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公开(公告)号:CN119120418A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411383850.4
申请日:2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了脱卤效率提高的卤醇脱卤酶突变体及其应用,野生型卤醇脱卤酶来自放射性土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter AD1),使用定向进化的手段对其进行改造,筛选出脱卤效率提高的卤醇脱卤酶突变体,所述突变体的突变包括A83W、P84G、F86W中的至少一种。本发明提供的卤醇脱卤酶突变体能够对卤代醇类污染物2,3‑二氯‑1‑丙醇和3‑氯‑1,2‑丙二醇进行高效精准降解,降低其毒性,并产生高附加值产物,突变体A83W/P84G/F86W在1小时内对这两种物质的脱卤效率分别可达到42.2%和98.6%,是野生型的6倍和5.2倍;本发明提供的卤醇脱卤酶突变体在水相常温下即可实现高效脱卤,无需外加温控设备,具有高效率、低能耗、高选择性的特点,具备绿色低碳、经济便捷的产业应用优势,有利于污染物脱卤及资源化利用。
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公开(公告)号:CN119060990A
公开(公告)日:2024-12-03
申请号:CN202411443601.X
申请日:2024-10-16
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种耐高温碱性α‑半乳糖苷酶突变体及其制备方法,所述突变体对来源于嗜维生素无氧芽孢杆菌的α‑半乳糖苷酶进行定点突变,将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第444位、第457位、第509位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换;第444位天冬酰胺Asn突变为苯丙氨酸Phe,第457位天冬氨酸Asp突变为甲硫氨酸Met,第509位精氨酸Arg突变为色氨酸Trp。本发明通过对嗜维生素无氧芽孢杆菌(Anoxybacillus vitaminiphilus WMF1)来源的α‑半乳糖苷酶进行定点突变,获得α‑半乳糖苷酶突变体具有良好的热稳定性和碱稳定性。
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公开(公告)号:CN118620855A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410799647.9
申请日:2024-06-20
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种乙醛脱氢酶的突变体及其制备方法和应用,所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列中,第119位,第123位,第268位,第292位,第425位至少有一个氨基酸进行置换。本发明利用蛋白质工程技术,通过定点突变,对乙醛脱氢酶进行改造,提高了其酶活性和催化效率。
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公开(公告)号:CN118360263A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410562403.9
申请日:2024-05-08
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的甲酸脱氢酶突变体及其在还原型辅酶Ⅰ(NADH)再生中的应用,所述甲酸脱氢酶突变体由野生型甲酸脱氢酶定向进化得到,包含N24D、K185S、M334I、V377T中的任意一种突变或其组合。本发明公开的甲酸脱氢酶突变体对再生NADH具有高催化活性,并且公开一种能够高效再生NADH的产品,所述产品包含具有高催化活性的甲酸脱氢酶突变体或其编码基因或相应表达载体或相应重组细胞,所述产品应用的温度条件与酸碱度条件易于实现,具有工业化应用基础;本发明还公开一种高催化活性的甲酸脱氢酶突变体的制备方法及其应用,在NADH再生中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN117904079A
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410200479.7
申请日:2024-02-23
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑淀粉酶突变体及其基因、载体和制备方法。α‑淀粉酶突变体的点突变包括对原始酶氨基酸序列的第63位、第115位、第261位、第262位、第266位、第316位、第317位进行置换突变。该突变体的制备方法为:设计点突变引物,以原始酶基因为模板,采用点突变引物进行PCR反应得到突变基因和线性化质粒;将突变基因与线性化表达载体一步克隆连接后转入宿主菌进行发酵表达;收集重组菌后破碎细胞,离心取上清即得突变酶。基于该方法提供一种编码上述α‑淀粉酶突变体蛋白的基因并基于该基因序列构建了含有上述基因的克隆载体或表达载体。本发明中α‑淀粉酶突变体的热稳定性和pH耐受性较好,适用于工业生产。
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公开(公告)号:CN101955294B
公开(公告)日:2013-06-05
申请号:CN200910232775.0
申请日:2009-12-01
Applicant: 南京大学
IPC: C02F9/14 , C02F3/28 , C02F3/12 , C02F1/44 , C02F101/30
