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公开(公告)号：CN116286883A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310088909.6
申请日：2023-02-06
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C12N7/01 , A61K39/245 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种突变鸭坦布苏病毒株及其构建方法、应用。本发明通过特定的引物组合，构建了定点突变E基因的突变质粒EDII+III E89G V312A，进而构建了突变鸭坦布苏病毒株rDTMUV EDII+III E89G V312A。该毒株可为后续抗鸭坦布苏病毒的药物、疫苗的制备提供了良好的平台。
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公开(公告)号：CN115197961A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210698321.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/34 , C12N5/10 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用，在将B602L重组蛋白完成序列改造后，将其克隆至真核表达载体，进行真核表达，经过筛选能得到稳定表达B602L重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白的CHO细胞株，并在没有G418筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。
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公开(公告)号：CN115044613A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210699886.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/62 , C12N15/34 , C12N5/10 , C12P21/02 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种表达猪圆环病毒cap蛋白的基因工程细胞系及其构建方法和应用，通过对猪圆环病毒cap蛋白核酸序列进行优化合成，克隆至pCMV载体上构建真核表达质粒pCMV‑PCV2cap，通过转染CHO细胞，再经加压筛选获得。本发明将构建的pTT5‑PCV2cap质粒瞬转到293T细胞，提供了一种间接ELISA的方法检测PCV2。本发明利用基因工程技术通过哺乳动物细胞表达系统构建了一种表达猪圆环病毒cap蛋白的细胞系，该细胞系具有与亲本细胞相似的生物特性，表达的重组蛋白能用于PCV2血清学诊断用抗原的研究，对于PCV2的诊断和疫苗生产具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN114196683A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111517150.6
申请日：2021-12-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于兽用制品领域，公开了一种鸭坦布苏病毒感染性cDNA的制备方法，包括如下步骤：步骤1：构建亚基因组质粒，所述亚基因组质粒为质粒pF1、pF2、pF3、pF4，质粒pF1、pF2、pF3、pF4分别含目标片段F1、F2、F3、F4；步骤2：获取目标片段：从质粒pF1、pF2、pF3、pF4上获取用于体外连接的目标片段f1、f2、f3、f4；步骤3：体外连接目标片段f1、f2、f3、f4，获得鸭坦布苏病毒感染性cDNA。该方法可以成功的克隆出与原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN114107303A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111494484.6
申请日：2021-12-08
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种用于特异性靶向IRF7基因的sgRNA，所述sgRNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该sgRNA引物可与合适的载体结构构成质粒，用于敲除相应的基因实现IRF7功能的缺失。同时，本发明还提供了一种质粒、IRF7功能缺失的细胞系及其构建方法和应用。本发明的细胞系的优势在于：IFN‑βmRNA水平、IRF1mRNA水平、VIPERIN mRNA水平、CMPK2mRNA水平可以达到显著的抑制。相比于CN201910352557.4仅抑制干扰素β表达水平，其其他方面的抑制更为显著。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119643856A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411533409.X
申请日：2024-10-31
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测试剂盒及其制备方法和应用，其包括抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照以及阴性对照，其中：抗原包被板为包被有PEDV‑S蛋白的酶标板；样品稀释液为含有1％BSA和10％FBS的1×PBST溶液；浓缩洗涤液为20×PBST溶液；酶标试剂为兔抗猪IgG酶标抗体；显色液为TMB单组分溶液；终止液为硫酸溶液。本发明提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、且工艺简单，制造成本低的优点，且能够用于猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测。
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公开(公告)号：CN118853578A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410819735.0
申请日：2024-06-24
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/90 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/55 , C07K14/435 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种高效生产外源蛋白的哺乳动物细胞系及其构建方法、应用。具体的，哺乳动物细胞系的构建方法包括：构建用于敲除HEK293F细胞中H11位点附近预设长度基因的敲除质粒；构建含有外源蛋白基因的同源模板质粒；将所述敲除质粒、同源模板质粒共同转染HEK293F细胞，并培养；其中，所述同源模板质粒还含有依次连接的H11位点5’同源臂、CMV启动子和H11位点3’同源臂。本发明通过在哺乳动物HEK293F细胞基因组H11位点插入外源目的蛋白基因，构建了稳定表达细胞株，从而实现高效生产目的蛋白，为蛋白产品表达和生产提供新方法。
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公开(公告)号：CN116083502B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202211633111.7
申请日：2022-12-19
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12P19/04 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及动物病检测试剂技术领域，尤其涉及一种用于布鲁氏菌检测的抗原及其制备方法、应用。具体的，该抗原的制备方法为：(1)提供猪种布鲁氏菌S2的脂多糖，将其采用蛋白酶K在1‑10℃消化1‑30h，得到消化后脂多糖；其中，蛋白酶K的用量为所述脂多糖的0.05‑0.4wt％；(2)将消化后脂多糖与免疫彩色微球混合，在1‑35℃致敏1‑30h，即得到用于布鲁氏菌检测的抗原成品。本发明的制备方法有效提升了脂多糖的纯度，且提升了制备得到抗原的特异性，具体的，本发明的抗原能够有效区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9、大肠杆菌O157等阳性血清。此外，本发明的制备方法简单、稳定性好、安全性高。
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公开(公告)号：CN118126139A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410113715.1
申请日：2024-01-26
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/85 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原，所述一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原为纯化后的IBV S1蛋白，所述纯化后的IBV S1蛋白的纯化方法为，先采用核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的上游引物和SEQ ID NO：2所示的下游引物扩增IBV S1基因，得到IBV S1基因片段，再将IBV S1基因整合到质粒载体pIRES2‑EGFP中，得到重组质粒pIRES2‑EGFP‑IBV‑S1，最后将所述重组质粒转染至CHO细胞中表达并利用亲和层析技术纯化，得到纯化后的IBV S1蛋白，此外，本申请还公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒。
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公开(公告)号：CN115197961B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202210698321.8
申请日：2022-06-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N15/85 , C12N15/34 , C12N5/10 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白稳定表达细胞系及其构建方法和应用，在将B602L重组蛋白完成序列改造后，将其克隆至真核表达载体，进行真核表达，经过筛选能得到稳定表达B602L重组蛋白的CHO细胞株。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白的CHO细胞株，并在没有G418筛选压力下，细胞系传至20代，仍可检测到外源重组蛋白，具有试验周期短、成功率高和表达成本低的优点。
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