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公开(公告)号：CN110624115A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910848326.2
申请日：2019-09-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K45/00 , A61P25/00 , A61P31/14 , C12N5/10 , C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/861 , C12N15/867 , C12N15/864 , C12Q1/6851 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种钙网蛋白(CALR)的应用，用于抑制病毒尤其是日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)在宿主细胞中复制,从而抵抗JEV病毒复制引起的疾病，提供针对流行性乙型脑炎的抗病性。本发明还提供了一种对抗病毒感染的细胞株和一种非人哺乳动物的抗流行性乙型脑炎动物模型及其制备方法。CALR在哺乳动物中高度保守，因此可以广泛应用于人畜共患传染疾病的预防与治疗，同时可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点，减少药物滥用，避免疫情发生，具有丰富的经济价值。
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公开(公告)号：CN110607280A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910806212.1
申请日：2019-08-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/90 , A61K45/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及EMC3基因的应用及其定点敲除方法，通过基因编辑技术靶向修饰EMC3基因，改变编码区的碱基导致其发生移码突变，进而得到EMC3基因敲除细胞株。实验证明，在猪源肾细胞（PK-15）中改变EMC3基因的核苷酸序列使EMC3蛋白表达缺失，可显著干扰流行性乙型脑炎病毒（JEV）的增殖，从而能有效保护宿主细胞免受JEV感染入侵诱导死亡。多序列比对分析发现，EMC3基因序列在猪、人和小鼠中高度保守。因此，EMC3基因可作为抗乙型脑炎的基因编辑靶点或用于抗乙型脑炎病毒药物的开发。
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公开(公告)号：CN115341010B
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202110525917.3
申请日：2021-05-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一类参与黄曲霉毒素B1毒性效应的靶点及其应用，利用CRISPR/Cas9敲除文库技术，高通量筛选参与黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性效应的靶点，实验证明，利用CRISPR/Cas9技术敲除候选靶点，能显著抑制AFB1诱导细胞毒性效应，特别是构建了关键靶点BACH1纯合敲除单克隆细胞系，并通过实验证明BACH1敲除后可显著提高宿主细胞对黄曲霉毒素B1或黄曲霉毒素衍生物AFG1、AFM1与强氧化剂(双氧水)的抗性。总之，本发明所提供的靶点可作为防治黄曲霉毒素或强氧化剂诱导机体损伤的分子靶标。
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公开(公告)号：CN113637730B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202111059118.8
申请日：2021-09-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种等温扩增技术结合核酸外切酶介导的可视化核酸检测方法，利用等温扩增技术扩增待检测核酸，Exo III剪切扩增子3’末端序列暴露单链DNA靶标，茎环探针结合靶标，Exo III能够剪切探针3’末端并释放荧光基团，通过裸眼或横向流动试纸条可快速、灵敏地检测病毒核酸。该方法无需特殊检测装置，检测速度快、灵敏性高、成本低，且在室温条件下均可完成检测，裸眼和试纸条可视化过程在25~30 min内完成，检测灵敏度可达到2个拷贝。
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公开(公告)号：CN116004716A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211107250.6
申请日：2022-09-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用epi‑dCas9‑FokI系统进行高效基因编辑的方法，具体地公开了一种将附着体元件（EBNA1/oriP）介导融合蛋白dCas9‑FokI表达进行基因编辑的方法，所述epi‑dCas9‑FokI系统由于使用二聚形式产生切割的FokI核酸酶，因此不会破坏sgRNA的识别序列，再利用EBNA1/oriP附着体介导持续表达dCas9‑FokI核酸酶，持续切割未发生敲除的序列，达到提高敲除效率和增加对未发生目的编辑的靶位点进行重复多次编辑的目的。利用该方法可以高效敲除特定核苷酸序列，为基因功能研究提供可行的方法和强大的基因编辑工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112011623B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010866096.5
申请日：2020-08-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明属于家畜分子标记筛选技术领域，具体涉及与母猪产活仔数和有效活仔数性状相关的分子标记。所述的分子标记从ALCAM基因中筛选得到，所述分子标记的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。在所述SEQ ID NO：1所示序列的第101位有一个C或T的碱基替换。本发明为猪的标记辅助选择提供了新的分子标记资源。
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公开(公告)号：CN110624115B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201910848326.2
申请日：2019-09-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K45/00 , A61P25/00 , A61P31/14 , C12N5/10 , C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/861 , C12N15/867 , C12N15/864 , C12Q1/6851 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种钙网蛋白(CALR)的应用，用于抑制病毒尤其是日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)在宿主细胞中复制,从而抵抗JEV病毒复制引起的疾病，提供针对流行性乙型脑炎的抗病性。本发明还提供了一种对抗病毒感染的细胞株和一种非人哺乳动物的抗流行性乙型脑炎动物模型及其制备方法。CALR在哺乳动物中高度保守，因此可以广泛应用于人畜共患传染疾病的预防与治疗，同时可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点，减少药物滥用，避免疫情发生，具有丰富的经济价值。
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公开(公告)号：CN110592172A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201911040376.4
申请日：2019-10-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了利用CRISPR/Cas9敲除文库技术筛选JEV抗性基因的方法与靶点。具体地，本发明提供了一种基于全基因组CRISPR/Cas9敲除文库策略，筛选JEV抗性相关基因的方法及候选靶基因。本发明方法先利用一个包含有针对猪全基因组的sgRNA质粒库包装慢病毒，感染Cas9稳定表达的猪体细胞，通过流式细胞术富集获得全基因组基因敲除细胞库。再利用JEV感染敲除细胞库，收集存活细胞，提取基因组DNA并进行PCR扩增，建库和高通量测序，最后利用生物信息学分析获得数十个JEV抗性候选功能基因。本发明建立了基于全基因CRISPR/Cas9敲除文库策略筛选猪的JEV抗病基因的方法，所鉴定的候选基因靶点可用于抑制JEV复制的靶向药物开发与抗病育种研究。
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公开(公告)号：CN119351620A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411283397.X
申请日：2024-09-12
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR/Gs12系统介导的多重核酸检测技术及应用，将不同Gs12核酸酶分别与相对应的特异crRNA和单链DNA报告基因进行组合，进而联合重组酶聚合酶扩增（RPA）方法，即可实现靶标核酸分子的四重、三重或二重特异准确检测。并由此开发了能同时区分塞内卡病毒（SVA）、猪瘟病毒（CSFV）、非洲猪瘟病毒（ASFV）的核酸检测技术与试剂盒。本发明方法可实现靶标核酸的快速多重检测，在核酸检测领域具有良好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN118581153A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202411060118.3
申请日：2024-08-05
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及DNA聚合酶介导的核苷酸序列编辑方法及组合物。本发明发现，细胞内源性DNA聚合酶能够介导核酸酶对靶核苷酸的编辑。这样能够在保证碱基效果的同时，避免来自于病毒或者细菌的细胞外源逆转录酶或者聚合酶所存在的免疫原应、低保真性等安全性问题。同时，也能够减少或避免外源性DNA聚合酶的使用，从而降低了递送难度。因而，本发明创建一种新型的更安全更容易递送的基因编辑工具及方法，为实现基因编辑技术在动物遗传性状改良、基因编辑育种与遗传疾病治疗等多个领域的开发应用提供了进一步的技术支持。
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