利用非经典分泌蛋白质实现外源蛋白质的分泌表达

    公开(公告)号:CN103276007B

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201310245544.X

    申请日:2013-06-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种在枯草芽孢杆菌中实现外源蛋白质分泌表达的新策略。以非经典分泌蛋白质Eno,YceD和YvgN作为转运信号实现了外源蛋白质BgaB的分泌表达,但在YceD引导下,BgaB的分泌量很低。在PdhA和KatA情况下,虽然在细胞内检测到很高的融合蛋白质的量,在细胞外没有检测到相应的蛋白质和BgaB的活性,说明PdhA和KatA并不能实现BgaB的分泌表达。当GapA作为融合蛋白质时,胞内和胞外均没有检测到融合蛋白质,可能是融合蛋白质在细胞内并没有表达。本实验的方法对于实现外源蛋白质在枯草芽孢杆菌中的分泌表达表达提供了新的可能。

    一种双精氨酸途径蛋白质分泌载体的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN101407822A

    公开(公告)日:2009-04-15

    申请号:CN200810180274.8

    申请日:2008-12-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种双精氨酸途径蛋白质分泌载体的构建方法及其应用。本发明采用来源于枯草芽孢杆菌的Tat途径信号肽构建了可分泌表达细胞内已折叠蛋白质或非分泌蛋白质的载体pMKSig和pMASig,并以来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热-半乳糖苷酶作为一个目标蛋白质实例来尝试所构建分泌载体的可使用性。对使用这两个载体实现的耐热-半乳糖苷酶在枯草芽孢杆菌中的分泌进行了细胞内外酶活力的对比检测,并通过变性聚丙烯酰胺蛋白质电泳显示出分泌表达的蛋白质条带。本发明有效解决了细胞内已折叠(不可分泌)蛋白质在枯草芽孢杆菌中的分泌,该技术可以推广到其它不可分泌蛋白质的分泌表达中,因而具有良好的应用前景。

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