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公开(公告)号:CN116479045A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310232502.6
申请日:2023-03-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程及生物检测技术领域,公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为:根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息,在起始密码子ATG之前添加Kozac序列,在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列,在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签,得到改造后的p27序列;然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体,构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27;将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞,然后通过G418加压筛选,得到单克隆细胞,扩大培养,得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。
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公开(公告)号:CN116286885A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202210900601.2
申请日:2022-07-28
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗,涉及生物工程技术领域。具体的,本发明基于特定的引物,以Beaudette‑p65为骨架,将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1,其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代,获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9,EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL,与母本毒相似增殖能力。
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公开(公告)号:CN110128545B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN201910321941.8
申请日:2019-04-22
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , A61K39/295 , A61K39/235 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域,公开了一种融合基因,碱基序列如序列表SEQ ID NO:1所示;该融合基因采用禽流感H9亚型HA基因、腺病毒4型fiber2基因、特异性连接肽片段基因进行融合,该基因对应的表达蛋白抗原能够诱导家禽产生高水平的特异性抗体,保护家禽免受禽流感和禽腺病毒的感染,同时,本发明还公开了一种重组表达载体、抗原及其制备方法和应用。
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公开(公告)号:CN110124025B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN201910321818.6
申请日:2019-04-22
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: A61K39/235 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P31/20 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域,公开了一种禽流感与禽腺病毒4型二联基因工程亚单位疫苗,所述的疫苗中的抗原为融合抗原;所述的融合抗原具有:a)禽流感病毒HA蛋白;b)禽腺病毒fiber2蛋白;c)位于所述的禽流感病毒HA蛋白和禽腺病毒fiber2蛋白之间的特异性连接肽;所述的特异性连接肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本疫苗中含有融合抗原,该融合能够诱导家禽产生高水平的特异性抗体,保护家禽免受禽流感和禽腺病毒的感染,同时本发明还公开了该疫苗的制备方法。
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公开(公告)号:CN115074389A
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202210661981.9
申请日:2022-06-13
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N15/867 , C12N15/11 , C12N15/66 , C12N15/40 , C12N5/10 , C12Q1/70 , G01N33/569 , G01N33/58 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的细胞系的构建方法及其应用,涉及分子生物学技术领域。该构建方法包括:(1)采用构建重组质粒;(2)采用所述重组质粒转染细胞,得到重组细胞;(3)将重组细胞和慢病毒包装质粒共同培养,得到慢病毒样颗粒的培养液;(4)将慢病毒样颗粒的培养液感染宿主细胞,筛选得到稳定株,培养后获得细胞系。实施本发明,可稳定提升NS1mRNA和蛋白的表达水平。
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公开(公告)号:CN115011562A
公开(公告)日:2022-09-06
申请号:CN202210451385.8
申请日:2022-04-24
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鸡新城疫禽流感二联疫苗的制备方法,其包括:(1)提供MDCK悬浮细胞,并培养传代;(2)在培养传代后的MDCK细胞中加入1~5mg/L的地塞米松和2~8mg/L依达拉奉,得到鸡新城疫培养基;将鸡新城疫病毒接种至所述鸡新城疫培养基,培养得到新城疫病毒液;(3)在培养传代后的MDCK细胞中加入1~6g/L的超滤过的酶消化产物,得到禽流感培养基;将禽流感病毒接种至所述禽流感培养基,培养得到禽流感病毒液;(4)将所述新城疫病毒液、禽流感病毒液灭活,并与辅料混合,得到鸡新城疫禽流感二联疫苗。本发明的制备方法简化了病毒繁殖培养工艺,提高了病毒滴度,进而得到的抗体效价高,攻毒保护效果好。
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公开(公告)号:CN114196683A
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202111517150.6
申请日:2021-12-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于兽用制品领域,公开了一种鸭坦布苏病毒感染性cDNA的制备方法,包括如下步骤:步骤1:构建亚基因组质粒,所述亚基因组质粒为质粒pF1、pF2、pF3、pF4,质粒pF1、pF2、pF3、pF4分别含目标片段F1、F2、F3、F4;步骤2:获取目标片段:从质粒pF1、pF2、pF3、pF4上获取用于体外连接的目标片段f1、f2、f3、f4;步骤3:体外连接目标片段f1、f2、f3、f4,获得鸭坦布苏病毒感染性cDNA。该方法可以成功的克隆出与原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号:CN114107303A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111494484.6
申请日:2021-12-08
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供了一种用于特异性靶向IRF7基因的sgRNA,所述sgRNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该sgRNA引物可与合适的载体结构构成质粒,用于敲除相应的基因实现IRF7功能的缺失。同时,本发明还提供了一种质粒、IRF7功能缺失的细胞系及其构建方法和应用。本发明的细胞系的优势在于:IFN‑βmRNA水平、IRF1mRNA水平、VIPERIN mRNA水平、CMPK2mRNA水平可以达到显著的抑制。相比于CN201910352557.4仅抑制干扰素β表达水平,其其他方面的抑制更为显著。
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公开(公告)号:CN111088228B
公开(公告)日:2021-02-23
申请号:CN201911379459.6
申请日:2019-12-27
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N5/0784
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉一种鸭树突状细胞分离与培养方法,取鸭外周血分离得到鸭外周血单核细胞,用RPMI‑1640培养基培养后,再用含有FBS、IL‑4、GM‑CSF、LPS、青霉素和链霉素的RPMI‑1640培养基培养得到鸭单核细胞来源的树突状细胞MoDCs,本发明鸭树突状细胞分离与培养方法可大量有效制备鸭树突状细胞,而且获得的鸭树突状细胞纯度高;操作过程简单明了,耗时短。
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公开(公告)号:CN112294872A
公开(公告)日:2021-02-02
申请号:CN202011201266.4
申请日:2020-11-02
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: A61K36/634 , A61K47/10 , A61P1/02 , A61P31/04 , A61K33/22
Abstract: 本发明涉及中药组合物制剂领域,具体而言,涉及一种有助于宠物口腔清洁的药物组合物及其制备方法。所述助于宠物口腔清洁的药物组合物,以其工作浓度计,每100L所述药物组合物包括M组分、R组分、澄明剂及水,M组分包括以下重量组分:金银花1kg~2kg、连翘1kg~2kg、薄荷0.5kg~1kg及野菊花0.5kg~1kg;R组分包括以下重量组分:硼砂0.8kg~1.2kg、矫味剂以及增稠剂。本发明制备的有助于宠物口腔清洁的药物组合物能够对宠物口腔起到良好的抑菌和清洁作用,还可以辅助治疗宠物口腔疾病。本发明还涉及所述有助于宠物口腔清洁的药物组合物的制备方法,该方法制备工艺简单,能够最大可能的保留药物组合物的药效。
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