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公开(公告)号：CN119530170A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411533407.0
申请日：2024-10-31
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50 , C07K14/165 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种一种PEDV N蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用，该方法包括对PEDV N蛋白进行原核表达，并进行纯化，得到PEDV N蛋白；将纯化后的PEDV N蛋白与等体积弗氏佐剂乳化，多点位注射8周龄的雌性BALB/c小鼠，两周免疫一次；按5：1比例取已加强免疫3天后的小鼠的脾细胞与对数生长期的SP2/0细胞混合均匀，在PEG1500作用下进行细胞融合，融合后的细胞混合液使用HAT培养基培养；采用间接ELISA方法筛选出分泌抗体能力强的阳性孔，并采用有限稀释法进行亚克隆，获得6株分泌抗体的细胞株；采用体内诱生腹水法对PEDV N蛋白mAb进行制备。本发明制备得到的PEDV N蛋白单克隆抗体均可特异性高效结合，能够作为PEDV病毒感染和抗感染机制研究的抗体工具。
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公开(公告)号：CN118910329A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411075408.5
申请日：2024-08-07
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本申请属于生物领域，公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的体系，体系中包含有分别针对禽腺病毒FAdV‑4的Fiber2基因和Hexon基因设计得到的第一RPA引物对和第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA‑Fiber2、crRNA‑Hexon、ssDNA‑reporter；此外，本申请还公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的试剂盒，包含有上述体系外，还包含有Buffer、RNase‑free H2O、Rnase Inhibitor以及DNA质粒。
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公开(公告)号：CN118356484A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410472407.8
申请日：2024-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号：CN118048322A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410256623.9
申请日：2024-03-06
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag，所述鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag是通过先将野生型鸡传染性支气管炎病毒毒株IBV‑p65分段扩增，得到1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、5E片段后，将Flag标签插入5E片段，再将1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、插有Flag标签的5E片段体外拼接得到插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA，最后将插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA经体外转录、电转得到的，此外，本申请还公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的构建方法及一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的应用。
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公开(公告)号：CN119265137A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411275864.4
申请日：2024-09-12
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及生物领域，公开了一株稳定表达IBV JS‑96S1蛋白的CHO‑K1细胞株，该细胞株能够被较好的驯化，进而得到悬浮CHO‑K1细胞株，具有驯化时间短，细胞状态好的优势。同时，本发明还公开了采用该细胞株进行悬浮驯化得到悬浮CHO‑K1细胞株的方法以及该细胞株的用途；此外本发明还公开了IBV S1蛋白和用途。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119220506A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411243968.7
申请日：2024-09-05
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/50 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/295 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种表达IBV S蛋白的基因VII型NDV重组病毒及其制备方法和应用，该方法包括：在pBR322‑DHN3mF病毒基因组的P基因和M基因之间插入经修饰的S基因，得到重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2、rDHN3mF‑H120‑S6P、rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS中的任一种。本发明通过将适应细胞株的IBV‑P65的S2区域与QX型IBV MH20的S2区域进行替换，拯救出重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2；通过将H120‑S蛋白上的第692位、第768位、第772位、第815位、第862位、第863位疏水性氨基酸均突变为脯氨酸拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P；在突变6个疏水性氨基酸为脯氨酸的基础上，将第533位‑第537位的氨基酸依次突变为甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、丝氨酸后拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS。将拯救出的三株重组病毒分别感染BHK‑21细胞，经WB验证能检测到S蛋白以及NDV全蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN116286883A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310088909.6
申请日：2023-02-06
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C12N7/01 , A61K39/245 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种突变鸭坦布苏病毒株及其构建方法、应用。本发明通过特定的引物组合，构建了定点突变E基因的突变质粒EDII+III E89G V312A，进而构建了突变鸭坦布苏病毒株rDTMUV EDII+III E89G V312A。该毒株可为后续抗鸭坦布苏病毒的药物、疫苗的制备提供了良好的平台。
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公开(公告)号：CN119643856A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411533409.X
申请日：2024-10-31
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测试剂盒及其制备方法和应用，其包括抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照以及阴性对照，其中：抗原包被板为包被有PEDV‑S蛋白的酶标板；样品稀释液为含有1％BSA和10％FBS的1×PBST溶液；浓缩洗涤液为20×PBST溶液；酶标试剂为兔抗猪IgG酶标抗体；显色液为TMB单组分溶液；终止液为硫酸溶液。本发明提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、且工艺简单，制造成本低的优点，且能够用于猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测。
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公开(公告)号：CN118126139A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410113715.1
申请日：2024-01-26
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/85 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原，所述一种用于检测鸡传染性支气管炎的抗原为纯化后的IBV S1蛋白，所述纯化后的IBV S1蛋白的纯化方法为，先采用核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的上游引物和SEQ ID NO：2所示的下游引物扩增IBV S1基因，得到IBV S1基因片段，再将IBV S1基因整合到质粒载体pIRES2‑EGFP中，得到重组质粒pIRES2‑EGFP‑IBV‑S1，最后将所述重组质粒转染至CHO细胞中表达并利用亲和层析技术纯化，得到纯化后的IBV S1蛋白，此外，本申请还公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒。
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