重组质粒的制备方法和重组病毒

    公开(公告)号:CN114703207B

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202210359526.3

    申请日:2022-04-07

    Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种重组质粒的制备方法,将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸,并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区,获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P,经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比,其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。

    重组质粒的制备方法和重组病毒

    公开(公告)号:CN114703207A

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202210359526.3

    申请日:2022-04-07

    Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种重组质粒的制备方法,将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸,并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区,获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P,经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比,其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。

    一种SFV重组复制子载体表达平台的改建方法

    公开(公告)号:CN116042718A

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN202111261768.0

    申请日:2021-10-28

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种SFV重组复制子载体表达平台的改建方法。所述改建方法包括如下步骤:分别将pSFVCs‑EGFP质粒和pSFV‑Helper1辅助质粒中的SP6启动子更换为CMV启动子,得到质粒pSFV‑EGFP‑CMV和pSFV‑Helper1‑CMV。将pSFV‑EGFP‑CMV中的模式基因EGFP更换成任意抗原基因可获得相应的,能表达特异抗原蛋白的,具自我复制能力的复制子质粒。将pSFV‑EGFP‑CMV与pSFV‑Helper1‑CMV共转染可获得重组的仅具备一代感染性的复制粒子。该系统可安全地应用一代性活病毒载体疫苗的开发以及目的蛋白的制备。

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