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公开(公告)号:CN118126139A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410113715.1
申请日:2024-01-26
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/85 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原,所述一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原为纯化后的IBV S1蛋白,所述纯化后的IBV S1蛋白的纯化方法为,先采用核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物扩增IBV S1基因,得到IBV S1基因片段,再将IBV S1基因整合到质粒载体pIRES2‑EGFP中,得到重组质粒pIRES2‑EGFP‑IBV‑S1,最后将所述重组质粒转染至CHO细胞中表达并利用亲和层析技术纯化,得到纯化后的IBV S1蛋白,此外,本申请还公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒。
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公开(公告)号:CN117487962A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311225243.0
申请日:2023-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术生产技术领域,公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAd V‑11三重荧光定量PCR检测的引物组和探针,本申请通过软件Primer Premier5设计得到多组针对FAdV‑4、FAdV‑8b、FAdV‑11的引物和探针,并且通过反复多次的筛选,得到了三组兼具良好的特异性、灵敏度且又不产生相互干扰的引物及探针,并且根据矩阵法,确定FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的最佳反应体系和反应条件,得到了一种具有良好特异性、灵敏度的FAdV‑4/FAd V‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR检测试剂盒,同时,该试剂盒由于各引物和探针之间不会相互干扰,极大程度地降低了错检、漏检等现象的发生,此外,本申请还公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的构建方法。
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公开(公告)号:CN117430675A
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202311271956.0
申请日:2023-09-27
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒的抗原及其制备方法、试剂盒,涉及生物工程技术领域。本发明利用能够稳定表达重组鸡传染性支气管炎病毒核蛋白(N蛋白)的重组菌,在特定条件下诱导表达重组N蛋白并经亲和层析纯化。用纯化出的重组蛋白作为包被抗原,建立了一种简便、特异的间接ELISA方法。本发明还为检测鸡传染性支气管炎病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒。
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公开(公告)号:CN116064668A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号:CN118421698A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410389072.3
申请日:2024-04-01
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及蛋白表达与细胞重组技术领域,公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的构建,该方案先将pXJ40质粒中原有的氨苄抗性基因删除并替换成新霉素‑卡那霉素抗性基因,得到真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR,再对IBV S1基因进行密码子优化,得到密码子优化后的IBV S1基因,随后将密码子优化后的IBV S1基因、IRES2、EGFP插入步骤1制得的真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR中,得到重组质粒pXJ40‑S1,最后将重组质粒pXJ40‑S1转染至CHO细胞中,得到表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系,此外,本申请还公开了上述鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的应用。
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公开(公告)号:CN116064668B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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