一种利用枯草芽孢杆菌高效表达生淀粉α-淀粉酶的方法

    公开(公告)号:CN116286575B

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202310120217.5

    申请日:2023-02-03

    Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌高效表达生淀粉α‑淀粉酶的方法,属于基因工程和生物工程领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以pBHVY为载体骨架,以来源于Pontibacillussp.ZY的生淀粉α‑淀粉酶基因为目的基因,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主,改造了启动子,筛选了信号肽,优化了RBS序列,并对获得的重组菌进行了3‑L罐发酵补料工艺优化。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达生淀粉α‑淀粉酶,以其为生产菌株,摇瓶发酵48h,发酵上清液中生淀粉α‑淀粉酶的酶活为4824.2U/mL,经3‑L罐发酵培养后胞外生淀粉α‑淀粉酶的酶活可高达49082U/mL,是目前文献报道的最高水平。

    一种利用枯草芽孢杆菌高效表达生淀粉α-淀粉酶的方法

    公开(公告)号:CN116286575A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310120217.5

    申请日:2023-02-03

    Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌高效表达生淀粉α‑淀粉酶的方法,属于基因工程和生物工程领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以pBHVY为载体骨架,以来源于Pontibacillussp.ZY的生淀粉α‑淀粉酶基因为目的基因,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主,改造了启动子,筛选了信号肽,优化了RBS序列,并对获得的重组菌进行了3‑L罐发酵补料工艺优化。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达生淀粉α‑淀粉酶,以其为生产菌株,摇瓶发酵48h,发酵上清液中生淀粉α‑淀粉酶的酶活为4824.2U/mL,经3‑L罐发酵培养后胞外生淀粉α‑淀粉酶的酶活可高达49082U/mL,是目前文献报道的最高水平。

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