一种重组羰基还原酶突变体及其在催化合成手性醇中的应用

    公开(公告)号:CN117904066A

    公开(公告)日:2024-04-19

    申请号:CN202410092889.4

    申请日:2024-01-23

    Abstract: 本发明提供了一种重组羰基还原酶突变体,由Rhodosporidium toruloides ZJB2014212来源的重组羰基还原酶其氨基酸序列第25位天冬氨酸突变为苏氨酸获得。该重组羰基还原酶突变体相较野生型酶具有高活性、高立体选择性,进一步提高了对底物前体酮的催化效率。将所述的重组羰基还原酶突变体应用于生物酶法合成手性醇,对底物前体酮进行不对称催化还原,相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力有所提高,反应进程耗时缩短。此外,本发明在催化制备手性醇中的反应体系中,构筑了单酶双底物耦联体系,选择了异丙醇作为辅酶再生体系的辅助底物,可有效节约生产成本,对于生物酶法催化制备手性醇的工业应用具有重要意义。

    一种氨基化碳纳米管共价固定转氨酶的方法

    公开(公告)号:CN117286130A

    公开(公告)日:2023-12-26

    申请号:CN202310034198.4

    申请日:2023-01-10

    Abstract: 本发明涉及氨基化碳纳米管共价固定转氨酶的方法,所述方法包括:(1)氨基化碳纳米管活化:将氨基化碳纳米管用缓冲液浸泡12~18h后离心,在体积浓度40~50%的戊二醛中处理1~2h,获得活化后的氨基化碳纳米管;(2)取转氨酶酶液,加入活化后的氨基化碳纳米管,1000~1200rpm、20~30℃下振荡固定24~48h,离心,PBS缓冲液冲洗,再离心去除缓冲液,获得固定化转氨酶。本发明的有益效果主要体现在:按照本发明方法制备的固定化转氨酶不对称还原制备西他列汀,连续反应15个批次,各批次的转化率均大于99%。

    一种木糖母液连续饱充除杂设备及方法

    公开(公告)号:CN109402300B

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN201811550349.7

    申请日:2018-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种木糖母液连续饱充除杂设备及方法,包括加碱单元、连续饱充单元、出料控制单元、CO2供给站、蒸汽站以及饱充后罐,加碱单元用于向木糖母液内加入Ca(OH)2碱液,所述连续饱充单元用于将从CO2供给站供给的CO2通入加碱后的木糖母液内进行饱充混合以除去木糖母液中的胶质和色素杂质,所述出料控制单元用于将从CO2供给站供给的CO2以及从蒸汽站输送的蒸汽通入饱充后的木糖母液内,控制并稳定饱充后的木糖母液的pH值,饱充后罐用于收集暂存饱充除杂后的木糖母液准备进入下工序。本发明还公开一种使用该设备的方法。本发明连续调节并稳定木糖母液pH,进出料连续,设备自动化程度高,实现连续化不间断生产,利于提高生产效率。

    一种重组脂肪酶突变体、工程菌及应用

    公开(公告)号:CN109182298B

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201810924220.1

    申请日:2018-08-14

    Abstract: 本发明公开了一种重组脂肪酶突变体、工程菌及其制备(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯应用,所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第140位、141位、144位、189位、第190位进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高,反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(S,S)‑2,8‑二氮杂双环[4,3,0]壬烷,本发明提供的技术所得产品立体选择性高,反应条件更加温和,对设备要求低,降低了反应成本,且对环境友好。

    一种羰基还原酶基因工程菌固定化细胞及其应用

    公开(公告)号:CN107653238B

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201710965085.0

    申请日:2017-10-17

    Abstract: 本发明提供了一种利用固定化大肠杆菌(E.coli)工程菌细胞催化合成他汀类药物手性中间体(3R,5S)‑6‑氯‑3,5‑二羟基己酸叔丁酯与(3R,5R)‑6‑氰基‑3,5‑二羟基己酸叔丁酯的方法。包括含羰基还原酶大肠杆菌工程菌的培养、固定化细胞的制备、固定化细胞催化新型药物手性中间体(3R,5S)‑6‑氯‑3,5‑二羟基己酸叔丁酯与(3R,5R)‑6‑氰基‑3,5‑二羟基己酸叔丁的合成。本发明方法采用固定化生物大肠杆菌工程菌细胞为催化剂,稳定性好,使用寿命长,有机溶剂耐受性好,可多次重复利用,并且无需昂贵的外源辅酶添加,可在有机相反应体系中催化他汀药物中间体的合成,产品产率与纯度高,并可大幅度降低生产成本,简化工艺步骤,减少“三废”排放,在他汀类药物手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。

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