龙

    Abstract: 本发明公开了一种基于相替换触发的毛细微阀及其应用,所述微阀为一种单向被动阀,由进样微管道上一段横截面突变的微管道或微腔体和一条与其相连的油相填充微管道构成。当水相样品流经管道横截面突变处时,表面张力作用其前端水相/气相界面的曲率发生变化,导致水相流体所受反向压强增加,当此反向压强与水相样品驱动压达到平衡时,即可实现对水相样品的控制限流作用,发挥阀的关闭功能;若通过油相填充管道导入油样,以油相替代处于限流平衡状态水相样品前界面的气相,则水相前界面的表面张力将降低,从而降低水相前界面所受反向压力,实现阀的开启功能。提供的毛细微阀,可应用于微生化反应器和芯片实验室。

    一种电阻抗式细菌快速检测传感器的数据分析方法

    公开(公告)号:CN102954985A

    公开(公告)日:2013-03-06

    申请号:CN201110254076.3

    申请日:2011-08-31

    Abstract: 本发明涉及一种电阻抗式细菌快速检测传感器的数据分析方法。该传感器基于电阻抗法原理,采用MEMS技术,设计并制造了叉指式电极用于细菌的快速测定。将叉指式电极采集到的阻抗和相位信号进行处理,获得Nyquist曲线。而Nyquist曲线的斜率对细菌的数量进行了良好的表征。在细菌生长过程中Nyquist曲线的斜率变化近似呈线性关系,以此建立此参数值与样品中原始菌量的关系,用于细菌种类及细菌数量的测定。该数据分析方法降低了对测试电极以及测量环境的要求,并缩短了细菌测定所需要的时间,可用于微生物的快速检测中。

    基于SU-8厚光刻胶的三维圆滑曲面微结构的制作方法

    公开(公告)号:CN101950126B

    公开(公告)日:2012-08-29

    申请号:CN201010275953.0

    申请日:2010-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种基于SU-8厚光刻胶的三维圆滑曲面微结构的制作方法,其特征在于所述的方法以聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)压模技术结合未交联SU-8光刻胶的回流特性制作具有圆滑曲面特征的微结构。首先通过光刻工艺制作SU-8原模,并以此原模浇注PDMS形成母模,然后利用压模技术将此PDMS母模转制成SU-8阳模,剥离PDMS模具后,将此未经曝光交联反应的SU-8阳模置于高温(55℃~120℃)环境下回流,形成具有圆滑曲面特征的三维微结构。本发明提出的圆滑曲面微结构的制作方法相对于传统的灰阶掩膜技术、发散光曝光技术和正性光刻胶回流方法,具有加工简便、成本低廉、结构稳固、结构曲率范围更大等特点。

    非接触式电导法实现PCR反应过程的实时检测系统和方法

    公开(公告)号:CN102604827A

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201210093107.6

    申请日:2012-03-31

    Abstract: 本发明涉及非接触式电导法实现PCR过程的实时检测系统和方法,其特征在于所述系统包括基于MEMS集成的PCR微芯片、交流激励电源、电流转电压及放大电路、温度传感电路、加热电路、数模/模数转换接口DAQ及上位的Labview控制中心;所述的集成PCR微芯片集成了微反应腔、温度传感电极和加热电极以及电化学检测电极,硅基底正面刻蚀微反应腔,背面集成加热电极和温度传感电极;电化学检测电极为叉指电极,通过绝缘层与硅基底键合,与微反应腔形成密闭结构,通过控制硅基底背面的温度传感电极和加热电极实现扩增反应所需的温度循环。本发明所述的检测系统的灵敏度和分辨率可达fg/μL以下,电极复用性高,使用寿命长、检测结果可靠性高。

    基于量子点共振能量转移检测HBVDNA及单碱基突变的方法

    公开(公告)号:CN101654715B

    公开(公告)日:2012-04-25

    申请号:CN200910195689.7

    申请日:2009-09-15

    Abstract: 本发明涉及一种基于量子点共振能量转移检测HBV DNA及单碱基突变的方法,包括:MPA包裹的CdSe/ZnS核/壳结构量子点的制备;HBV DNA检测探针的设计及合成;QDs-DNA探针交联物的制备;互补的靶HBV DNA及单碱基突变的高通量检测。该方法操作简单,可以与多种仪器兼容,不需要对杂交体系中未联接的DNA进行分离;由于Cy5在485nm光激发下不会直接产生荧光信号,因此背景干扰小,信号强;该方法还具有特异、快速、高分辨率、高灵敏度和高通量的特点,可应用于临床医学中HBV靶DNA及单碱基突变的检测。

    一种基于纳米金增强的多种肺癌标志物的高灵敏检测方法

    公开(公告)号:CN102313814A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110211260.X

    申请日:2011-07-22

    Abstract: 本发明是一种基于纳米金增强的多种肺癌标志物。高灵敏度检测方法,检测步骤为:1)先将各待测蛋白质的捕捉抗体点样到醛基修饰的基片上;2)然后在纳米金上标记上待测蛋白的多克隆或单克隆检测抗体;3)将标记好待测蛋白质捕捉抗体的蛋白芯片及纳米金生物复合探针与待测蛋白质样品混合,37℃孵育一段时间,洗去没有反应的纳米金探针;4)加入金增强反应液,肉眼或显微镜下观察、或用CCD扫描拍照,根据灰度值测定相应的蛋白浓度。本发明提供的方法可广泛应用于临床诊断、肿瘤转移监测、抗原、抗体、核酸的检测、卫生检疫、环境检测等领域,检测蛋白质的灵敏度达pg/ml级。

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