公开(公告)号：CN107083329A

公开(公告)日：2017-08-22

申请号：CN201710348018.4

申请日：2017-05-17

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  吴姝羽 ,  谢晨 ,  葛慧华

IPC: C12M1/40 ,  C12M1/12 ,  C12N11/12

CPC classification number: C12M21/18 ,  C07K2319/00 ,  C12M33/14 ,  C12N9/248 ,  C12N11/12

Abstract: 本发明公开了一种基于类弹性蛋白多肽的固定化酶反应器及其应用，包括截留孔径为0.6～1μm的深层过滤装置和固定在深层过滤装置中的类弹性蛋白多肽标记的融合蛋白酶，该类弹性蛋白多肽于在NaCl存在的条件下经40～42℃处理而充分相变，而融合蛋白酶的酶活性保持不变。本发明的固定化酶反应结构简单、成本低廉，实现了固定化酶的重复利用，并具有良好的工业化应用前景。

公开(公告)号：CN103911465B

公开(公告)日：2016-02-24

申请号：CN201410119817.0

申请日：2014-03-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 陈国 ,  吴志超 ,  赵珺 ,  陈宏文 ,  张光亚 ,  林毅

IPC: C13B50/00 ,  A23L29/30

Abstract: 本发明提供一种蔗糖转化糖浆的制备方法，步骤如下：用30～60℃、300重量份的水搅拌溶解200～300重量份蔗糖，然后加入0.05～0.3重量份的蔗糖转化酶，在30～60℃下进行蔗糖水解反应30-60分钟；再加入200～300重量份蔗糖，在40～60℃下反应60～120分钟；继续加入200～300重量份蔗糖，在50～70℃下反应90～180分钟，获得70～80°Bé的糖溶液；将该糖溶液在搅拌下通入过滤无菌空气，静置待溶液气泡溢出澄清，即得转化糖浆产品。本发明制备方法反应时间短，转化的糖浆浓度高，保证了原始蔗糖清淡风味，可直接用于食品行业，无需考虑糖浆中引入的盐离子对食品配料成分的改变。

公开(公告)号：CN104818290A

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201510042517.1

申请日：2015-01-28

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  林源清

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/11 ,  G01N27/447

Abstract: 本发明公开了一种蛋白质分子量标准的制备方法，该方法以类弹性蛋白多肽ELP[KV8F-20n]作为蛋白质分子量标准，其中n为整数或小数，且1≤n≤50，其中ELP[KV8F-20]的序列如SEQ ID 1所示，ELP[KV8F-20n]为上述ELP[KV8F-20]的n次串联序列。本发明的方法利用类弹性蛋白多肽的特有的温度敏感性，通过简单的离心即可得到高纯度的蛋白质，从而制备出蛋白质分子量标准，本发明操作简单，设备要求低，易工业化规模生产。

公开(公告)号：CN103911465A

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201410119817.0

申请日：2014-03-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 陈国 ,  吴志超 ,  赵珺 ,  陈宏文 ,  张光亚 ,  林毅

IPC: C13B50/00 ,  A23L1/09

Abstract: 本发明提供一种蔗糖转化糖浆的制备方法，步骤如下：用30～60℃、300重量份的水搅拌溶解200～300重量份蔗糖，然后加入0.05～0.3重量份的蔗糖转化酶，在30～60℃下进行蔗糖水解反应30-60分钟；再加入200～300重量份蔗糖，在40～60℃下反应60～120分钟；继续加入200～300重量份蔗糖，在50～70℃下反应90～180分钟，获得70～80°Bé的糖溶液；将该糖溶液在搅拌下通入过滤无菌空气，静置待溶液气泡溢出澄清，即得转化糖浆产品。本发明制备方法反应时间短，转化的糖浆浓度高，保证了原始蔗糖清淡风味，可直接用于食品行业，无需考虑糖浆中引入的盐离子对食品配料成分的改变。

公开(公告)号：CN112574984B

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202011463973.0

申请日：2020-12-11

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  刘欣 ,  葛慧华

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/24 ,  C07K19/00 ,  B01J13/02

Abstract: 本发明公开了一种包硅磁性微球的制备方法，包括如下步骤：(1)将磁性微球均匀分散于无水乙醇中，接着通过磁铁富集磁性微球，弃去无水乙醇，再超声分散于体积浓度为18‑22％的乙醇溶液中；(2)室温下将纯化后的重组蛋白溶液与步骤(1)所得的物料充分混合0.5‑3min，接着加入硅前体溶液于室温下继续混合3‑10min，然后静置5‑10min，即得所述包硅磁性微球。本发明整个过程耗时20‑90min，固定化酶产量可达99％，简洁、高效，且条件温和，制备过程绿色环保，有广阔的工业实际应用前景。

公开(公告)号：CN112342207B

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202011367038.4

申请日：2020-11-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  葛钟琪 ,  葛慧华

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12N15/12 ,  C07K14/47

Abstract: 本发明公开了一种低速离心纯化重组木聚糖酶的方法，本发明将木聚糖酶与铁蛋白单亚基重组为融合蛋白，在特定pH和温度下使其成为易于沉淀的纳米级聚集体，从而使重组木聚糖酶能够进行自沉淀，通过低速离心进行快速的分离纯化，该纯化方式操作简单省时，处理量大，受设备限制小，制得的重组木聚糖酶存储方便，酶活稳定，酶学性质得以提高。

公开(公告)号：CN105177092A

公开(公告)日：2015-12-23

申请号：CN201510611495.6

申请日：2015-09-23

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  葛慧华 ,  林源清

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明公开了一种具有美白功效的活性多肽的生物发酵制备方法，包括如下步骤：(1)构建融合蛋白，该融合蛋白包括依次相连的ELP[KV8F-40]、连接肽、肠激酶酶切识别位点和活性多肽decapeptide-12；(2)将上述融合蛋白的氨基酸序列根据大肠杆菌的密码子的偏爱性，合成表达融合蛋白的基因序列；(3)将上述基因序列拼接到大肠杆菌表达载体上，导入大肠杆菌进行诱导表达，破碎菌体、离心，得上清液；(4)在一定的盐离子浓度和缓冲溶液条件下，通过控制步骤(3)所得的上清液的温度使融合蛋白发生相变而聚集，再通过离心纯化得到融合蛋白，即所述具有美白功效的活性多肽。本发明的方法高效、安全、成本低廉。

公开(公告)号：CN102432668A

公开(公告)日：2012-05-02

申请号：CN201110380506.6

申请日：2011-11-25

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  陈国 ,  林毅

IPC: C07K1/14 ,  C12P21/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种能对目标重组蛋白进行离心法快速分离纯化的方法，包括如下步骤：1)通过融合标签蛋白基因上的限制性酶切位点，将目标蛋白基因与融合标签蛋白基因连接，并导入到宿主菌中；2)使用不同盐离子及相应的浓度的缓冲溶液，在特定pH值中，通过控制溶液温度使融合标签蛋白发生相变聚集得到蛋白质溶液；3)对蛋白质溶液通过离心法纯化目标蛋白。本发明通过加入一定浓度盐诱发融合标签蛋白发生相变聚集，通过优化操作条件，采用离心法分离重组蛋白，效果显著；该方法简单、快速、高效、经济，不需要特殊仪器，适用范围广、易于操作，生产成本低廉，因而适宜进行工业化生产。