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公开(公告)号：CN102747024A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210201255.5
申请日：2012-06-19
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7多价fliC-hcpA-tir-eae重组菌及疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHECO157:H7的H7鞭毛（fliC）基因、菌毛（hcpA）基因、转位紧密素受体（tir）基因和紧密素（eae）基因，依次串联，克隆入表达载体pColdⅠ中，获得重组质粒pCold-fliC-hcpA-tir-eae，在BL21（DE3）获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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公开(公告)号：CN102586311A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210030915.8
申请日：2012-03-15
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7多价fliC-hcpA-tir-eae重组菌及疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHECO157:H7的H7鞭毛（fliC）基因、菌毛（hcpA）基因、转位紧密素受体（tir）基因和紧密素（eae）基因，依次串联，克隆入表达载体pCold中，获得重组质粒pCold-fliC-hcpA-tir-eae，在BL21（DE3）获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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公开(公告)号：CN103255171B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310072085.X
申请日：2013-03-07
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/866 , A61K48/00 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒（PCV）2型密码子优化的ORF2基因重组杆状病毒病毒样粒子，属于生物制药领域。将所有PCV2 ORF2序列进行比对分析，得到人工合成的密码子优化的PCV2 ORF2序列，命名为YHsfORF2。将YHsfORF2克隆、转染，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF2。密码子优化的ORF2基因能够在重组病毒中高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物免疫保护试验表明该重组病毒灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，有效抑制PCV2在动物体内的复制，对PCV2感染有较好的免疫预防保护作用。
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公开(公告)号：CN102928605B
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210436636.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 何孔旺 , 文世富 , 温立斌 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及一种用于检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒。属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pET-28a(+)原核表达载体，构建的表达类猪圆环病毒P1Cap衣壳蛋白C端部分氨基酸序列的3个重复的基因工程菌BLpET-28a-3pCap,并将表达的重组蛋白纯化后的Cap蛋白。该方法用于检测猪血清中类猪圆环病毒P1的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于类猪圆环病毒P1血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的检测方法。目前该方法是国际上首次利用P1衣壳蛋白建立检测猪群中P1抗体的ELISA。
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公开(公告)号：CN102876620B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210413985.1
申请日：2012-10-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一株无毒ST28猪链球菌及其应用，属生物技术领域。采集健康屠宰猪的扁桃体样品，增菌处理后提取细菌的DNA，应用聚合酶链式反应鉴定cps2j基因，随后经过细菌平板分离获得纯培养细菌，对纯培养细菌进行革兰氏染色、血清凝集和聚合酶链式反应、多位点序列分型，确定分离到猪链球菌2型菌株及其序列型；经过Balb/c小鼠、新西兰兔、长白仔猪的动物实验，证实该菌HA0609为无毒菌株。该菌1次肌肉注射新西兰兔、2次腹腔注射CD1小鼠后，能够提供受免动物一定的免疫能力，对HA0609免疫保护性抗原的分析，能用于猪链球菌病亚单位疫苗的研制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103275912A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310099542.4
申请日：2013-03-10
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7多价fliC-hcpA-tir-eae重组菌及疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的H7鞭毛(fliC)基因、菌毛(hcpA)基因、转位紧密素受体(tir)基因和紧密素(eae)基因，依次串联，克隆入表达载体pCold I中，获得重组质粒pCold-fliC-hcpA-tir-eae，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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公开(公告)号：CN103235121A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310087506.6
申请日：2013-03-18
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于检测猪输血传播病毒2型（TTV2）抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA的建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pcoldI原核表达载体，构建表达猪TTV2ORF1截短蛋白的基因工程菌pcoldI-ORF1，并将表达的重组蛋白纯化作为抗原建立了间接ELISA检测方法。该方法用于检测猪血清中TTV2的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于猪TTV2的血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的血清学检测方法。目前该方法是国内首次利用猪TTV2ORF1重组蛋白建立检测猪群中TTV2抗体的ELISA检测方法。
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公开(公告)号：CN102888471A
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201210436587.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 温立斌 , 何孔旺 , 高晓静 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
Abstract: 本发明涉及一种利用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测判定。本发明检测灵敏度高，稳定性高、特异性好，可以检测样本中类猪圆环病毒P1的含量，同时可以鉴别样本中猪圆环病毒2型的感染。
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公开(公告)号：CN102876620A
公开(公告)日：2013-01-16
申请号：CN201210413985.1
申请日：2012-10-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一株无毒ST28猪链球菌及其应用，属生物技术领域。采集健康屠宰猪的扁桃体样品，增菌处理后提取细菌的DNA，应用聚合酶链式反应鉴定cps2j基因，随后经过细菌平板分离获得纯培养细菌，对纯培养细菌进行革兰氏染色、血清凝集和聚合酶链式反应、多位点序列分型，确定分离到猪链球菌2型菌株及其序列型；经过Balb/c小鼠、新西兰兔、长白仔猪的动物实验，证实该菌HA0609为无毒菌株。该菌1次肌肉注射新西兰兔、2次腹腔注射CD1小鼠后，能够提供受免动物一定的免疫能力，对HA0609免疫保护性抗原的分析，能用于猪链球菌病亚单位疫苗的研制。
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公开(公告)号：CN101948792A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010118490.7
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C07K14/245 , A61K39/108 , A61K39/116 , A61P31/04
CPC classification number: Y02A50/472
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7增强粘膜免疫多价融合型重组菌、重组蛋白制备方法及基因工程疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的志贺毒素1和2的B亚基(Stx1B和Stx2B)、转位紧密素受体(Tir)，依次串联，克隆入表达载体pGEX-4T-1中，而后将霍乱弧菌封闭小带毒素(zot)串联其后，即获得重组质粒pGEX-4T-1-2b-tir-1b-zot，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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