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公开(公告)号：CN102888471A
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201210436587.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 温立斌 , 何孔旺 , 高晓静 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
Abstract: 本发明涉及一种利用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测判定。本发明检测灵敏度高，稳定性高、特异性好，可以检测样本中类猪圆环病毒P1的含量，同时可以鉴别样本中猪圆环病毒2型的感染。
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公开(公告)号：CN102876620A
公开(公告)日：2013-01-16
申请号：CN201210413985.1
申请日：2012-10-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一株无毒ST28猪链球菌及其应用，属生物技术领域。采集健康屠宰猪的扁桃体样品，增菌处理后提取细菌的DNA，应用聚合酶链式反应鉴定cps2j基因，随后经过细菌平板分离获得纯培养细菌，对纯培养细菌进行革兰氏染色、血清凝集和聚合酶链式反应、多位点序列分型，确定分离到猪链球菌2型菌株及其序列型；经过Balb/c小鼠、新西兰兔、长白仔猪的动物实验，证实该菌HA0609为无毒菌株。该菌1次肌肉注射新西兰兔、2次腹腔注射CD1小鼠后，能够提供受免动物一定的免疫能力，对HA0609免疫保护性抗原的分析，能用于猪链球菌病亚单位疫苗的研制。
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公开(公告)号：CN101948792A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010118490.7
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C07K14/245 , A61K39/108 , A61K39/116 , A61P31/04
CPC classification number: Y02A50/472
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7增强粘膜免疫多价融合型重组菌、重组蛋白制备方法及基因工程疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的志贺毒素1和2的B亚基(Stx1B和Stx2B)、转位紧密素受体(Tir)，依次串联，克隆入表达载体pGEX-4T-1中，而后将霍乱弧菌封闭小带毒素(zot)串联其后，即获得重组质粒pGEX-4T-1-2b-tir-1b-zot，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101838657A
公开(公告)日：2010-09-22
申请号：CN201010127781.2
申请日：2010-03-19
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了猪TT病毒1型CJNY株的完整核苷酸序列，属生物技术领域。该序列长2879个碱基。与已报道的三株完整基因组序列的TT病毒1型(GQ120664、AY823990和AB076001)的核苷酸同源性为68.1％-86.7％，最大不同在于该序列所编码的病毒核衣壳蛋白仅有415个氨基酸，与其它三株相比大大减少。这些序列可用于特异的检测技术研究与开发，以及通过构建感染性分子克隆用于病毒生物学特性的研究。
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公开(公告)号：CN101830985A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010118499.8
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K19/00 , C12N15/31 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7转位紧密粘附素受体(Tir)与内膜素受体偶联细胞骨架蛋白(Tccp)重组蛋白的制备方法及应用，属于生物技术领域。取tir和tccp基因C端序列串联克隆，获得pGEM-T-tir-tccp重组质粒，构建重组质粒pGEX-4T-1-tir-tccp，转化入感受态细胞BL21(DE3)中，获得重组菌株，经IPTG诱导后获得高效表达。本发明制备的重组蛋白Tir-Tccp具有良好的免疫原性，可诱导机体产生高滴度的保护性抗体。Tir-Tccp可作为研制亚单位疫苗的候选多价融合蛋白，为预防和治疗肠出血性大肠杆菌O157:H7感染提供了技术平台和防控手段。
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公开(公告)号：CN107937619A
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201711497886.5
申请日：2017-12-29
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 肖琦 , 何孔旺 , 茅爱华 , 汪伟 , 俞正玉 , 郭佳慧 , 温立斌 , 胡屹屹 , 朱雪蛟 , 李彬 , 郭容利 , 范宝超 , 周萍 , 曲梦 , 倪艳秀 , 周俊明 , 祝昊丹 , 王丹丹 , 张雪寒 , 张碧成 , 吕立新 , 沈江萍
Abstract: 本发明提供一种用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物及其应用，涉及生物技术领域。用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供以非诊断为目的的检测猪圆环病毒3型的方法，以待检样品中提取的总DNA为模板，采用权利要求1-3之一所述引物组合物进行PCR扩增，从而确定待检样品中是否存在猪圆环病毒3型。采用本发明引物组合物及检测方法，能够快速、准确、灵敏的检测出样品中是否存PCV3。
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公开(公告)号：CN102206607A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110087699.6
申请日：2011-04-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 何孔旺 , 张雪寒 , 卢维彩 , 赵攀登 , 叶青 , 温立斌 , 郭容利 , 李彬 , 王小敏 , 倪艳秀 , 吕立新 , 周俊明 , 俞正玉 , 茅爱华 , 周萍 , 沈江萍
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7三基因缺失菌株，属于生物技术领域。①抗性诱导，获得具有链霉素抗性的EHECO157:H7菌株。②缺失株构建，首先EHECO157:H7（△hly），而后依次构建EHECO157:H7（△hly△stx）和EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）。EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）致病性和小鼠体内定植能力较亲本菌株有明显降低而免疫原性良好。本发明构建了EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），并明确了致病性和定植特性。本发明构建的缺失菌株EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），可用于研制EHEC基因缺失活疫苗，免疫接种动物以减少EHECO157:H7在肠道内的定植，进而降低人类感染EHECO157:H7的机会，保障人类身心健康。
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公开(公告)号：CN101173243A
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200710134465.6
申请日：2007-10-23
Applicant: 江苏省农业科学院 , 南京天邦生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)猪链球菌2型(S52)缺失株，属于生物技术领域。包括设计引物，获取impdh基因上下游序列(IN和IC)和氯霉素(cat)基因完整表达盒，基因经串联并克隆入simple pMD18－T载体，串联片段经测序后再经酶切后克隆入温敏质粒pSET4s载体，构建重组基因敲除质粒pSET4s－IN－cat－IC，转化入SS2。IMPDHm培养特性、生化特性和致病性较亲本菌株SS2有明显的不同。本发明构建了IMPDH缺失菌株(IMPDHm)，可用于研制SS2的基因缺失灭活疫苗，为更加安全而有效的防控猪链球菌病提供技术方法。
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