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公开(公告)号：CN116479045A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310232502.6
申请日：2023-03-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程及生物检测技术领域，公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为：根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息，在起始密码子ATG之前添加Kozac序列，在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列，在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签，得到改造后的p27序列；然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体，构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27；将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞，然后通过G418加压筛选，得到单克隆细胞，扩大培养，得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。
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公开(公告)号：CN116286885A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202210900601.2
申请日：2022-07-28
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。具体的，本发明基于特定的引物，以Beaudette‑p65为骨架，将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1，其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代，获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9，EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL，与母本毒相似增殖能力。
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公开(公告)号：CN114196683A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111517150.6
申请日：2021-12-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于兽用制品领域，公开了一种鸭坦布苏病毒感染性cDNA的制备方法，包括如下步骤：步骤1：构建亚基因组质粒，所述亚基因组质粒为质粒pF1、pF2、pF3、pF4，质粒pF1、pF2、pF3、pF4分别含目标片段F1、F2、F3、F4；步骤2：获取目标片段：从质粒pF1、pF2、pF3、pF4上获取用于体外连接的目标片段f1、f2、f3、f4；步骤3：体外连接目标片段f1、f2、f3、f4，获得鸭坦布苏病毒感染性cDNA。该方法可以成功的克隆出与原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN114107303A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111494484.6
申请日：2021-12-08
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种用于特异性靶向IRF7基因的sgRNA，所述sgRNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该sgRNA引物可与合适的载体结构构成质粒，用于敲除相应的基因实现IRF7功能的缺失。同时，本发明还提供了一种质粒、IRF7功能缺失的细胞系及其构建方法和应用。本发明的细胞系的优势在于：IFN‑βmRNA水平、IRF1mRNA水平、VIPERIN mRNA水平、CMPK2mRNA水平可以达到显著的抑制。相比于CN201910352557.4仅抑制干扰素β表达水平，其其他方面的抑制更为显著。
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公开(公告)号：CN116064668A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211408464.7
申请日：2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，其公开了一种重组腺病毒质粒，其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能，将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联，置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中，通过一次转录和翻译，可以同时实现2个蛋白的表达，以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白，其病毒滴度高。同时，本发明还公开了该质粒的制备方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116064668B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202211408464.7
申请日：2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，其公开了一种重组腺病毒质粒，其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能，将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联，置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中，通过一次转录和翻译，可以同时实现2个蛋白的表达，以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白，其病毒滴度高。同时，本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号：CN116444654A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310268334.6
申请日：2023-03-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C07K16/08 , C12N15/70 , C12N5/20 , C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体及制备方法和应用。本发明采用重组质粒pET28b‑p72进行表达纯化后得到p72蛋白免疫小鼠，选择血清抗体效价最高的小鼠进行腹腔注射p72蛋白加强免疫，然后取加强免疫后小鼠脾细胞与sp2/0细胞进行融合，筛选出分泌抗p72抗体的阳性杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆，得到抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体细胞株。本发明利用原核表达系统表达ASFV p72蛋白，成功制备了能稳定分泌与ASFVp72蛋白特异性结合的单克隆抗体的细胞株，该抗体纯度高、亲和性和特异性强。
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公开(公告)号：CN116356080A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310404356.0
申请日：2023-04-14
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因检测技术领域，公开了一种检测锦鲤疱疹病毒的RPA‑LFD引物、探针及试剂盒。本发明提供了一种检测锦鲤疱疹病毒的试剂，其具有较高的灵敏度和特异性，最低检测限为101copy/μL，检测效果稳定，与鲤浮肿病毒(CEV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV‑2)以及锦鲤(鲤)易感染细菌嗜水气单胞菌，无交叉反应。
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公开(公告)号：CN116254236A
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202211474706.2
申请日：2022-11-23
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/861 , C12N15/11 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达H9N2HA蛋白的重组腺病毒及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。其中，制备方法包括：提取H9N2HA的基因组，扩增重组，得到重组穿梭质粒pAdTrack‑HA；线性化后与腺病毒骨架质粒重组，得到重组腺病毒质粒pAd HA；线性化后转染细胞，即得到表达H9N2HA蛋白的重组腺病毒。实施本发明，可得到表达H9N2亚型禽流感HA蛋白的重组腺病毒，为H9N2活病毒载体疫苗的研发奠定一定的基础。
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公开(公告)号：CN116218795A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310223954.8
申请日：2023-03-09
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种表达H9亚型禽流感双拷贝HA基因的Ⅶ型致弱新城疫重组病毒，所述病毒为rDHN3mF‑2HA、rDHN3mF‑HA，rDHN3mF‑2HA的序列如序列表SEQ IDNO：1所示；rDHN3mF‑HA的序列如序列表SEQ ID NO：2所示。本发明的病毒在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区之间表达全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白，获得了能高效稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑2HA，经WB验证表明增加HA的可溶性表达与原HA基因相比，其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗；同时，本发明还提供了该病毒的制备方法、用途，此外还涉及关键质粒的制备方法。
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