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公开(公告)号:CN105018364B
公开(公告)日:2019-01-29
申请号:CN201510413914.5
申请日:2015-07-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株表达果胶酯酶的酿酒酵母工程菌及应用,属于发酵工程领域。本发明所提供的酿酒酵母工程菌,是将果胶酯酶的编码基因与α‑凝集素的编码基因融合后转化酿酒酵母,重组质粒整合到宿主的染色体NDA上,得到在细胞表面锚定表达果胶酯酶的菌株,果胶酯酶酶活达到2.6U/g。所述菌株用于甘薯和木薯等原料的酒精发酵生产,不仅能够提高酒精发酵效率,而且能显著降低发酵过程中发酵液的粘度,有利于酶的作用和酿酒酵母代谢,还可以降低设备负担,节约能耗。
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公开(公告)号:CN105671025A
公开(公告)日:2016-06-15
申请号:CN201610123619.0
申请日:2016-03-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体地,一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB,其氨基酸序列如序列1所示,且本发明提供了编码上述dacB的编码基因dacB。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala),导致转肽反应中供体不可用,从而控制肽聚糖的网状交联水平,可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号:CN104774817A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510179542.4
申请日:2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体地,一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01,其氨基酸序列如序列1所示,且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT-01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质:1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达;2)具有较宽的温度稳定性性,在50以下酶稳定;3)具有较宽的pH稳定范围:在pH4.0-9.0条件下稳定(酶活力残留>90%);4)具有高低聚果糖转化率,其浓度为57.3%(w/w)。
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公开(公告)号:CN119709441A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202510016727.7
申请日:2025-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种产乳铁蛋白的重组里氏木霉及其应用,属于基因工程技术领域。本发明以里氏木霉CJ2095为出发菌株,在里氏木霉CJ2095中过表达了二硫键异构酶并且敲除了蛋白激活酶基因,得到的重组里氏木霉其乳铁蛋白产量达到了306.31mg/L。除此以外,本发明还对重组里氏木霉的发酵条件进行探究,在以微晶纤维素为碳源的培养基中重组里氏木霉能够高产乳铁蛋白,并且麸皮和吐温‑80的浓度均可以影响乳铁蛋白的产量。因此在以微晶纤维素为碳源且含有麸皮和吐温‑80的培养基中,本发明的重组里氏木霉能够发酵产生1349.5mg/L的乳铁蛋白。
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公开(公告)号:CN119530195A
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202411735771.5
申请日:2024-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐酸性的PET塑料降解酶PETase突变体及其应用,属于生物酶工程技术领域。本发明在野生型FAST‑PETase的基础上进行氨基酸序列截短、单点突变、两两复合突变,获得的突变体R84D降低了FAST‑PETase的最适反应pH,并提高了FAST‑PETase在不同pH下的稳定性。本发明构建的突变体相较于出发FAST‑PETase酶活力提高了2.2倍。在pH=6.5‑8.5时,R84D稳定性较高,酶活力残留均>60%。
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公开(公告)号:CN118995459A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202411189752.7
申请日:2024-08-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成次丹参酮二烯菌株的构建方法及其应用,属于代谢工程领域。本发明将次丹参酮二烯合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达,从IPP和DMAPP到次丹参酮二烯合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达,从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。本发明构建的基因工程菌株经过264h发酵后次丹参酮二烯产量可达4170.3mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成次丹参酮二烯,并且生产性能稳定,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116694589B
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202310663759.7
申请日:2023-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶的突变体及其应用。所述的7β‑HSDH突变体在SEQ ID NO.1所示的野生型上进行单点突变、两两复合突变和三点复合突变,经筛选获得复合突变体T189V/V207M,在此基础上进一步筛选出25个氨基酸残基位点,通过定点饱和突变,提高7β‑HSDH的催化效率以及热稳定性的突变体T189V/V207M/V91P、T189V/V207M/M144H、T189V/V207M/G146A、T189V/V207M/A158S、T189V/V207M/V183I。本发明构建的突变后的7β‑HSDH突变体相较于出发7β‑HSDH酶活力提高了3.8倍,突变后的7β‑HSDH突变体在催化100g·L‑1的7‑酮基‑石胆酸转化率可达到91%,具有工业化生产前景。
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公开(公告)号:CN114686414B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202210258249.7
申请日:2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌全细胞催化的方法及应用,属于基因工程与生物催化领域。本发明通过构建色氨酸操纵子及温敏阻遏系统,可实现大肠杆菌生长前期稳定、正常生长,稳定期促进目的蛋白的表达;该系统还通过控制发酵温度,调节结构基因的表达水平,调控D,D‑羧肽酶实时表达量,增加了胞内可溶性肽聚糖,提高了重组大肠杆菌外膜的透性,有助于催化反应的底物及产物自由穿梭于细胞内外,更加有效的促进全细胞的高效催化。
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公开(公告)号:CN114457133B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202210216549.9
申请日:2022-03-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种以N‑乙酰葡萄糖胺发酵液为底物全细胞催化生产N‑乙酰神经氨酸的方法,属于生物工程应用领域。本发明在以N‑乙酰葡萄糖胺发酵液为底物的转化体系中进行全细胞催化生产N‑乙酰神经氨酸,通过对全细胞转化条件进行优化,在温度为30℃、转化液初始pH为6.5、底物丙酮酸浓度为1.38mol/L、TritonX‑100添加量为0.4%、菌体OD600为30、在5L发酵罐等条件下进行全细胞转化,可得到N‑乙酰神经氨酸180mmol/L,摩尔转化率达65.45%。
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