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公开(公告)号:CN109096391B
公开(公告)日:2021-06-29
申请号:CN201810801924.X
申请日:2018-07-19
Applicant: 华侨大学
Abstract: 一种多肽介导的仿生二氧化硅纳米粒子的制备方法及应用,通过采用改进的方案(增加了对沉淀的复性处理)实现快速获取类弹性蛋白多肽ELP40;对于类弹性蛋白多肽ELP40介导二氧化硅粒子沉淀中,对硅源溶液进行改进使其与离散石墨溶液超声混合,可实现粒子的充分混合,进而可获得规则的球形结构的仿生二氧化硅纳米粒子(且粒径分布更集中,粒子直径大小在70nm至400nm之间),反应条件温和、设备简单、操作方便、容易达到工业化规模,具有重要的工业应用价值和巨大的应用潜力。工业上,可以应用于固定化酶领域;生物医学方面,可以作为良好的药物载体,尤其是缓释药物。
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公开(公告)号:CN112342207A
公开(公告)日:2021-02-09
申请号:CN202011367038.4
申请日:2020-11-27
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种低速离心纯化重组木聚糖酶的方法,本发明将木聚糖酶与铁蛋白单亚基重组为融合蛋白,在特定pH和温度下使其成为易于沉淀的纳米级聚集体,从而使重组木聚糖酶能够进行自沉淀,通过低速离心进行快速的分离纯化,该纯化方式操作简单省时,处理量大,受设备限制小,制得的重组木聚糖酶存储方便,酶活稳定,酶学性质得以提高。
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公开(公告)号:CN104450644A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410724759.4
申请日:2014-12-03
Applicant: 华侨大学
CPC classification number: C12N9/18 , C12Y301/01073
Abstract: 本发明公开了一种重组阿魏酸酯酶的制备方法,利用阿魏酸酯酶O42807,密码子优化后人工合成其基因fae、构建pAO815-fae表达载体、构建pPIC9K-fae表达载体以及将pPIC9K-fae表达载体转化至毕赤酵母GS115中表达,得到重组阿魏酸酯酶,SDS-PAGE分析显示其发酵上清液为单一条带,表观分子量为42kDa,酶活为4.7U/mL,比酶活力为31.4U/mg,最适反应温度为50℃,最适pH为5.0~5.5。本发明获得了1株高效表达的重组阿魏酸酯酶转化子,与阿魏酸酯酶O42807相比其表达效率和表达量大大提高。
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公开(公告)号:CN104448004A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410725191.8
申请日:2014-12-03
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种融合抗菌肽及其制备方法,根据抗菌肽YFGAP的氨基酸序列,优化设计其基因序列,连接至pUC19得到pUC19-YFGAP;将pUC19-YFGAP连接至pET-22b-S-ELPs得到pET-22b-YSELP;将pET-22b-YSELP转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,得到E.coli BL21(DE3)/pET-22b-YSELP;接种,培养,加入IPTG诱导YSELP的表达。本发明的融合抗菌肽YSELP不需要从标签蛋白上切下即可对多种测试菌株具有抑制作用,且对宿主菌本身没有杀伤力,有望解决现有抗菌肽大规模应用的问题。
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公开(公告)号:CN112574984B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202011463973.0
申请日:2020-12-11
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种包硅磁性微球的制备方法,包括如下步骤:(1)将磁性微球均匀分散于无水乙醇中,接着通过磁铁富集磁性微球,弃去无水乙醇,再超声分散于体积浓度为18‑22%的乙醇溶液中;(2)室温下将纯化后的重组蛋白溶液与步骤(1)所得的物料充分混合0.5‑3min,接着加入硅前体溶液于室温下继续混合3‑10min,然后静置5‑10min,即得所述包硅磁性微球。本发明整个过程耗时20‑90min,固定化酶产量可达99%,简洁、高效,且条件温和,制备过程绿色环保,有广阔的工业实际应用前景。
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公开(公告)号:CN112342207B
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202011367038.4
申请日:2020-11-27
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种低速离心纯化重组木聚糖酶的方法,本发明将木聚糖酶与铁蛋白单亚基重组为融合蛋白,在特定pH和温度下使其成为易于沉淀的纳米级聚集体,从而使重组木聚糖酶能够进行自沉淀,通过低速离心进行快速的分离纯化,该纯化方式操作简单省时,处理量大,受设备限制小,制得的重组木聚糖酶存储方便,酶活稳定,酶学性质得以提高。
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公开(公告)号:CN105177092A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510611495.6
申请日:2015-09-23
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种具有美白功效的活性多肽的生物发酵制备方法,包括如下步骤:(1)构建融合蛋白,该融合蛋白包括依次相连的ELP[KV8F-40]、连接肽、肠激酶酶切识别位点和活性多肽decapeptide-12;(2)将上述融合蛋白的氨基酸序列根据大肠杆菌的密码子的偏爱性,合成表达融合蛋白的基因序列;(3)将上述基因序列拼接到大肠杆菌表达载体上,导入大肠杆菌进行诱导表达,破碎菌体、离心,得上清液;(4)在一定的盐离子浓度和缓冲溶液条件下,通过控制步骤(3)所得的上清液的温度使融合蛋白发生相变而聚集,再通过离心纯化得到融合蛋白,即所述具有美白功效的活性多肽。本发明的方法高效、安全、成本低廉。
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公开(公告)号:CN112574984A
公开(公告)日:2021-03-30
申请号:CN202011463973.0
申请日:2020-12-11
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种包硅磁性微球的制备方法,包括如下步骤:(1)将磁性微球均匀分散于无水乙醇中,接着通过磁铁富集磁性微球,弃去无水乙醇,再超声分散于体积浓度为18‑22%的乙醇溶液中;(2)室温下将纯化后的重组蛋白溶液与步骤(1)所得的物料充分混合0.5‑3min,接着加入硅前体溶液于室温下继续混合3‑10min,然后静置5‑10min,即得所述包硅磁性微球。本发明整个过程耗时20‑90min,固定化酶产量可达99%,简洁、高效,且条件温和,制备过程绿色环保,有广阔的工业实际应用前景。
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公开(公告)号:CN107083329B
公开(公告)日:2019-06-04
申请号:CN201710348018.4
申请日:2017-05-17
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开了一种基于类弹性蛋白多肽的固定化酶反应器及其应用,包括截留孔径为0.6~1μm的深层过滤装置和固定在深层过滤装置中的类弹性蛋白多肽标记的融合蛋白酶,该类弹性蛋白多肽于在NaCl存在的条件下经40~42℃处理而充分相变,而融合蛋白酶的酶活性保持不变。本发明的固定化酶反应结构简单、成本低廉,实现了固定化酶的重复利用,并具有良好的工业化应用前景。
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