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公开(公告)号:CN116064668A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号:CN116064668B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号:CN116218795A
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202310223954.8
申请日:2023-03-09
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种表达H9亚型禽流感双拷贝HA基因的Ⅶ型致弱新城疫重组病毒,所述病毒为rDHN3mF‑2HA、rDHN3mF‑HA,rDHN3mF‑2HA的序列如序列表SEQ IDNO:1所示;rDHN3mF‑HA的序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明的病毒在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区之间表达全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑2HA,经WB验证表明增加HA的可溶性表达与原HA基因相比,其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗;同时,本发明还提供了该病毒的制备方法、用途,此外还涉及关键质粒的制备方法。
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公开(公告)号:CN114703207B
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202210359526.3
申请日:2022-04-07
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种重组质粒的制备方法,将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸,并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区,获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P,经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比,其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN114703207A
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202210359526.3
申请日:2022-04-07
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种重组质粒的制备方法,将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸,并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区,获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P,经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比,其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN116042718A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202111261768.0
申请日:2021-10-28
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种SFV重组复制子载体表达平台的改建方法。所述改建方法包括如下步骤:分别将pSFVCs‑EGFP质粒和pSFV‑Helper1辅助质粒中的SP6启动子更换为CMV启动子,得到质粒pSFV‑EGFP‑CMV和pSFV‑Helper1‑CMV。将pSFV‑EGFP‑CMV中的模式基因EGFP更换成任意抗原基因可获得相应的,能表达特异抗原蛋白的,具自我复制能力的复制子质粒。将pSFV‑EGFP‑CMV与pSFV‑Helper1‑CMV共转染可获得重组的仅具备一代感染性的复制粒子。该系统可安全地应用一代性活病毒载体疫苗的开发以及目的蛋白的制备。
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