CPC classification number: Y02E50/343 , Y02W10/15
Abstract: 本发明公开了一体化生物反应器及其应用和处理高浓度有机废水的方法,其属于废水处理领域。一体化生物反应器采用同心圆柱状结构,内层为UASB,外层为MBBR。在UASB出水口设置pH在线监测仪,UASB底部设搅拌装置。集水池与反应器进口之间设循环泵,可回流MBBR出水,正常情况下回流比为100%。MBBR适合于低温下废水处理,同时其本身对于UASB可起到一定的供热保温作用;此外,当UASB出水pH<6.8时,启动UASB的搅拌装置并增大MBBR回流比,可及时为UASB补充碱度,维持UASB的酸碱平衡,确保微生物的生态稳定。本发明提出的方法和装置可在低温条件下高效稳定地处理高浓度有机废水,投资少、占地省、运行稳定,无需外加碱度和加热,节省维护运行费用和能耗。
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公开(公告)号:CN101913694B
公开(公告)日:2012-05-30
申请号:CN201010258204.7
申请日:2010-08-19
Applicant: 南京大学
IPC: C02F1/78
CPC classification number: C02F1/78 , C02F2103/343 , C02F2201/003 , C02F2301/024 , C02F2301/046
Abstract: 本发明公开了用于工业废水深度处理的内循环臭氧接触反应塔,属于接触反应塔。该反应塔由中心筒和外筒组成,中心筒内装有提升管和进水管,中心筒壁上设有回流窗,通过提升管、进水管和回流窗实现中心筒与外筒间水流的循环,从而实现整个反应塔水流的内循环;整个反应塔密封,反应塔顶部装有导气管。本发明反应塔出水内循环能够加大水流扰动,使反应塔内呈现良好的紊流状态,延长废水与臭氧化空气的接触时间,实现气水充分接触与混合;出水内循环还能够提高反应塔抗冲击负荷能力,保证出水水质且易于调控;冲洗填料的气水装置能够定期对填料进行冲洗,保证气水混合效率;空气提升还能进行预曝气,提高废水溶解氧浓度,利于后续的好氧生物处理。
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公开(公告)号:CN101935093B
公开(公告)日:2012-05-23
申请号:CN201010254867.1
申请日:2010-08-17
Applicant: 南京大学
IPC: C02F1/52
CPC classification number: C02F1/5254 , B01D21/0042 , B01D21/245 , B01D21/305 , C02F1/5281 , C02F2209/06
Abstract: 本发明公开了一种高浓度氮磷废水的连续流反应器及其处理废水的方法。本发明反应器包括以下基本组成构件:圆柱形锯齿槽进水保护堰、圆柱形混凝结晶器、漏斗式静沉保护挡板、圆锥形结晶静沉器、贴壁式斜板沉淀器以及贴壁式锯齿槽出水堰。本发明操作步骤:启动阶段,将废水通入圆柱形混凝结晶器内,开启搅拌装置,再加入可溶性镁源,调节pH值使其维持在7~10。稳定阶段,初始出水需回流二次处理,当出水中氮、磷去除率达到95%以上即可进入下一处理单元。本发明克服了目前回收氮磷工艺流程复杂、废水处理量小、反应器紊流影响大、干扰沉淀进行等问题,提高了磷酸铵镁结晶沉淀效果,而且装置流程简单,便于稳定运行。
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公开(公告)号:CN101913694A
公开(公告)日:2010-12-15
申请号:CN201010258204.7
申请日:2010-08-19
Applicant: 南京大学
IPC: C02F1/78
CPC classification number: C02F1/78 , C02F2103/343 , C02F2201/003 , C02F2301/024 , C02F2301/046
Abstract: 本发明公开了用于工业废水深度处理的内循环臭氧接触反应塔,属于接触反应塔。该反应塔由中心筒和外筒组成,中心筒内装有提升管和进水管,中心筒壁上设有回流窗,通过提升管、进水管和回流窗实现中心筒与外筒间水流的循环,从而实现整个反应塔水流的内循环;整个反应塔密封,反应塔顶部装有导气管。本发明反应塔出水内循环能够加大水流扰动,使反应塔内呈现良好的紊流状态,延长废水与臭氧化空气的接触时间,实现气水充分接触与混合;出水内循环还能够提高反应塔抗冲击负荷能力,保证出水水质且易于调控;冲洗填料的气水装置能够定期对填料进行冲洗,保证气水混合效率;空气提升还能进行预曝气,提高废水溶解氧浓度,利于后续的好氧生物处理。
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公开(公告)号:CN119876079A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510046363.7
申请日:2025-01-13
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了多聚磷酸激酶突变体及其制备方法和应用,野生型多聚磷酸激酶来自铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa PAO1,使用定向进化的手段对其活性位点进行突变,得到了催化合成ATP活性高的多聚磷酸激酶突变体,其对底物ADP或AMP的相对活性远高于野生型,所述突变为D307M、W408A、Y431P中的至少一种,或E304V、P331S、Y431P中的至少一种。本发明实现了由廉价底物向高价值产物的高效合成,有助于ATP的工业生产,在医药等领域中具有良好的应用前景。
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