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公开(公告)号：CN114277040B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202111597793.6
申请日：2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑胡萝卜素菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。所述构建方法为将β‑胡萝卜素合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到β‑胡萝卜素合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株β‑胡萝卜素产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后发酵液中菌体干重可达213g/L，β‑胡萝卜素产量可达6.5g·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成β‑胡萝卜素，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114410631B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210091687.9
申请日：2022-01-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P7/02 , C12R1/74
Abstract: 本发明公开了一种高效合成西柏三烯一醇菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。所述构建方法为将西柏三烯一醇合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到西柏三烯一醇合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株西柏三烯一醇产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后西柏三烯一醇产量可达1391.3mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成西柏三烯一醇，并且生产性能稳定，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114196689B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202111596810.4
申请日：2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产α‑蛇麻烯的酵母重组菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。本发明通过在热带假丝酵母的染色体DNA上整合表达植物来源的α‑蛇麻烯合酶基因构建了可以合成α‑蛇麻烯的工程菌株，在此基础上过表达内源性的涉及α‑蛇麻烯合成基因，构建高效生产α‑蛇麻烯的重组菌株，α‑蛇麻烯产量达到149.7mg·L‑1，较对照菌株提高了112倍。本发明还提供了利用上述工程菌株生产α‑蛇麻烯方法。本发明提供的α‑蛇麻烯生产菌株生产性能稳定，生产过程不需要添加抗生素，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN112813013B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202110176003.0
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产羟基酪醇的重组大肠杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明采用E.coli YMGR5A作为宿主菌株，表达了大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中4‑羟苯基乙酸羟化酶基因HpaBC(GenBank登录号：CP053601.1)，即在宿主菌株基因组中，删除poxB基因并在该位点整合HpaBC基因，获得羟基酪醇高产菌株E.coli YMGRD1H1。采用本发明提供的重组大肠杆菌E.coli YMGRD1H1在葡萄糖的培养基中发酵生产羟基酪醇的产量可高达2.95g/L。
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公开(公告)号：CN112410236B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202011322518.9
申请日：2020-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种类大牻牛儿烯合成酶C突变体及构建方法与应用，属于生物催化技术领域。本发明采用重组DNA技术将类大牻牛儿烯合成酶C编码基因，将其克隆至表达载体，并转化宿主，获得一株高产类大牻牛儿烯合成酶C的重组菌株。针对类大牻牛儿烯合成酶C活性位点E474周围loop结构上的氨基酸残基进行定向进化，筛选获得高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体。本发明还提供了上述方法在制备含西柏三烯醇的产品中的应用。采用本发明获得的高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体及方法可高效催化生产西柏三烯醇，可促进其在农业及烟草等领域中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114806910A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210187114.6
申请日：2022-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产L‑柠檬烯的热带假丝酵母工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域。本发明以热带假丝酵母ATCC 20336为出发菌株，将来源于绿薄荷的柠檬烯合成酶和定点突变后的法尼基焦磷酸合成酶通过CRISPR‑Cas9技术整合至热带假丝酵母CU‑200的基因组上。经过表达后，重组热带假丝酵母的L‑柠檬烯产量达到了141.48mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号：CN114736918A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210356043.8
申请日：2022-03-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种整合表达生产红景天苷的重组大肠杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明采用E.coli YMGR5A作为宿主菌株，整合表达了来源于拟南芥的糖基转移酶基因UGT85A1，即在宿主菌株中，在不同位点整合表达的UGT85A1基因，获得多拷贝数的产红景天苷重组大肠杆菌菌株；E.coli 5A8S菌株在装有50mL M9Y培养基的250mL摇瓶发酵后，红景天苷的产量为2.42g/L。在装有2.5L M9Y培养基的5L发酵罐发酵后，红景天苷最高产量为9.34g/L，单位菌体浓度的产量为0.27g/(L·OD600)，而且该整合表达菌株相比质粒表达菌株而言，具有良好的遗传稳定性和生长状况。
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公开(公告)号：CN112941119A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110089835.9
申请日：2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母工程菌脂肪酸乙酯产量的方法，本发明通过阻断甾醇酯途径(ΔARE1、ΔARE2)、三酰基甘油途径(ΔDGA1、ΔLRO1)和β氧化途径(ΔPXA2)富集脂肪酰辅酶A作为生产脂肪酸乙酯的前体物质，在此基础上整合表达根据酿酒酵母密码子优化的外源基因WS2(蜡酯合成酶)构建一条可以利用葡萄糖为底物，经过一系列反应形成脂肪酸乙酯的代谢通路，并提供一种适用于所构建的酿酒酵母工程菌的发酵方法，酿酒酵母工程菌的FAEE最高产量为1.35g/L，是目前报道的利用酿酒酵母产FAEE产量中较高的。
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公开(公告)号：CN110343654B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201910755446.8
申请日：2019-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的基因工程菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以pET‑28a为载体构建重组质粒pET‑28a‑SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，得到高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为504.19U/mL，比酶活为145.19U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。
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公开(公告)号：CN110452845B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910754470.X
申请日：2019-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌，属于微生物技术领域。本发明将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，以pET‑28a为载体构建重组质粒pET‑28a‑SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，并通过紫外诱变法对构建好的重组菌进行诱变，筛选出高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为819.16U/mL，比酶活为206.91U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。
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