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公开(公告)号:CN119530170A
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202411533407.0
申请日:2024-10-31
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50 , C07K14/165 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种一种PEDV N蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用,该方法包括对PEDV N蛋白进行原核表达,并进行纯化,得到PEDV N蛋白;将纯化后的PEDV N蛋白与等体积弗氏佐剂乳化,多点位注射8周龄的雌性BALB/c小鼠,两周免疫一次;按5:1比例取已加强免疫3天后的小鼠的脾细胞与对数生长期的SP2/0细胞混合均匀,在PEG1500作用下进行细胞融合,融合后的细胞混合液使用HAT培养基培养;采用间接ELISA方法筛选出分泌抗体能力强的阳性孔,并采用有限稀释法进行亚克隆,获得6株分泌抗体的细胞株;采用体内诱生腹水法对PEDV N蛋白mAb进行制备。本发明制备得到的PEDV N蛋白单克隆抗体均可特异性高效结合,能够作为PEDV病毒感染和抗感染机制研究的抗体工具。
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公开(公告)号:CN117969831B
公开(公告)日:2025-02-25
申请号:CN202311872122.5
申请日:2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法,包括以下步骤:(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被,得到稀释后的抗原溶液,加入酶标板中包被过夜;(2)加入封闭液封闭酶标板;(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品,再加入酶标抗原进行共同孵育,所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白;(4)共同孵育完成后加入底物显色液,显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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公开(公告)号:CN118356484A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410472407.8
申请日:2024-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本申请属于生物制药技术领域,公开了一种MD疫苗的制备方法,该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养,得到鸡胚成纤维细胞;再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞,随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存,其中冻存时使用程序降温仪冻存,所述程序降温仪的程序为:将箱体预冻至4℃,放入安瓿瓶预冷30min,以0.8~1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃;再以8~12℃/min的速率将苗温降至‑100℃,移入液氮保存,本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法,该方法具有制备速度快,疫苗数量大等优点,更加适合MD疫苗的大规模制备,此外,本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号:CN118048322A
公开(公告)日:2024-05-17
申请号:CN202410256623.9
申请日:2024-03-06
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag,所述鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag是通过先将野生型鸡传染性支气管炎病毒毒株IBV‑p65分段扩增,得到1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、5E片段后,将Flag标签插入5E片段,再将1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、插有Flag标签的5E片段体外拼接得到插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA,最后将插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA经体外转录、电转得到的,此外,本申请还公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的构建方法及一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的应用。
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公开(公告)号:CN116376845B
公开(公告)日:2024-12-17
申请号:CN202310188659.3
申请日:2023-02-28
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , A61K39/395 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及药及动物病检测技术领域,具体而言,本发明涉及一种针对豚鼠IFN‑γ的单克隆抗体,其与IFN‑γ的结合特异性强,为采用其进行IFN‑γ的测定提供了良好的基础,进而也为结核菌素效价标定提供了良好的基础。相应的,本发明还公开了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株GIFN‑1A2。本发明还公开了包括该单克隆抗体的药物、试剂盒。
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公开(公告)号:CN117384860B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202310188666.3
申请日:2023-02-28
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及药及动物病检测技术领域,具体而言,本发明涉及一种用于结核菌素效价标定的单克隆抗体,其与IFN‑γ的结合特异性强,为采用其进行IFN‑γ的测定提供了良好的基础,进而也为结核菌素效价标定提供了良好的基础。相应的,本发明还公开了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株GIFN‑5G2。本发明还公开了包括该单克隆抗体的药物、试剂盒。
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公开(公告)号:CN118421698A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410389072.3
申请日:2024-04-01
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及蛋白表达与细胞重组技术领域,公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的构建,该方案先将pXJ40质粒中原有的氨苄抗性基因删除并替换成新霉素‑卡那霉素抗性基因,得到真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR,再对IBV S1基因进行密码子优化,得到密码子优化后的IBV S1基因,随后将密码子优化后的IBV S1基因、IRES2、EGFP插入步骤1制得的真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR中,得到重组质粒pXJ40‑S1,最后将重组质粒pXJ40‑S1转染至CHO细胞中,得到表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系,此外,本申请还公开了上述鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的应用。
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公开(公告)号:CN116162737A
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202211384708.2
申请日:2022-11-07
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了用于检测鸡传染性支气管炎病毒的引物对和荧光探针及其应用、检测方法,涉及生物病毒检测技术领域。其中,引物对中正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;所述荧光探针的5'端采用FAM修饰,所述荧光探针的3'端采用TAMRA修饰。实施本发明,可准确检测各种基因分型的IBV,为IBV的早期诊断提供良好的基础。
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公开(公告)号:CN116121199A
公开(公告)日:2023-05-16
申请号:CN202211679961.0
申请日:2022-12-27
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及动物病检测技术领域,具体而言,本发明涉及布鲁氏菌单克隆抗体6A5及其应用、试剂盒。首先,本发明公开了一种杂交瘤细胞株以及其分泌得到的布鲁氏菌单克隆抗体6A5。可采用该单克隆抗体代替牛源阳性血清标定RBT与SAT抗原,其制备方便,且特异性更高。同时克服了制备阳性血清难以仅含有IgG类抗体的技术难题,通过高效价IgG 1亚型布鲁氏菌单抗可以在标定RBT与SAT抗原时实现效价统一,提高诊断抗原质量。
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公开(公告)号:CN119643856A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202411533409.X
申请日:2024-10-31
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测试剂盒及其制备方法和应用,其包括抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照以及阴性对照,其中:抗原包被板为包被有PEDV‑S蛋白的酶标板;样品稀释液为含有1%BSA和10%FBS的1×PBST溶液;浓缩洗涤液为20×PBST溶液;酶标试剂为兔抗猪IgG酶标抗体;显色液为TMB单组分溶液;终止液为硫酸溶液。本发明提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、且工艺简单,制造成本低的优点,且能够用于猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测。
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