公开(公告)号：CN117660417A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311550168.5

申请日：2023-11-20

Applicant: 安徽大学

Inventor： 肖亚中 ,  王文静 ,  姚动邦 ,  李鹤 ,  房伟 ,  张学成 ,  方泽民

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种在枯草芽孢杆菌中胞外表达β‑葡萄糖苷酶的方法，属于微生物学和生物工程技术领域。本发明实现了海洋微生物宏基因组来源的β‑葡萄糖苷酶在枯草芽孢杆菌中胞外分泌表达，并证明了其在枯草芽孢杆菌中是以非经典分泌途径进行胞外表达。然后，通过对β‑葡萄糖苷酶自身氨基酸序列中影响其分泌效率的关键疏水区域I266‑Q269进行改造，获得的突变体提高了β‑葡萄糖苷酶在枯草芽孢杆菌中的胞外表达水平，最终胞外β‑葡萄糖苷酶活性为1.42U/mL，是对照菌株的1.97倍。本发明将加深研究人员对枯草芽孢杆菌非经典分泌途径的理解，促进利用枯草芽孢杆菌非经典分泌途径高效表达目的蛋白。