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公开(公告)号：CN118421698A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410389072.3
申请日：2024-04-01
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及蛋白表达与细胞重组技术领域，公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的构建，该方案先将pXJ40质粒中原有的氨苄抗性基因删除并替换成新霉素‑卡那霉素抗性基因，得到真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR，再对IBV S1基因进行密码子优化，得到密码子优化后的IBV S1基因，随后将密码子优化后的IBV S1基因、IRES2、EGFP插入步骤1制得的真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR中，得到重组质粒pXJ40‑S1，最后将重组质粒pXJ40‑S1转染至CHO细胞中，得到表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系，此外，本申请还公开了上述鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的应用。
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公开(公告)号：CN117430675A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311271956.0
申请日：2023-09-27
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒的抗原及其制备方法、试剂盒，涉及生物工程技术领域。本发明利用能够稳定表达重组鸡传染性支气管炎病毒核蛋白(N蛋白)的重组菌，在特定条件下诱导表达重组N蛋白并经亲和层析纯化。用纯化出的重组蛋白作为包被抗原，建立了一种简便、特异的间接ELISA方法。本发明还为检测鸡传染性支气管炎病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒。
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公开(公告)号：CN117969831B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116162737A
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202211384708.2
申请日：2022-11-07
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了用于检测鸡传染性支气管炎病毒的引物对和荧光探针及其应用、检测方法，涉及生物病毒检测技术领域。其中，引物对中正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；所述荧光探针的5'端采用FAM修饰，所述荧光探针的3'端采用TAMRA修饰。实施本发明，可准确检测各种基因分型的IBV，为IBV的早期诊断提供良好的基础。
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公开(公告)号：CN117969831A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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公开(公告)号：CN114891073A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210495577.9
申请日：2022-05-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种可溶性VP2抗原，所述VP2抗原通过将VP2基因克隆到pColldⅢ载体上构成表达质粒pColldⅢ‑VP2，转化进入BL21(DE3)感受态细胞(pTf16分子伴侣)，得到基因工程菌种Escherichia coli pTf16/BL21/pColldⅢ‑VP2，提取得到可溶性VP2抗原；所述VP2基因的核苷酸序列如核苷酸序列NO.1所示。该抗原具有优异的免疫保护率，该效果和蛋白本身的可溶性以及空间结构密切相关；同时，本发明还提供了一种疫苗、抗原的制备方法。
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公开(公告)号：CN114276420A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111261717.8
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种可溶性VP2抗原，所述VP2抗原通过将VP2基因克隆到pColldⅢ载体上构成表达质粒pColldⅢ‑VP2，转化进入BL21(DE3)感受态细胞(pTf16分子伴侣)，得到基因工程菌种Escherichia coli pTf16/BL21/pColldⅢ‑VP2，提取得到可溶性VP2抗原；所述VP2基因的核苷酸序列如核苷酸序列NO.1所示。该抗原具有优异的免疫保护率，该效果和蛋白本身的可溶性以及空间结构密切相关；同时，本发明还提供了一种疫苗、抗原的制备方法。
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公开(公告)号：CN113817764A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111261808.1
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N15/34 , C07K14/075 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白的制备及应用。所述制备方法包括：以FAdV‑4毒株DNA为模板，设计引物扩增出fiber2序列，测序正确后，将fiber2序列进行密码子优化，然后将其构建到pMal‑c2X载体上，得到重组质粒pMal‑c2X‑FAV4‑fiber2；最后转化大肠杆菌BL21进行诱导表达，得到I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白。本发明方法只需要在37℃诱导3h即可，时间短，操作简单，其表达的目的蛋白是有利于纯化的可溶性蛋白，只需要一步镍柱层析，便可获得大量目的蛋白，而且成本低，易放大。
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