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公开(公告)号：CN117660417A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311550168.5
申请日：2023-11-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种在枯草芽孢杆菌中胞外表达β‑葡萄糖苷酶的方法，属于微生物学和生物工程技术领域。本发明实现了海洋微生物宏基因组来源的β‑葡萄糖苷酶在枯草芽孢杆菌中胞外分泌表达，并证明了其在枯草芽孢杆菌中是以非经典分泌途径进行胞外表达。然后，通过对β‑葡萄糖苷酶自身氨基酸序列中影响其分泌效率的关键疏水区域I266‑Q269进行改造，获得的突变体提高了β‑葡萄糖苷酶在枯草芽孢杆菌中的胞外表达水平，最终胞外β‑葡萄糖苷酶活性为1.42U/mL，是对照菌株的1.97倍。本发明将加深研究人员对枯草芽孢杆菌非经典分泌途径的理解，促进利用枯草芽孢杆菌非经典分泌途径高效表达目的蛋白。
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公开(公告)号：CN117467631A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311303268.8
申请日：2023-10-10
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体及其在γ‑内酯制备中的应用，其中脂肪酸脱羧酶P450BSβ突变体是由野生型P450BSβ的氨基酸序列在第78位、85位、173位和290位突变得到的，可以利过氧化氢为直接的电子供体，脂肪酸为底物直接一步氧化内酯化为内酯。催化的底物范围扩展为链长为C6～C18链长的脂肪酸，含官能团的脂肪酸，含芳香(杂)环的脂肪酸。本发明所述的催化剂效率更高、反应更简洁、底物范围更广，在制备γ‑内酯方面具有良好的应用前景和工业价值。
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公开(公告)号：CN116355865A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310136182.4
申请日：2023-02-20
Applicant: 安徽大学绿色产业创新研究院
Abstract: 本发明公开了一种酰基辅酶A合成酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用，本发明以来自海洋未培养微生物来源的酰基辅酶A合成酶为基础，通过Funclib设计突变位点后全基因合成，获得突变基因。含有突变质粒的工程菌诱导表达后，获得比酶活提高且稳定性提升的酰基辅酶A合成酶。以棕榈酸为底物时，突变体的比酶活提高了7.0倍，该突变体在酶法检测游离脂肪酸体外诊断试剂盒中具有潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN116286575A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310120217.5
申请日：2023-02-03
Applicant: 安徽大学绿色产业创新研究院
Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌高效表达生淀粉α‑淀粉酶的方法，属于基因工程和生物工程领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以pBHVY为载体骨架，以来源于Pontibacillussp.ZY的生淀粉α‑淀粉酶基因为目的基因，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主，改造了启动子，筛选了信号肽，优化了RBS序列，并对获得的重组菌进行了3‑L罐发酵补料工艺优化。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达生淀粉α‑淀粉酶，以其为生产菌株，摇瓶发酵48h，发酵上清液中生淀粉α‑淀粉酶的酶活为4824.2U/mL，经3‑L罐发酵培养后胞外生淀粉α‑淀粉酶的酶活可高达49082U/mL，是目前文献报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN116064427A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211375350.7
申请日：2022-11-04
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种酰基辅酶A合成酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用，本发明以来自海洋未培养微生物来源的酰基辅酶A合成酶为基础，通过Funclib设计突变位点后全基因合成，获得突变基因。含有突变质粒的工程菌诱导表达后，获得比酶活提高且稳定性提升的酰基辅酶A合成酶。以棕榈酸为底物时，突变体的比酶活提高了4.4倍。在比活力提高的同时，突变体的稳定性也得到了提升，该突变体在酶法检测游离脂肪酸体外诊断试剂盒中具有潜在应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115873772A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202210914414.X
申请日：2022-08-01
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达生淀粉α‑淀粉酶的枯草芽孢杆菌重组菌及其应用。本发明枯草芽孢杆菌重组菌以pBHSS142为表达载体、以来源于Pontibacillussp.ZY的生淀粉α‑淀粉酶基因为目的基因、以枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)WB600为表达宿主，在目的基因的上游插入了信号肽基因，改造了启动子、5'非翻译区序列和近端编码序列。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达α‑淀粉酶，以其为生产菌株，摇瓶发酵48h，可将发酵液中α‑淀粉酶的酶活提高至2974U/mL。
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公开(公告)号：CN109679937A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201910010979.3
申请日：2019-01-07
Applicant: 安徽大学
CPC classification number: C12N9/2417 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12Y302/01001
Abstract: 本发明公开了一种具有高比酶活力的生淀粉水解酶、其编码基因及其应用，其中生淀粉水解酶名称为AmyZ1，其氨基酸序列为如下序列中的一种：(1)序列表中的SEQ ID No：2；(2)序列表中的SEQ ID No：2经取代、缺失或添加一个或几个氨基残基且编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。本发明生淀粉水解酶来自海洋细菌Pontibacillus sp.ZY，具有高比酶活力，其对生淀粉及可溶性淀粉均具有高比酶活；且可于较低温度条件下，高效水解20-30％的高浓度生淀粉，具有潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN109295017A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201810817998.2
申请日：2018-07-24
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种真菌漆酶突变体PIE5及其表达菌株和应用，其中真菌漆酶突变体PIE5，是以定向进化手段对灰盖鬼伞漆酶Lcc9进行改造，构建突变文库，结合三轮筛选方法，获得的漆酶突变体，以提高漆酶的应用能力。本发明真菌漆酶突变体PIE5最适催化pH为8.5(愈创木酚为底物)，而且在pH至9.5时仍能够发挥良好活性，因此真菌漆酶PIE5相比之下具有碱性环境的应用优势，扩宽了真菌漆酶的应用领域，可直接应用于纺织整染工艺代替石磨水洗，在废水靛蓝降解中也无需调整废水pH，有利于改进真菌漆酶的纺织整染工艺，降低运行成本，保护生态环境。
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公开(公告)号：CN104087560B
公开(公告)日：2016-10-19
申请号：CN201310655726.4
申请日：2013-12-05
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌漆酶突变体蛋白，其特征在于，该突变体蛋白氨基酸序列由SEQ ID No.1所示的细菌漆酶氨基酸序列第323位甘氨酸至332位甘氨酸进行缺失突变获得。本发明通过基因工程改造方法获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白编码基因、其表达质粒及工程菌，并可在将工程菌大规模发酵及诱导表达后，获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白。本发明以海洋未培养微生物来源的细菌漆酶Lac15为基础，通过基因工程改造，获得突变基因；同时利用重组大肠杆菌进行高密度培养的方法，高效表达细菌漆酶突变体蛋白。本发明大幅提高了细菌漆酶的稳定性和产量。
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公开(公告)号：CN102220302B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201110132525.7
申请日：2011-05-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的葡萄糖耐受浓度提高了13倍，而其他酶学性质没有变化，在工业上具有应用价值，其可以改善木质纤维素的发酵工艺，并且可生产出高达20-30％浓度的果汁。
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